20xx年醫(yī)學專題—流式細胞儀分析技術應用(文件)
【正文】 36。,盡量選擇熒光光譜重疊小的熒光素 PECy5/APC amp。,盡量(jǐnli224。ngguāng)素,得州紅,能量傳遞復合染料,藻膽蛋白類,（一）幾種常見的熒光染料,第三十一頁，共五十二頁。,用化學法將兩種不同激發(fā)波長的染料結合在一起，在488nm激發(fā)光照射下，通過一個熒光染料被激發(fā)后產(chǎn)生的發(fā)射(fāsh232。)染料,第三十三頁，共五十二頁。nb225。在多數(shù)熒光素標記抗體組合應用之前，必須將每種抗體單獨應用和組合應用的結果進行比較，一旦這種組合顯示出與單獨應用時無差別的結果時，這種組合才可以應用于多色免疫表型分析。因此組合抗體應用濃度應比單獨抗體使用濃度高。,血液(xu232。ijǐng),干細胞的研究意義現(xiàn)在已經(jīng)越來越重要。 現(xiàn)有的單細胞技術主要包括單細胞分選、培養(yǎng)、單細胞PCR、單細胞多色Fish、單細胞基因組及表觀遺傳學分析、免疫缺陷鼠移植鑒定在內的單細胞技術。影響單細胞分選效果的因素有很多。,第三十八頁，共五十二頁。,第三十九頁，共五十二頁。,熒光抗體(k224。q236。 缺點：石英杯長度有限，而且激光光學裝置需要足夠空間避免不同通道間的串擾，細胞需要通過不同的介質，且速度不一樣，高速下細胞密度變大，與流動池和噴嘴接觸面變大，不能保證在液滴延遲時間內到。保持細胞清潔的更好，并且能提供額外的激光束。 su224。建立良好的補償矩陣，這樣的補償計算更標準。這將極大提高(t237。iyǎng)鑒定,將分好的單細胞至于相應的培養(yǎng)基中進行14天培養(yǎng)，培養(yǎng)后對每板細胞存活比例(bǐl236。,技術(j236。,CD34PE CD38FITC CD34+ CD38 細胞 1/ PE Isotype。 PE Isotype : 單陽管對照, 設置補償 4/ CD34PE 。sh249。,溫度 pH 染料(rǎnli224。xīn)速度 無菌操作,（三）分選后細胞(x236。ng)總結,實驗室流式細胞儀單細胞分選技術。A、B、C均為任意門。PE.PC.APC。,。溫度25~37℃，pH7.0~7.2。o)降解（光照/固定/升溫等）造成的干擾。等高圖上每一條連續(xù)曲線上具有相同的細胞相對或絕對數(shù)，即“等高”。,內容(n232。)的質控,第五十頁，共五十二頁。b232。,適當?shù)闹苽浞绞?處理紅細胞 實體(sh237。)的影響 2/ CD34PE 。)路線,第四十六頁，共五十二頁。,1 細胞(x236。,第四十四頁，共五十二頁。,接收工具(gōngj249。w233。,第四十二頁，共五十二頁。nlǐ)：激光檢測是在細胞通過噴嘴后的液滴中。nɡ li)：LinCD34+CD38CD45RACD90+CD49f+Rholow 白血病干細胞的分選標記：CD34+CD38CD71CD90CD117CD123+CD96+CD47+ 種屬來源：鼠 正常造血干細胞分選標記: LinSca1+cKit+CD34Flk2 或者 LinSca1+cKit+CD150+CD48 MLLAF9 AML白血病干細胞的分選標記: LinSca1cKit+ CD16/32+CD34+ 或 cKi
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