從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌實(shí)驗(yàn)方案說(shuō)明-全文預(yù)覽
【正文】 區(qū)域，點(diǎn)接重復(fù)兩次，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。劃線完畢，蓋上皿蓋，倒置于28~29176。每個(gè)濃度做3個(gè)平板（重復(fù)）。取已稀釋成101土壤液，用無(wú)菌的移液器吸取1mL土壤懸液加入102的無(wú)菌水的試管中，并在試管內(nèi)輕輕反復(fù)吹吸數(shù)次，使之充分混勻，即成102土壤稀釋液。 香柏油、二甲苯吲哚試驗(yàn)：乙醚、吲哚試劑：40％NaOH溶液、α奈酚，淀粉酶活力測(cè)定：1%3, 5 二硝基水楊酸試劑 儀器或其它用具無(wú)菌玻璃涂棒 無(wú)菌吸管 接種環(huán) 無(wú)菌培養(yǎng)皿 土樣 三角瓶 燒杯 洗瓶 玻棒 試管 酒精燈 擦鏡紙 接種環(huán) 酒精燈 載玻片 吸水紙等。 配制營(yíng)養(yǎng)明膠培養(yǎng)基（%）：蛋白胨 、調(diào)pH ~（%）：①蛋白胨1 氯化鈉2 ～ 蒸餾水 ②蛋白胨1 氯化鈉10 ～ 蒸餾水 ③蛋白胨1 氯化鈉20 ～ 蒸餾水 ④蛋白胨1 氯化鈉25 ～ 蒸餾水 加入15%氫氧化鈉溶液約2mL，～。四、實(shí)驗(yàn)材料和用具 土樣采集：采集廣大植物園內(nèi)的有機(jī)土壤，和生化樓下花壇的有機(jī)土壤 營(yíng)養(yǎng)瓊脂(%)：蛋白胨1 ～ 蒸餾水 將除瓊脂以外的各成分溶解于蒸餾水內(nèi)，加入15%氫氧化鈉溶液約2mL，～?？莶菅挎邨U菌和地衣芽孢桿菌在糖發(fā)酵試驗(yàn)用阿拉伯糖，木糖和甘露糖代替葡萄糖可產(chǎn)酸；作為營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)的最低限培養(yǎng)基是無(wú)維生素的，但含有葡萄糖、檸檬酸鹽和一個(gè)氨態(tài)鹽作為唯一的碳源和氮源【6】。其基本原理是選擇適合與待分離微生物的生長(zhǎng)條件，如營(yíng)養(yǎng)成分、酸堿度、溫度和氧等要求，或加入某種抑制劑造成只利于該微生物生長(zhǎng)，而抑制其他微生物生長(zhǎng)的環(huán)境，從而淘汰一些不需要的微生物。土壤中微生物的數(shù)量因土壤類型、季節(jié)、土層深度與層次等不同而異。所以此次實(shí)驗(yàn)從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的芽孢桿菌。從紡織工業(yè)到廢水處理，這些酶都有不同規(guī)模的應(yīng)用【1】。它們將淀粉及相關(guān)的聚合物分解為帶有具體淀粉分解酶特征的產(chǎn)品。它們廣泛存在于微生物、植物和動(dòng)物體中。在釀造發(fā)酵工業(yè)如酒精生產(chǎn)、啤酒制造、發(fā)酵原料液化及糖化工藝過(guò)程中均有重要價(jià)值,如添加淀粉酶分布非常廣泛，是人們經(jīng)常研究的一種酶。由于芽孢桿菌屬是一類好氧或兼性厭氧、產(chǎn)生抗逆性內(nèi)生抱子的桿狀細(xì)菌，許多為腐生菌，主要分布于土壤和植物體表面及水體中【4】。土壤具有微生物進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖和生命活動(dòng)中所需的各種條件。平板分離法普遍用于微生物的分離與純化。芽孢桿菌屬的共同特征是：革蘭氏陽(yáng)性；接觸酶陽(yáng)性；水解淀粉；VP試驗(yàn)陽(yáng)性；不產(chǎn)生吲哚；苯甲氨酸不脫氨；分解酪素；不分解酪氨酸；不產(chǎn)生二羥丙酮；營(yíng)養(yǎng)體的最高生長(zhǎng)溫度大約從25℃到75℃以上；最低生長(zhǎng)溫度大約5℃到45℃；生長(zhǎng)最低pH值，—8到2左右；耐鹽范圍從低于2%的NaCl到25%NaCl；營(yíng)養(yǎng)明膠（22℃）7天內(nèi)液化1厘米或1厘米以上。:體積比一般病源菌分子大四倍數(shù)，占據(jù)空間優(yōu)勢(shì)，抑制有害菌的生長(zhǎng)繁殖。7H2O) 瓊脂2 溴麝香草酚藍(lán)溶液4 酚紅試劑 先將鹽類溶解于水中，校正pH，再加入瓊脂，加熱融化，然
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