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α-淀粉酶菌株搖瓶發(fā)酵初篩及酶活力測(cè)定-全文預(yù)覽

  

【正文】 相關(guān)概念的介紹 復(fù)壯 —— 狹義的復(fù)壯僅是一種消極的措施,指的是在菌種已發(fā)生衰退的情況下,通過純種分離和測(cè)定典型性狀、生長(zhǎng)性能等指標(biāo),從已衰退的群體中篩選出少數(shù)尚在未退化的個(gè)體,以達(dá)到恢復(fù)原菌株固有性狀的相應(yīng)措施;而廣義的復(fù)壯則應(yīng)是一項(xiàng)積極的措施,即在菌種的典型特征或生產(chǎn)性狀尚未衰退前,就經(jīng)常有意識(shí)地采取純種分離和生產(chǎn)性狀的測(cè)定工作,以期從中選擇到自發(fā)的正變個(gè)體。 實(shí)驗(yàn)室搖瓶機(jī)(搖床)的作用 使培養(yǎng)基一直保持均勻狀態(tài) —— 菌體始終接觸到新的營(yíng)養(yǎng)成分(相對(duì)來說);快速稀釋代謝廢物(一般對(duì)細(xì)胞有毒害作用,對(duì)人類來說可能有用) 增加培養(yǎng)基中溶解氧的濃度,提高菌種的有氧代謝強(qiáng)度,加快物質(zhì)的轉(zhuǎn)化,有利于代謝產(chǎn)物的合成和積累。 37 ℃ ,搖瓶振蕩培養(yǎng) 23天。 搖瓶發(fā)酵試驗(yàn)時(shí)三角瓶裝量的要求 一般要求裝液量為三角瓶標(biāo)注容量的1/10~1/5 如 500ml三角瓶經(jīng)常加入 50~100ml(常裝 50ml或 100ml); 如 250ml三角瓶經(jīng)常加入 25~50ml(常裝 50ml); 注意:根據(jù)需要可以特制(如加擋板,增加溶解氧)。 一般包括:斜面活化(平板劃線形成單菌落);液體搖瓶培養(yǎng);種子培養(yǎng)(針對(duì)大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)) 相關(guān)概念的介紹 種子培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)成分相對(duì)豐富,一般無限制性因子,有利于菌體的增殖,生長(zhǎng)好; 發(fā)酵培養(yǎng)基: 營(yíng)養(yǎng)成分有利于積累所需代謝產(chǎn)物,一般在培養(yǎng)基有一些限制性因子(包括培養(yǎng)條件)。 根據(jù)結(jié)果可以判斷所選菌株產(chǎn)酶能力是否穩(wěn)定。 所選菌株產(chǎn) α淀粉酶搖瓶發(fā)酵復(fù)篩試驗(yàn)的安排 當(dāng)天上課時(shí)間制備發(fā)酵培養(yǎng)基, 3~5瓶 /株菌( 100mL/瓶),滅菌。 測(cè)定發(fā)酵液中 α淀粉酶酶活力單位(碘比色法)?;旌弦涸?15天內(nèi)使用有效。
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