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《吸附層析》ppt課件 (2)-全文預(yù)覽

2025-06-02 02:01 上一頁面

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【正文】 率要足夠高 。色譜峰位置: “ 定性 ” 保留時間或保留體積;死時間或死體積;計算容量因子等參數(shù) 保留值定性的依據(jù) : 兩個相同的物質(zhì)在相同的色譜條件下應(yīng)該有相同的保留值 。色譜峰個數(shù): 與樣品組分?jǐn)?shù)有關(guān)l它反映分離的各組分從色譜柱洗出濃度隨時間的變化,從一個側(cè)面記錄組分在柱內(nèi)運(yùn)行的情況。按色譜原理分: 固定相 各組分對固定相柱 固定相裝于柱內(nèi)紙 固定相是液體,吸附在濾紙上,將樣品點在紙上,用流動相展開薄層 將有 適當(dāng)粘度的固定相涂在薄板上薄膜 與紙層析相似,紙用其它高分子有機(jī)吸附劑代替加樣操作示意圖5.吸附劑的再生色譜操作圖 吸附劑及用量3.記錄儀色譜柱梯度混合器圖 溶液梯度的形成鹽濃度 鹽濃度鹽濃度流出液體積 流出液體積流出液體積Ⅰ 型 Ⅲ 型Ⅱ 型恒流泵自動部分收集器紫外檢測儀記錄儀AKTA部分收集器梯度混合器色譜設(shè)備反之則結(jié)合力小,遷移率大。 層析床的外水體積 (Vo)、 內(nèi)水體積(Vi)、 總體積 (Vt)示意圖10.分配系數(shù)和遷移率 分配系數(shù)是指一組分在固定相與流動相中含量的比值。 9. 基質(zhì)體積 (Vg) 基質(zhì)體積是指基質(zhì)自身所具有的體積。即 Vt= Vo十 Vi十 Vg 6.洗脫體積 (Ve) 洗脫體積是指某一成分從柱頂部到底部的洗脫液中出現(xiàn)濃度達(dá)到最大值時的流動相體積。其數(shù)值大,表明基質(zhì)對某種成分的結(jié)合力強(qiáng)。在薄層層析時流動相又稱展層劑。色譜常用術(shù)語 1.固定相 固定相是由層析基質(zhì)組成的。 色譜分析法 是一種十分重要和應(yīng)用廣泛的儀器分析方法?!?與其它分離法相比,色譜法的高效率在于獨(dú)特的 “ 動態(tài)分離過程 ” ,即反復(fù)多次分配,它大大擴(kuò)大了原來分配系數(shù)的差異,從而實現(xiàn)混合物的分離。色譜與色譜分析它大大提高了色譜柱的穩(wěn)定性 , 延長了柱壽命 , 并使液膜進(jìn)一步增厚 , 提高了色譜性能 (如可在高溫下使用 )。 1955年 ,第一臺商品氣相色譜問世,標(biāo)志著現(xiàn)代色譜分析的建立。partitionforRichardArcher☆ 首次提出分離過程的 塔板理論 ,這是在色譜柱操作參數(shù)基礎(chǔ)上模擬蒸餾理論,以理論塔板來表示分離效率,定量地描述、評價分離過程;☆ 在色譜過程中最早引入分配平衡取代吸附平衡,即采用 分配色譜 進(jìn)行分離。eluentcolumnStationary把菊根粉或白堊粉( CaCO3)裝在玻璃管中,將植物葉子的 石油醚提取液 倒入管中,然后加入 石油醚淋洗 。Tswett, 18721919) 在華沙自然科學(xué)學(xué)會生物學(xué)會議上發(fā)表了 “一種新型吸附現(xiàn)象及其在生化分析上的應(yīng)用 ”研究論文,介紹了一種應(yīng)用吸附原理分離植物色素的新方法,并首先認(rèn)識到這種層析現(xiàn)象在分離分析方面有重大價值。 1903年 3月 21日俄國植物學(xué)家 茨維特( Michael茨維特被世人公認(rèn)為色譜創(chuàng)始人。提取液色帶Chromatographicor 獲得 1952年度的諾貝爾化學(xué)獎 Martin和Synge的主要工作 : 采用水分飽和的硅膠作固定相,以含有乙醇的氯仿作流動相,甲基橙作顯色劑(指示氨基酸的位置)分離苯丙氨酸、亮氨酸、異 亮氨酸和脯氨酸 纈氨酸 蛋氨酸等三組氨基酸?!? 提出了色譜法進(jìn)一步發(fā)展最有遠(yuǎn)見的預(yù)言 :一是 “ 流動相可用氣體來代替,對分離更有好處 ” ;二是 “ 使用非常細(xì)顆粒的填料和柱兩端施加較大的壓差,應(yīng)能得到最小的理論塔板 ” 。MartinSyngeof Van Deeter、Giddings等人對色譜理論的研究極大地促使色譜技術(shù)的發(fā)展。 80年代將固定液固載化是毛細(xì)管色譜技術(shù)的又一個重要發(fā)展。 1975年, Small, Stevens 和 Baumen發(fā)表 “ Novel Ion Exchange Chromatographic Method Using Conductimetric Detection” 一文,采用離子抑制柱 電導(dǎo)檢測器檢測,標(biāo)志著 離子色譜法 的誕生。▲ 物質(zhì)能否分離取決于它們之間是否存在
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