胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用_畢業(yè)論文正文-文庫(kù)吧
2025-07-22 23:30 本頁(yè)面
【正文】 家實(shí)驗(yàn)室各自的研究證實(shí)了該結(jié)果的可靠性，并且提高了生產(chǎn)的 iPS 細(xì)胞的質(zhì)量。不久，另外兩項(xiàng)研究相繼報(bào)道了利用形態(tài)學(xué)作為篩選標(biāo)準(zhǔn)來(lái)建立 iPS 細(xì)胞的方法，這一方法在建立人類(lèi) iPSxde 研究中具有潛在的優(yōu)勢(shì)。在新近研究中， Yamanaka 等人用他們?cè)谛∈笾惺褂眠^(guò)的 4 種銀子實(shí)現(xiàn)了人湖北大學(xué)自考 獨(dú) 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 4 類(lèi)皮膚成 纖維細(xì)胞的重編程；而 Thomson 實(shí)驗(yàn)室選用的是他們自己篩選出的 4 種銀子Oct4,Sox2,Nanog 和 Lin28，其中 Oct4 和 Sox2 在 Yamanaka 的研究中也很關(guān)鍵。緊隨其后，Yamanaka 小組又在原有工作基礎(chǔ)上取得重要突破；從 4 個(gè)轉(zhuǎn)錄因子中去掉了腫瘤相關(guān)因子CMyc，使 iPS 細(xì)胞的產(chǎn)生更為安全。目前，已有研究將 iPS 細(xì)胞用于治療鐮刀型貧血癥小鼠。在短短一年多的時(shí)間里， iPS 細(xì)胞的建立方法有了明顯的改善，并且成功的應(yīng)用于人類(lèi)細(xì)胞的研究和疾病模型動(dòng)物的治療，說(shuō)明這一方法既有可操作性和穩(wěn)定性，并且其 安全性也在不斷提高，因此這種方法對(duì)將來(lái)的醫(yī)學(xué)研究有著巨大的價(jià)值！ 湖北大學(xué)自考 獨(dú) 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 5 第 三 章 ESCs 的基本特征 3． 1 形態(tài)學(xué)特性 各種動(dòng)物的 ESCs 具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)： 細(xì)胞體積小，胞質(zhì)胞漿少，細(xì)胞核大，有一個(gè)或多個(gè)核仁，胞質(zhì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，散布著大量的核糖體和線粒體，核形正常，保留了雙倍體性質(zhì)。在體外培養(yǎng)的小鼠 ESCs 緊密堆積，呈集落狀生長(zhǎng)，細(xì)胞之間界限不清，集落邊緣可見(jiàn)少量已分化的扁平上皮細(xì)胞或梭形成纖維細(xì)胞。不同動(dòng)物胚胎干細(xì)胞直徑有所不同?？偟膩?lái)說(shuō)， ESCs 具有與胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)特征。 3． 2 基本特征 3． 2． 1 多能性 (Pluripotency) ESCs的多能性是指 ESCs具有分化出多種細(xì)胞組織的潛能，參與部分組織的形成。表明 ESCs發(fā)育多能性的檢測(cè)方法很多 ， 主要有：①形成類(lèi)胚體：體外培養(yǎng)誘導(dǎo)分化實(shí)驗(yàn)，將 ESCs 在不含分化抑制物的培養(yǎng)基上培養(yǎng) ?？?形成胚樣結(jié)構(gòu)類(lèi)胚體，類(lèi)似于正常胚胎的囊胚期，隨后可進(jìn) 行不同程度的分化產(chǎn)生多種分化細(xì)胞。②特定組織： 將 ESCs 在含有特定添加物的培養(yǎng)基中培養(yǎng) ， 可定向分化形成特定組織。③嵌合體：通過(guò)顯微注射或其它方式使 ESCs 與受體胚結(jié)合，嵌合后，嵌合體 就會(huì)參與多種組織發(fā)育。 3． 2． 2 可操作性 ESCs 的可操作性，是指 ESCs 可進(jìn)行遺傳操作選擇 (如導(dǎo)入異源基因、基因重組 )等生物學(xué)特性。在體外抑制分化培養(yǎng)時(shí)， ESCs 不但可以增殖，而且可以被用來(lái)進(jìn)行各種操作，而這一點(diǎn)是以 ESCs 的以下兩方面特性為前提的：①在對(duì) ESCs 進(jìn)行各種操作的過(guò)程中，其仍能保持其擴(kuò)增和發(fā)育的全能性和多能性。②用于移植時(shí)，不易產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。由于來(lái)源于著床前胚胎的 ESCs 的某些細(xì)胞表面免疫相關(guān)蛋白 (如 MHC)還未來(lái)得及表達(dá)，用于移植時(shí)不易產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)，因此使其成為移植治療和 細(xì)胞治療的潛在資源 [6]。 湖北大學(xué)自考 獨(dú) 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 6 3． 2． 3 全能性 (totipotenty) ESCs 的全能性是指其在解除分化抑制的條件下，能發(fā)育為構(gòu)成機(jī)體不同細(xì)胞類(lèi)型中包括生殖腺在內(nèi)的任何一種細(xì)胞的潛 力。 ESCs 具有很強(qiáng)的分化能力，可以無(wú)限增殖并分化成為全身 200 多種細(xì)胞類(lèi)型，進(jìn)一步形成機(jī)體的所有組織和器官。細(xì)胞全能性的實(shí)質(zhì)是細(xì)胞基因組中決定蛋白質(zhì)編碼的所有基因按一定的時(shí)空順序依次表達(dá)。 3． 3 ESCs 建系概況 ESCs 建系的原理是將早期胚胎或是用外科手術(shù)法得到 的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或者 PGCs，與分化抑制物 共同培養(yǎng)，使之增殖而又保持未分化狀態(tài)， 這樣代代相傳，從而使數(shù)量有限的胚胎或者 PGCs能夠成千上萬(wàn)倍的克隆。 湖北大學(xué)自考 獨(dú) 立本科段 論文 胚胎干細(xì)胞的研究與應(yīng)用 7 第 四 章 PGCs 用于胚胎干細(xì)胞培養(yǎng) 4． 1 意義 ESCs 因其發(fā)育的全能性和多樣性而備受關(guān)注。雖然來(lái)源于 PGCs 的 ESCs 與來(lái)源于 ICM 的細(xì)胞同屬胚胎干細(xì)胞系，但相比之下，前者具有著更加巨大的科學(xué)意義和實(shí)踐價(jià)值：①由于獲得囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)來(lái)源的 ESCs 需要破壞具 有生命的胚 胎，所以這項(xiàng)研究在許多國(guó)家是被禁止或嚴(yán)格限制的 [7]，而 PGC 來(lái)源于早期流產(chǎn)的胚胎，于是來(lái)源于 PGCs 的 EGCs 系的建立 給研究人員帶來(lái)了新的希望；② PGcs 是胚胎形成后機(jī)體的干細(xì)胞，與胚泡期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)相比，經(jīng)歷了著床的篩選，而生理狀態(tài)下有相當(dāng)量的胚泡因生長(zhǎng)發(fā)育不良而不能正常著床并自行排出，因此PGCs 的健
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