分子生物學(xué)總結(jié)-全文預(yù)覽
【正文】 成的基本過程 ①識(shí)別 RNA聚合酶中的σ因子識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)②起始 RNA聚合酶作用③延長(zhǎng) ④終止 終止子——作用就是在DNA模板上特定位點(diǎn)終止RNA的合成，從而釋放出RNA 聚合酶和RNA分子。 啟動(dòng)子包含：轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)、10區(qū)、35區(qū)及在10框和35框之間較嚴(yán)格的距離。d、有特定的起始和終止位點(diǎn)；e、依賴于RNA聚合酶合成的RNA中，如只含一個(gè)基因的遺傳信息，稱為單順反子（真核生物）；如含有幾個(gè)基因的遺傳信息，則稱為多順反子（原核生物）RNA轉(zhuǎn)錄合成的條件 a、底物：四種核糖核苷酸，即ATP，GTP，CTP，UTP。1轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)座的特征：1. 兩端有反向重復(fù)序列；；；。兩個(gè)親本DNA分子間造成一大段異源雙鏈DNA（ Holliday結(jié)構(gòu)）F：E和F相同；G：繞交聯(lián)橋旋轉(zhuǎn)1800；J：形成Holliday異構(gòu)體；I、通過兩種方式之一切斷DNA單鏈，若左右切，則形成非重組體，若上下切則形成重組體Holliday模型的產(chǎn)物有兩種：片段重組體、拼接重組體RecA的兩個(gè)功能：a、促進(jìn)DNA單鏈與同源雙鏈發(fā)生鏈交換，使重組中DNA配對(duì)、Holliday中間體形成、分支移動(dòng)等步驟得以進(jìn)行；b、誘發(fā)SOS反應(yīng)轉(zhuǎn)座子：可以從基因組的一個(gè)位置轉(zhuǎn)移到新位置的DNA序列?！久~解釋】：DNA損傷 SOS反應(yīng) 基因突變 第六章 DNA的重組與轉(zhuǎn)座遺傳重組或基因重排：DNA分子內(nèi)或分子間發(fā)生遺傳信息的重新組合遺傳重組的類型：a、同源重組：大腸桿菌中的同源重組需要RecA蛋白、RecBC蛋白功能： A：維持種群的遺傳多樣性； B：有助于DNA的損傷修復(fù)； C：使真核生物產(chǎn)生第一次減數(shù)分裂中染色體正確分離到子細(xì)胞至關(guān)重要的瞬間物理連接。②錯(cuò)義突變：基因編碼序列中堿基的置換如果發(fā)生在密碼子的第1或第2位堿基上，導(dǎo)致某密碼子改變，并編碼另一種氨基酸，則是錯(cuò)義突變。引起DNA損傷的因素：①自發(fā)因素——a、脫嘌呤和脫嘧啶 b、堿基的脫氨基作用 c、堿基的互變異構(gòu) d、細(xì)胞正常代謝產(chǎn)物對(duì)DNA的損傷。⑦RPA：真核生物的單鏈結(jié)合蛋白；RNaseH1和MF1切除RNA引物，DNA聚合酶ε填補(bǔ)缺口。③真核生物DNA復(fù)制速度比原核慢 (僅為原核生物的1/20～1/50）。引發(fā)體：參與引物合成的蛋白質(zhì)復(fù)合體稱為引物體。{DNA復(fù)制的酶體系}：DNA聚合酶的反應(yīng)特點(diǎn)：①以4種dNTP作為底物；②反應(yīng)需要模板指導(dǎo)；③新鏈的延伸需要有引物3’OH存在；④鏈延伸方向?yàn)?5’——3’；⑤產(chǎn)物DNA的極性與模板相對(duì)。 復(fù)制子：基因組內(nèi)能獨(dú)立進(jìn)行復(fù)制的單位稱為復(fù)制子或復(fù)制單位。⑦與真核基因組類似，也有可移動(dòng)的DNA序列；⑧具有編碼同工酶的基因；⑨重復(fù)序列較少。基因組DNA的C值定理：將真核生物單倍體基因組所包含的全部DNA含量稱為該物種的的C值基因組DNA的C值悖理：C值悖理是指真核生物中DNA含量的反?，F(xiàn)象。 舉例：人類的ABO血型系統(tǒng)。 ③斷裂基因：指基因的編碼序列在DNA分子上是不連續(xù)排列的，而是被不編碼的序列所隔開。4. 功能相關(guān)的基因串聯(lián)在一起形成基因家族（ 來源相同，結(jié)構(gòu)相似，功能相關(guān)的基因）5. 非編碼序列占90%以上，編碼序列10%。原核、真核生物基因的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)比較：原核生物真核生物1. 功能相關(guān)基因高度集中，多順反子形式存在；2. 編碼蛋白質(zhì)的基因通常以單拷貝的形式存在；3. RNA基因常是多拷貝的；4. 細(xì)菌中的結(jié)構(gòu)基因沒有居間序列，故它們的基因是連續(xù)的；5. 細(xì)菌中DNA大部分是用于編碼蛋白質(zhì)（90%），只有很少不編碼 的DNA序列（10%）；6. 細(xì)菌的結(jié)構(gòu)基因重復(fù)序列少；7. 單個(gè)染色體呈環(huán)狀，染色體DNA不和蛋白質(zhì)固定地結(jié)合。 ③功能單位（順反子，又叫作用子） 基因中指導(dǎo)一條多肽鏈的合成DNA序列，平均大小約為5001500bp。 ①突變單位（突變子）發(fā)生突變的最小單位。 核酸的分子雜交：兩條來源不同的單鏈核酸（DNA或RNA），只要它們有大致相同的互補(bǔ)堿基順序，經(jīng)退火處理即可復(fù)性，形成新的雜種雙螺旋，這一現(xiàn)象稱為核酸的分子雜交。 常用的核酸分子雜交技術(shù)有：原位雜交、斑點(diǎn)雜交、Southern雜交、Northern雜交、Wester印跡法等【名詞解釋】：探針：將已知順序的核酸片段用放射性同位素或生物素進(jìn)行標(biāo)記。DNA濃度越大，兩條互補(bǔ)鏈彼此相遇的可能性越大，復(fù)性速度也越快。1將變性DNA經(jīng)退火處理，使其重新形成雙螺旋結(jié)構(gòu)的過程，稱為DNA的復(fù)性。1DNA 的變性溫度Tm ：加熱DNA溶液，使其對(duì)260nm紫外光的吸收度突然增加，達(dá)到其最大值一半時(shí)的溫度，就是DNA的變性溫度?！竞怂岬淖冃浴?fù)性和分子雜交】1DNA的變性：在理化因素作用下，DNA雙螺旋的兩條互補(bǔ)鏈松散而分開成為單鏈，從而導(dǎo)致DNA的理化性質(zhì)及生物學(xué)性質(zhì)發(fā)生改變，這種現(xiàn)象稱為DNA的變性。③在真核生物中，rRNA有四種：5S，18S，28S。1rRNA的結(jié)構(gòu)與功能①rRNA是細(xì)胞中含量最多的RNA，占總量的80%。3) tRNA是單鏈核酸，含73~93個(gè)核苷酸,但其分子中的某些局部也可形成雙螺旋結(jié)構(gòu)。②3′端多數(shù)帶有多聚A（Poly A）的尾巴③分子中可能有修飾堿基,主要是甲基化④分子中有編碼區(qū)與非編碼區(qū)。 RNA的功能：①作為細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成中核蛋白復(fù)合物的結(jié)構(gòu)組分，參與蛋白質(zhì)的生物合成；②具有生物催化劑功能，作用于初始產(chǎn)物的剪接加工；③參與基因表達(dá)的調(diào)控；④與生物體的進(jìn)化有關(guān)。核心組蛋白，包括H2A、H2B、HH4和H1組蛋白。 反義核酸：是根據(jù)堿基互補(bǔ)原理，用人工合成或生物體自身合成的特定互補(bǔ)的DNA或RNA片段（或其化學(xué)修飾的衍生物），能夠與目的序列結(jié)合，通過空間位阻效應(yīng)或誘導(dǎo)RNase活性，在復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、剪接、mRNA轉(zhuǎn)運(yùn)及翻譯等水平，抑制或封閉目的基因的表達(dá)。分子生物學(xué)的概念：分子生物學(xué)是研究核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能，并從分子水平上闡明蛋白質(zhì)與核酸、蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)之間的相互作用的關(guān)系及其基因表達(dá)調(diào)控機(jī)理的學(xué)科。細(xì)胞學(xué)說的主要內(nèi)容有：① 細(xì)胞是有機(jī)體， 一切動(dòng)植物都是由單細(xì)胞發(fā)育而來， 即生物是由細(xì)胞和細(xì)胞的產(chǎn)物所組成；② 所有細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和組成上基本相似；③ 新細(xì)胞是由已存在的細(xì)胞分裂而來；④ 生物的疾病是因?yàn)槠浼?xì)胞機(jī)能失常。端粒酶：是一種自身攜帶模板RNA的逆轉(zhuǎn)錄酶，催化端粒DNA的合成，能夠在缺少DNA模板的情況下延伸端粒內(nèi)3’端的寡聚核苷酸片段，包含兩個(gè)活性位點(diǎn)，即逆轉(zhuǎn)錄酶活性和核酸內(nèi)切酶活性。染色質(zhì)蛋白質(zhì)分為兩類：組蛋白和非組蛋白。染色質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)：1） 染色質(zhì)的一級(jí)結(jié)構(gòu)——核小體 2）染色質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)——螺線體 3）染色質(zhì)的三級(jí)結(jié)構(gòu)——超螺線體 4）染色質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)——染色單體 主要的RNA種類有rRNA（核糖體RNA）、mRNA（信使RNA）、tRNA(轉(zhuǎn)移RNA)、HnRNA（核不均一RNA）、SnRNA（核內(nèi)小RNA）、SnoRNA（核仁小分子RNA）、ScRNA（細(xì)胞質(zhì)RNA）等。真核生物mRNA結(jié)構(gòu)的特點(diǎn)：①5 ′末端有帽子結(jié)構(gòu)。2) tRNA是保守性最強(qiáng)的RNA。6) 二級(jí)結(jié)構(gòu)為三葉草形, 三級(jí)結(jié)構(gòu)為倒L型。其中，16S的rRNA參與構(gòu)成核蛋白體的小亞基，而5S和23S
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