生物大分子的電子顯微鏡技術(shù)-全文預(yù)覽
【正文】 染色后的樣品以投影角度 5~9186。 PH在 6~10之間 。 ? 適合觀察核酸分子的形狀和長(zhǎng)度、雙鏈或單鏈的區(qū)分、根據(jù)長(zhǎng)度計(jì)算核酸的分子量； ? 進(jìn)行異源雙鏈分子分析、分子雜交、轉(zhuǎn)錄復(fù)合體、核酸蛋白質(zhì)復(fù)合體等研究； ? 基因組織結(jié)構(gòu)、基因片段的缺失、斷裂基因、插入或倒臵、基因定位及堿基組成特征等方面的研究。如果將核酸樣品混合在溶液中，堿性蛋白上的氨基酸堿性基團(tuán)便與核酸分子鏈上的酸性基團(tuán)以水合鍵結(jié)合，核酸分子相對(duì)穩(wěn)定地固著在蛋白質(zhì)分子上。 ,器具潔凈 ,無去污劑等殘留 。 5ug∕ml以上 。 分子長(zhǎng)度測(cè)量及計(jì)算 ? 對(duì)已知的標(biāo)準(zhǔn)分子進(jìn)行觀察和計(jì)算，完整的分子的長(zhǎng)度應(yīng)相對(duì)一致。 ? 核酸分子太細(xì)需要加粗； ? 提高電子反差。 蛋白質(zhì)單分子展層操作 ? 對(duì)核酸樣品和試劑的要求： ，去除其他混雜的核酸和蛋白質(zhì)成份； ,并盡量保持其長(zhǎng)鏈的完整性 。 C,電泳純 。,用鉑 ~鈀合金進(jìn)行旋轉(zhuǎn)投影 ,或再加噴一薄層碳膜 ,以增加強(qiáng)度 . 電鏡觀察要求 ?染色，投影后，核酸分子的直徑從 20A增至80~100A，故在 10萬倍以下可以觀察到； 蛋白質(zhì)單分子膜展層技術(shù)的原理 ? 某些堿性蛋白質(zhì)在低鹽溶液或水的表面形成不溶性變性薄膜，單濃度和加到溶液表面的量合適，該膜就展開成為單分子層，也就是一個(gè)多肽鏈構(gòu)成的分子網(wǎng)。 特點(diǎn)和應(yīng)用 ? 樣品量少；操作簡(jiǎn)便；制備樣品時(shí)間短。 。 RNA樣品的試劑與器具須高溫烘烤 ,使 RNA酶失活 . 樣品配制 ?醋酸銨法 : 上相液組成 :醋酸銨 (終濃度 )~2Mol()
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