《基因克隆》ppt課件-全文預(yù)覽
【正文】 AATTC 3? 3? CTTAAC 5? RE recognition/cleavage site are palindromic DNA sequences, not palidromic as in “ABBA”. . EcoRⅠ 5? GAATTC 3? 3? CTTAAG 539。 Restriction Endonuclease Enzymes 4 Ⅱ 型酶作用特點(diǎn) Ⅱ 型酶有嚴(yán)格的識(shí)別 、 切割順序 ， 以內(nèi)切方式水解雙鏈 DNA中的磷酸二酯鍵 ， 產(chǎn)生的 DNA片段 5’端為 P， 3’端為 OH。 Ex. EcoRⅠ G ?AATT C C TTAA?G Agarose Gel Electrophoresis 3 命名原則 H． O． Smith和 D． Nathams(1973)提議的命名系統(tǒng)已被公眾所接受 ， 其命名原則如下： 從大腸桿菌 （ ） R菌株分離到的幾種限制酶 ， 分別表示為 EcoRⅠ 、 EcoRⅡ 、 EcoRⅤ 等 。 I型和 Ⅲ 型限制酶在分子克隆中用途不大 。 一 、 Restriction Endonucleases 1 定義 限制性核酸內(nèi)切酶 （ 限制酶 ） ，是一類能識(shí)別和切割雙鏈 DNA分子內(nèi)特定堿基順序的核酸水解酶 。基因工程及體外表達(dá)體系（ 1） .酶 心血管病研究所 王佐 基因工程及體外表達(dá)體系 酶 載體 方法 第一節(jié) 概述 定義 基本步驟 意義 定義： 應(yīng)用酶學(xué)的方法，在體外將目的 基因與載體 DNA結(jié)合成一具有自 我復(fù)制能力的 DNA分子（復(fù)制 子、重組體），繼而通過(guò)轉(zhuǎn)化或 轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞、篩選出含有目的 基因的轉(zhuǎn)化子細(xì)胞，再進(jìn)行擴(kuò) 增、提取獲得大量同一 DNA分子 拷貝，或其 表達(dá)產(chǎn)物 。 基因工程大事記 1973 Cohen第一例成功的克隆實(shí)驗(yàn) 1978 Genentech公司 人胰島素 世界上第一種基因工程蛋白藥物 1982 第一個(gè)基因工程藥物 重組人胰島素在英、美獲準(zhǔn)使用 1985 第一批轉(zhuǎn)基因家畜（兔、豬和羊），中國(guó) 轉(zhuǎn)基因魚(yú) 1993 基因工程西紅柿在美國(guó)上市 1997 英國(guó)羅斯林研究所 多莉羊 中國(guó)獲準(zhǔn)加入人類基因組計(jì)劃 .
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