【正文】 224。,第六十頁，共一百一十七頁。 t243。然后與電泳方向平行，挖一小槽，加入含相應(yīng)抗體的免疫血清，與已分離的各抗原成分在瓊脂內(nèi)作雙相免疫擴(kuò)散，各區(qū)帶在相應(yīng)位置與抗體形成沉淀弧。nlǐ)圖解,第六十二頁，共一百一十七頁。 4. 電泳完畢后，用毛細(xì)滴管在槽內(nèi)加入含相應(yīng)抗體，孵育，使抗原抗體雙相擴(kuò)散，形成沉淀線。r,第六十五頁，共一百一十七頁。n)，可鑒定混合抗原中各 組分。,由于免疫電泳的影響因素較多，對(duì)異常結(jié)果的 分析增加了復(fù)雜性。)并記錄沉淀弧出現(xiàn)的情況。,聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE)是利用(l236。 PAGE分辨率很高。n)： 圓盤狀電泳 平板電泳 被分離的物質(zhì)是否變性： 非變性、變性（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）,第七十二頁，共一百一十七頁。ngpǐn)夾在快、慢離子之間被濃縮成極窄 的區(qū)帶。,操作方法,分離(fēnl237。,Gc的聚丙烯酰胺凝膠圓盤電泳條件：凝膠 濃度(n243。,第七十六頁，共一百一十七頁。 等電聚焦：這種按等電點(diǎn)的大小，生物分子在 pH梯度的某一相應(yīng)位置上進(jìn)行聚焦的行為稱等 電聚焦。,等電聚焦的特點(diǎn)就在于它利用了一種稱為兩性電解質(zhì)載體的物質(zhì)在電場中構(gòu)成連續(xù)的pH梯度，使蛋白質(zhì)或其他具有兩性電解質(zhì)性質(zhì)的樣品進(jìn)行聚焦，從而達(dá)到分離、測定和鑒定(ji224。,采用(cǎiy242。,第七十九頁，共一百一十七頁。qīng)類粘蛋白型,血清類粘蛋白（ORM）：是存在(c,一、ORM的生化性質(zhì)與生物學(xué)功能 由肝臟及淋巴細(xì)胞合成，血清中的含量(h225。 ORM的肽鏈結(jié)構(gòu)中富含脯氨酸，具有較高 的穩(wěn)定性和耐熱性,第八十二頁，共一百一十七頁。ng)是通過抑制 免疫反應(yīng)來調(diào)控免疫系統(tǒng),第八十三頁，共一百一十七頁。nli224。,三、群體遺傳學(xué)調(diào)查結(jié)果 在調(diào)查過的群體中，ORM1*F1，ORM1*S 的基因頻率均大于0.01，在所以人群中 ORM1均具有遺傳多態(tài)性，并且(b236。)的改變，血清電泳后用抗－ ORM血清免疫固定可顯示ORM表現(xiàn)型的 電泳譜型,第八十九頁，共一百一十七頁。i)上反應(yīng)個(gè)體差異的遺傳標(biāo)記 一、免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)與分類,第九十頁，共一百一十七頁。g242。)不同及二 硫鍵的數(shù)目和位置不同將IgG進(jìn)一步分為 四個(gè)亞類: IgG IgG2 、IgG IgG4 根據(jù)輕鏈恒定區(qū)的不同可分為兩型：κ型 和λ型,第九十四頁，共一百一十七頁。 其中Gm Gm17表現(xiàn)出對(duì)偶(du236。r)Gm因子單倍型中組合數(shù)目多寡 也不同 事實(shí)上，由于稀有單倍型的存在，在群體調(diào) 查中所檢出表現(xiàn)型數(shù)往往多于常見表現(xiàn)型,第九十七頁，共一百一十七頁。iy)的差異， 即使在中國漢族群體中Gm因子分布 也呈明顯不均一現(xiàn)象,第一百頁，共一百一十七頁。,六、法醫(yī)學(xué)意義 Gm、Km系統(tǒng)個(gè)人識(shí)別率及非父排除率均 高于已知的紅細(xì)胞血型(xu232。bāo)運(yùn)輸,第一百零三頁，共一百一十七頁。等電點(diǎn)為5.5，含糖量為６％，分子量為79570，含679個(gè)氨基酸殘基，由單一肽鏈組成,第一百零四頁，共一百一十七頁。每分子(fēnzǐ)Tf可結(jié)合2分 子的Fe3+。每天血紅蛋白分解代 謝，釋出25mg左右的鐵。因此，任何生長、 增殖細(xì)胞的膜上都有鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的受體。 用淀粉(di224。所有群體中都有TfC基因，而其他 變異體基因頻率很低,第一百一十頁，共一百一十七頁。,四、轉(zhuǎn)鐵蛋白型的法醫(yī)學(xué)應(yīng)用 正常人血清(xu232。,第七節(jié) α1－抗胰蛋白酶(y237。i)型,α1－抗胰蛋白酶（ α1－AT）是肝臟合 成的具有抑制胰蛋白酶活性的酶類，缺乏(quēf225。jiāng)中正常含量為2100－ 2500mg/L，分子量為50000－54000，等 電點(diǎn)為4.2－4.8 功能：維持蛋白酶與蛋白酶抑制物之間的 平衡，保護(hù)組織免受蛋白水解酶的分解,第一百一十五頁，共一百一十七頁。ir243。測出，個(gè)別情況直至15歲以后才能測出。yǒu)遺傳多態(tài)性，并且均以。但采用尸體標(biāo)本或血痕標(biāo)本測定轉(zhuǎn)鐵蛋白,第一百一十七頁，共一百一十七頁。定位于３號(hào)染色體長臂上，由常染色體單。非變性、變性（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）。HP11 由兩條hp1α和兩條hpβ鏈組。jiāo)技術(shù) （三）PCR,第一百一十六頁，共一百一十七頁。 因其基因和基因產(chǎn)物有較高的遺傳多態(tài) 性，也受到法科學(xué)工作者的廣泛關(guān)注,第一百一十四頁，共一百一十七頁。n b225。,但采用尸體標(biāo)本或血痕標(biāo)本測定轉(zhuǎn)鐵蛋白 的型別時(shí)，泳帶譜往往表現(xiàn)為“階梯(jiētī)”狀，即 由負(fù)極到正極出現(xiàn)附加帶。 h233。,其中， TfB及TfD又可分出至少二十多種 變異型，這些變異型有嚴(yán)格的人群和地域 分布(fēnb249。,第一百零八頁，共一百一十七頁。,鐵是許多含鐵蛋白質(zhì)生物(shēngw249。,主要生理功能：１．運(yùn)輸鐵，將鐵從腸、 肝等吸收(xīshōu)或儲(chǔ)存部位 運(yùn)輸?shù)嚼描F的部 位； ２．具有抗感染功能 此外，還與鋅的吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān),第一百零六頁，共一百一十七頁。是由肝臟內(nèi)合成 的糖蛋白。b236。ng)、紅細(xì)胞酶型及其 他血清型，且Gm與Km抗原在常溫下或 堿性環(huán)境中很穩(wěn)定，溶血對(duì)抗原性無大影 響，所以Gm、Km系統(tǒng)具有很高的法醫(yī)學(xué) 應(yīng)用價(jià)值,第一百零二頁，共一百一十七頁。ngji224。,四、 Gm型與Km型在人群中的分布 Gm系統(tǒng)的單倍型頻率隨人群、種族 及地域的不同而表現(xiàn)出較大(ji224。tǒng)有三個(gè)因子： Km（1）、 Km（2）、 Km（3），其中Km（1） 和 Km（3）為對(duì)偶關(guān)系 Km系統(tǒng)的等位基因有Km Km1，2和 Km3三個(gè)，按常染色體共顯性規(guī)律遺傳,第九十八頁，共一百一十七頁。,各Gm因子在單倍型上的組合隨人群、種 族及地域的不同而異。nɡ zhǒnɡ)異型遺傳標(biāo)記分別以符 號(hào)G1m、 G2m、 G3m、Am、 Em、 Km代表 不同的免疫球蛋白亞類之間用分號(hào)隔開， 同一亞類之間用逗號(hào)隔開，基因型或單 倍型數(shù)字用右上角碼標(biāo)明,第九十五頁，共一百一十七頁。,根據(jù)IgG重鏈恒定區(qū)氨基酸排列(p225。,第九十二頁，共一百一十七頁。nɡ zhǒnɡ)異 型遺傳標(biāo)記,同種異型遺傳標(biāo)記是位于免疫球 蛋白(d224。,由于ORM2基因座上的基因頻率分布不 好，沉默基因ORM2*Q0又較常見，加之 ORM2基因座的表達(dá)產(chǎn)物含量僅為ORM1 的1/3，所以(suǒyǐ)ORM2分型的法醫(yī)學(xué)價(jià)值 不如ORM1分型好,第八十八頁，共一百一十七頁。,在ORM1基因座上，除了(ch)連鎖， 常見等位基因按孟德爾定律共顯性方式遺 傳 在ORM1上有共顯性等位基因： ORM1*F ORM1*FORM1*S， 決定六種表現(xiàn)型,第八十四頁，共一百一十七頁。因此，它被認(rèn)為