【正文】 光束從 垂直方向通過； (b)光透薄層體系：正視和側(cè)視圖。這些技術(shù) 分為現(xiàn)場 (in situ)和非現(xiàn)場 (ex situ)方法。 圖 多維液相色譜分離模式 (a) 2DSECRPLCMS。 Davis等曾經(jīng)指出 : 只用一維分離方法對含有 100個隨機分布組分 的樣品進行分離，完全分離其中的 82個組分大約需要四百萬理論 塔板數(shù)。 圖 電噴霧電離 接口示意圖 圖 大氣壓化學電離接口示意圖 是將化學電離原理延伸到大氣壓下進行的一種新的軟電離技 術(shù)。 API主要包括電噴霧電 離（ ESI）和大氣壓化學電離（ APCI）兩種 操作模式。在接口研制方面，前后共發(fā)展了 20多種技術(shù)， 其中主要有直接導(dǎo)入接口（ DLI）、移動帶接口 （ MB）、熱噴霧接口（ ES）、粒子束接口（ PB）、 和快原子轟擊（ FAB）等，但這些技術(shù)都不同程度的 存在一些方面的限制和缺陷。 另外，液相色譜與單級質(zhì)譜聯(lián)用（ LCMS） 雖然已經(jīng)具有足夠高的靈敏度，但是僅能提 供分子量信息，而液相色譜與多級質(zhì)譜聯(lián)用 （ LCMS/MS）則可提供分子結(jié)構(gòu)的信息， 此外，通過 MS/MS的選擇反應(yīng)控制模式 (SRM) 或多反應(yīng)檢測模式 (MRM)可以提高 信噪比，在復(fù)雜樣品分析時仍可達到很高的 靈敏度。液相色譜 質(zhì)譜聯(lián)用 技術(shù)將液相色譜的 高分離效能和質(zhì)譜的高靈敏度 及較強的結(jié)構(gòu)解析能力 有機的結(jié)合在一起，樣品 經(jīng)過液相色譜分離后，借助質(zhì)譜分析結(jié)果進行鑒 定，開辟了復(fù)雜樣品分離和檢測的新天地。 質(zhì)量是物質(zhì)的固有特征之一 ，質(zhì)譜分析中，表現(xiàn)為不同荷質(zhì)比 的化合物對應(yīng)不同的離子譜峰，由此，根據(jù)質(zhì)譜分析結(jié)果可以 獲得被分析物的分子量，從而實現(xiàn)對各物質(zhì)進行定性分析，另 外，離子譜峰的強度與其所代表的化合物含量有一定關(guān)系，所 以，利用這一點可以對各物質(zhì)進行半定量分析。 圖 電噴霧質(zhì)譜儀 圖 典型的電噴霧質(zhì)譜圖 液相色譜－質(zhì)譜聯(lián)用 作為化學領(lǐng)域最強有力的分離分析技術(shù)之一，自上世紀 70年代以 來，液相色譜 (LC)，特別是高效液相色譜（ HPLC）得到了迅速 的發(fā)展，無論在色譜基礎(chǔ)理論，還是在儀器性能方面都得到了很 大程度的提高和完善。電噴霧質(zhì)譜不僅能夠產(chǎn)生多電荷離 子、對某些極性物質(zhì)電離效率高（對蛋白質(zhì)接近 100 %），而 且具有軟電離等特性，因而成為極性化合物（包括溶液中的離 子），熱穩(wěn)定性差和高分子量化合物分析最有效的工具之一。 圖 電噴霧離子化過程示意圖 電噴霧的一般理論 ESI放電電壓 (V0)與表面張力 (Ts)、毛細管半徑 ( r)及 針尖與采樣板間距離 (h)的關(guān)系可用下式表示： 04lnshV T rr?() 在實驗中雖然并不用它來進行計算，但卻可以定性地 幫助理解電噴霧的條件。 (2) 大分子帶電殘基機理：首先也是電場使溶液帶電而離子化，結(jié) 果形成帶電霧滴，帶電的霧滴在電場作用下運動并迅速去溶， 溶液中分子所帶電荷在去溶時被保留在分子上，結(jié)果形成離子 化的分子。 (4) 解吸電噴霧電離 DESI)： 是在 2022年所發(fā)展出來的新 電離 法。 可與許多進樣 技術(shù)兼容 ，如 FIA, HPLC, CE等。 MALDI可以與不同類型的檢測器相互結(jié)合，特別是 飛行 時間質(zhì)譜 (TOF)，即 MALDITOF質(zhì)譜！ 圖 The Agilent Pulsed Dynamic Focusing MALDI (PDFMALDI) 圖 MALDITOFMS的實際圖 MALDITOF MS中樣品離子化 將 TOF譜圖轉(zhuǎn)化為常規(guī) 譜圖 圖 The MALDITOF Spectra for Poly(Propylene Glycol) 摘自： ., 2022,76,15321536. Richard B. van Breeman et al 圖 大氣壓電離質(zhì)譜方法 APIMS指在大氣壓下使樣品有效地電離并引入與質(zhì)譜的 接口，再進行質(zhì)譜分析。 問題：為什么 Tanaka獲得了 Nobel 化學獎，而非 Hillenkamp? MALDI的優(yōu)缺點： 優(yōu)點： 對樣品要求低，能耐高濃度鹽、緩沖劑 和其他非揮發(fā)性成分。靈敏度 109 mol數(shù)量級。 MALDI中的基體起著如下幾種重要作用： （ 1）基體相當于樣品分子的 溶劑 ，樣品分子被基體 彼此分開，從而消弱了樣品之間的相互作用； （ 2）基體分子從脈沖激光中吸收足夠的能量，隔離 樣品分子，提供光激發(fā)的酸或減基團，以及在離子 分子碰撞中電離樣品分子。 圖 MALDI技術(shù)原理示意圖 激光光束的能量首先被基體中的發(fā)色團吸收，隨后這些 基體迅速蒸發(fā)為氣相，被包含的樣品分子被帶入氣相， 而離子化的產(chǎn)生是由于受激的基體分子將質(zhì)子轉(zhuǎn)移給樣 品分子。 MALDI之所以得到發(fā)展，得 益于早期試驗用激光解吸及等離子體解吸生物有機分子 的成功，也得益于 FAB生物基質(zhì)的進展。隨著 FAB、 MALDI、 ESI、 ISI、大氣壓下碰撞電離 (APCI)等電離技術(shù)的出現(xiàn)，大大提高了質(zhì)譜的測定范圍，改善了 測量靈敏度，并在一定程度上解決了溶劑分子干擾等問題，使質(zhì) 譜在生物分析中的應(yīng)用得到進一步的發(fā)展。 二維質(zhì)譜： 兩種不（相）同類型的質(zhì)譜串聯(lián)在一 起可形成二維質(zhì)譜。 圖 質(zhì)譜儀器組成示意圖 質(zhì)譜儀的核心是 離子源 和 分析器 ，其他的部分一般 根據(jù)離子源和分析器相應(yīng)地配備。 蛋白質(zhì)組學的研究之所以能夠蓬勃發(fā)展，主要依賴于高通量分離 和分析技術(shù)的突破性進展。 生物質(zhì)譜的最基本用途是能夠測量多肽 /蛋白質(zhì) /核酸等生物大分 子的分子質(zhì)量，并間接推測它的結(jié)構(gòu)及相互作用。 生物質(zhì)譜 (新質(zhì)譜法 )是現(xiàn)代分析化學及相關(guān)生化研究的熱點 之一和蛋白質(zhì)組學的主要手段。 新質(zhì)譜法 質(zhì)譜學簡介及其特點 1906年 (Mass spectroscopy, MS)， 但直至 1920s左右質(zhì)譜法才逐漸成為一種分析手段，被化學 家采用。 例如：無機與有機化 合物共存一體，高分子、大分子與小分子化合物共存一體，生命 與非生命物質(zhì)共存一體等。 所謂復(fù)雜樣品體系，不僅僅是指樣品中的組分多樣性，而且還包 含完全不同體系的物質(zhì)共存于一個樣品中。 聯(lián)用技術(shù)的重要性和必要性！ 本章在簡介新質(zhì)譜方法的同時，也將介紹色 譜 質(zhì)譜 聯(lián)用技術(shù)