胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用_畢業(yè)論文正文-全文預(yù)覽
【正文】 和 Sox2 在 Yamanaka 的研究中也很關(guān)鍵。他們利用叛轉(zhuǎn)錄病毒載體在小鼠成纖維細(xì)胞中導(dǎo)入了 4 個(gè)與多能型有關(guān)的基因 — Oct Sox cmyc、 Kif4。 Willmut等從一只六歲妊娠母羊乳腺中采取細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)傳代和血清饑餓法處理后，通 過(guò)核移植得到277 枚融合胚，再經(jīng)體內(nèi)培養(yǎng)后有 29 枚發(fā)育到囊胚，移植給 13 只受體母羊，其中有一只妊娠并最終產(chǎn)下了一只活羔，從而誕生了世界首例成年體細(xì)胞核移植后代。 1990 年 Thomsn 和 Gearhrt 利用內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和原始生殖細(xì)胞分別建立了人的胚胎干細(xì)胞系，這一結(jié)果的宣布將胚胎干細(xì)胞的研究又解開(kāi)了新的一頁(yè)！國(guó)內(nèi)在胚胎干細(xì)胞方面的綜合性研究起步晚（ 1989 年），但發(fā)展迅速。 1． 3 原始生殖細(xì)胞 PGCs 是生殖譜系區(qū)別于體細(xì)胞的最初形式 ， 是哺乳動(dòng)物生殖細(xì)胞的祖細(xì)胞 ， 早在 1980 年以前 ， Jeon 和 Brinster 就分別對(duì)小鼠 的 PGCs 的形態(tài)結(jié)構(gòu)和能量代謝進(jìn)行了研究； 1992 年，Matsui 等和 Resniek 等以分離小 鼠胎兒的 PGCs 為材料 ,培養(yǎng)傳代獲得 面地證實(shí) PGCs 同樣可以作為 ESCs 分離克隆的原材料 [5]。這一成果給移植治療、藥物發(fā)現(xiàn)及篩選等等帶來(lái)深遠(yuǎn)的影響，打開(kāi)了在體外培養(yǎng)更多類(lèi)型的可供移植治 療的人體細(xì)胞、組織和器官的大門(mén)。 ESCs 的發(fā)育全能性備受科學(xué)界的關(guān)注，而它所具有的廣泛應(yīng)用價(jià)值，已經(jīng) 成為當(dāng)今國(guó)內(nèi)外生命科學(xué)研究的熱點(diǎn)。這兩類(lèi)細(xì)胞均可分化為包括神經(jīng)細(xì)胞、造血干細(xì)胞、心肌細(xì)胞等在內(nèi)的各種細(xì)胞 [2]。 遲至 1998 年，美國(guó)威斯康辛大學(xué)的生物學(xué)家 James Thomson 及其同事才首次分離、建成了第一個(gè)人的胚胎干細(xì)胞系 [3]。 1998 年， 美國(guó)學(xué)者 Shamb lott 等首先從受精后 5— 9 周的人胚胎生殖嵴分離， 培養(yǎng)并建立了 EGCs 系。 1981 年美國(guó)科學(xué)家 Evans 和 Kaufman 從小鼠胚胎分離出胚胎干細(xì)胞病成功建立，從此開(kāi)辟了哺乳動(dòng)物胚胎干細(xì)胞研究的新紀(jì)元。中國(guó)軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院發(fā)現(xiàn)了“人胚胎干細(xì)胞素”，用于臨床多種疾病的治療取得了明顯效果！ 體細(xì)胞核移植 通過(guò)顯微操作和細(xì)胞融合技術(shù)，見(jiàn)單細(xì)胞核體（卵裂球或體細(xì)胞的核）一如去核的受體（卵母細(xì)胞或受精卵）胞質(zhì)構(gòu)成重組胚，通過(guò)對(duì)重組胚的激活、培養(yǎng)得到動(dòng)物胚胎干細(xì)胞。在目前的克隆實(shí)驗(yàn)中，不同物種間克隆的效率略有區(qū)別，但總效率不高！ iPS 細(xì)胞 iPS 細(xì)胞首先是由 Takahashi 和 Yamanaka 在 2020 年建立的。不久，另外兩項(xiàng)研究相繼報(bào)道了利用形態(tài)學(xué)作為篩選標(biāo)準(zhǔn)來(lái)建立 iPS 細(xì)胞的方法，這一方法在建立人類(lèi) iPSxde 研究中具有潛在的優(yōu)勢(shì)。在短短一年多的時(shí)間里， iPS 細(xì)胞的建立方法有了明顯的改善，并且成功的應(yīng)用于人類(lèi)細(xì)胞的研究和疾病模型動(dòng)物的治療，說(shuō)明這一方法既有可操作性和穩(wěn)定性，并且其 安全性也在不斷提高，因此這種方法對(duì)將來(lái)的醫(yī)學(xué)研究有著巨大的價(jià)值！ 湖北大學(xué)自考 獨(dú) 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 5 第 三 章 ESCs 的基本特征 3． 1 形態(tài)學(xué)特性 各種動(dòng)物的 ESCs 具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)： 細(xì)胞體積小，胞質(zhì)胞漿少，細(xì)胞核大，有一個(gè)或多個(gè)核仁，胞質(zhì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，散布著大量的核糖體和線粒體，核形正常，保留了雙倍體性質(zhì)。 3． 2 基本特征 3． 2． 1 多能性 (Pluripotency) ESCs的多能性是指 ESCs具有分化出多種細(xì)胞組織的潛能，參與部分組織的形成。③嵌合體：通過(guò)顯微注射或其它方式使 ESCs 與受體胚結(jié)合，嵌合后，嵌合體 就會(huì)參與多種組織發(fā)育。由于來(lái)源于著床前胚胎的 ESCs 的某些細(xì)胞表面免疫相關(guān)蛋白 (如 MHC)還未來(lái)得及表達(dá)，用于移植時(shí)不易產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，因此使其成為移植治療和 細(xì)胞治療的潛在資源 [6]。 3． 3 ESCs 建系概況 ESCs 建系的原理是將早期胚胎或是用外科手術(shù)法得到 的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或者 PGCs，與分化抑制物 共同培養(yǎng)，使之增殖而又保持未分化狀態(tài)， 這樣代代相傳，從而使數(shù)量有限的胚胎或者 PGCs能夠成千上萬(wàn)倍的克隆。常規(guī)使用的培養(yǎng)液有白血病細(xì)胞抑制因子 (LIF)、胎牛血清、 L 一谷氨酸、非必須氨基酸 (NEAA)以及高濃度的 DME 等。 目前廣泛應(yīng)用的飼養(yǎng)層有三種，STO(一種已建系的小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 )、 Pmef(小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞 )。因此，從理論上說(shuō)，可提取動(dòng)物睪丸 SCs，然后將 PGCs與 SCs 共培養(yǎng)，不僅可促進(jìn) PGCs 貼壁。 5． 2 器官移植 ESCs 作為一種“ 種子細(xì)胞” 為臨床的組織、器官移植提供 了大量的材料， hESC 經(jīng)過(guò)免疫排斥基因剔除后．再定向誘導(dǎo)終末器官以避免不同個(gè)體間的移植排斥，這樣就可能解決一直困擾著免疫學(xué)界及醫(yī)學(xué)界的同種異型個(gè)體間的移植排斥難題。 藥學(xué)研究方面 湖北大學(xué)自考 獨(dú) 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 10 胚胎干細(xì)胞系可分化為多種細(xì)胞類(lèi)型，又是能在培養(yǎng)基中不斷自我更新的細(xì)胞來(lái)源。雖不會(huì)完全取代在整個(gè)動(dòng)物和人體上的實(shí)驗(yàn)，但會(huì)使藥品研制的過(guò)程更為有效。人胚胎干細(xì)胞
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