1什么是感受態(tài)？細菌處于0℃01mcacl2低滲溶液中使菌細胞膨脹成-全文預(yù)覽
【正文】 10 610 9 倍。上清液中加入無水乙醇使 DNA 沉淀，沉淀 DNA 溶于 TE 溶液中，即得植物總 DNA 溶液。 （ 1）透析袋的處理 （ 2）切膠時要盡可能的貼近 DNA （ 3）盡可能的排完透析袋中的空氣 （ 4） 透析袋水平放入電泳槽（長度方向與電泳平行）， 加入適量緩沖液將透析袋浸沒 （ 5）電泳結(jié)束時要反向電泳 1 分鐘左右 DNA提取的原理 通常采用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞，由于植物細胞勻漿含有多種酶類 (尤其是氧化酶類 )對 DNA 的抽提產(chǎn)生不利的影響，在抽提緩沖液中需加入抗氧化劑或強還原劑(如巰基乙醇 )以降低這些酶類的活性。 DNA的基本原理 將電泳分離后含目的ＤＮＡ片段的瓊脂糖切割下來， 裝于透析袋中，繼續(xù)在高電壓下電泳，這時目的ＤＮＡ?xí)哪z中電泳出進入透析袋中， 由于ＤＮＡ分子量大，不能透過透析袋，從而保留于透析袋中。 DNA染色的原理及注意事項 溴化乙錠（ EB）為扁平狀分子，在紫外照射下發(fā)射熒光。 凝膠電泳不僅可分離 不同相對分子質(zhì)量的 DNA，也可以分離相對分子質(zhì)量相同，但構(gòu)型不同的 DNA分子。 DNA 分子在堿性環(huán)境中帶負電荷，在外加電場作用下向正極泳動。 （ 4） 通常延長時間可使所需的酶量減少，在切割大量 DNA 時可用。進行酶切消化時，將除酶以外的所有反應(yīng)成分加入后即混勻，再從 20℃ 冰箱中取出酶，立即放置于冰上。絕大多數(shù)限制性內(nèi)切酶識別長度為 5 或 6 個核苷酸且呈二重對稱的特異序列，切割位點相對于二重對稱軸的位置因酶而異。微生物常常通過質(zhì)粒倡導(dǎo)從而在自然條件下發(fā)生基因重組，常見的方式有：接合、傳導(dǎo)、轉(zhuǎn)化 。 DNA 的基本原理 堿裂解法提取質(zhì)粒是根據(jù)共價閉合環(huán)狀質(zhì)粒 DNA 與線性 染色體 DNA 在拓撲學(xué)上的差異來分離它們。 1ng 的 cccDNA 即可使 50μl 的感受態(tài)細胞達到飽和。 DH5α 菌株的 OD600 為 時 ,細胞密度在 5107 個 /ml左右 (不同的菌株情況有所不同 ),這時比較合適。 (10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體，以免影響準(zhǔn)確度。 (6)移液器未裝吸頭時，切莫移液。 (1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指，絕不允許突然松開，以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。 (6) 放離心管：一定要對稱放置，尤其是 的管子離心時，因為這種轉(zhuǎn)子樣品孔很多，容易放錯。 (2 )溫度：開機后可以先 2500rpm 空轉(zhuǎn)，直到達到設(shè)定溫度為止。 3. 什么是質(zhì)粒？ 獨立于染色體之外的共價閉合環(huán)狀 DNA。 2. 什么是轉(zhuǎn)化？ 轉(zhuǎn)化是指
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