20xx年醫(yī)學(xué)專題—流式細(xì)胞儀分析技術(shù)應(yīng)用(更新版)
【正文】 共五十二頁。如3種抗體單獨(dú)使用時(shí)的最佳用量為20μl，而3種抗體組合應(yīng)用時(shí)如果(rngs232。nɡ y242。)的抗原選擇較亮的熒光素 CD62L on CD8+T 防止耦聯(lián)染料降解（光照/固定/升溫等）造成的干擾 APCCy7/PECy7,二、常用的熒光染料與標(biāo)記(biāoj236。如果需要的話，可以提高EDTA的濃度(至5mM)以避免細(xì)胞重新黏聚。)聚集，即便配方中沒有EDTA也不會(huì)造成問題。bāo) 培養(yǎng)細(xì)胞的樣品制備 蛋白酶消化 機(jī)械吹打 使貼壁細(xì)胞脫落 洗滌 尼龍網(wǎng)過濾,一、免疫檢測(cè)樣品(y224。,A 淋巴細(xì)胞 B 單核細(xì)胞 C 中性(zhōngx236。,多參數(shù)分析(fēnxī)：當(dāng)細(xì)胞標(biāo)記了多色熒光，被激發(fā)光激發(fā)后，得到的熒光信號(hào)和散射光信號(hào)可根據(jù)需要進(jìn)行組合分析(fēnxī)。bāo)相對(duì)或絕對(duì)數(shù)，即“等高”。nh224。ng)，反映同樣散射光或熒光強(qiáng)度的顆粒數(shù)量的多少。)的顯示與分析,第八頁，共五十二頁。與純度成反比。bāo)分選原理,第五頁，共五十二頁。,（1） 液流系統(tǒng)(x236。,第二頁，共五十二頁。sh249。ngfēnxī)或純化分選。nx237。,分選速度：?jiǎn)挝粫r(shí)間內(nèi)分選的細(xì)胞數(shù)量。,（二）分選的技術(shù)(j236。),第九頁，共五十二頁。,單參數(shù)(cānsh249。)直方圖,第十三頁，共五十二頁。,第十五頁，共五十二頁。,Gate設(shè)置：指在某一張選定參數(shù)的直方圖上，根據(jù)該圖的細(xì)胞群分布選定其中想要分析的特定細(xì)胞群，并要求該樣本所有其他(q237。)門,第二十一頁，共五十二頁。)法 酶處理法 化學(xué)試劑處理法 表面活性劑處理法 單細(xì)胞懸液的保存 深低溫保存法（一年） 乙醇或甲醇保存法（2周） 甲醛或多聚甲醛保存法（2月）,第二十五頁，共五十二頁。o)黏著而EDTA可抑制此作用,第二十七頁，共五十二頁。)Sorting buffer加0.83mM MgCl2以及20 U DNAase II (Sigma D4138)。ng)選擇熒光光譜重疊小的熒光素,Minimize the potential for spectral overlap Spillover estimates available in the spectra viewer,2,第三十頁，共五十二頁。)波長(zhǎng)再激發(fā)另一熒光染料產(chǎn)生熒光信號(hào)，從而檢測(cè)到該特定熒光信號(hào)。i),能量傳遞復(fù)合染料機(jī)制,第三十四頁，共五十二頁。一種新的抗體組合設(shè)計(jì)后必須進(jìn)行這種比對(duì)試驗(yàn)，這種組合一旦應(yīng)用與臨床，不可隨便改換抗體組合或抗體的克隆。 白血病干細(xì)胞的研究一直走在整個(gè)學(xué)科的前沿，引領(lǐng)學(xué)科的發(fā)展。（比如目的分離(fēnl237。,研究(y225。)的比較,石英杯激發(fā) 原理：激光檢測(cè)是在石英杯中進(jìn)行的 優(yōu)點(diǎn)：比色皿提供層流(c233。 缺點(diǎn)：對(duì)于敏感性來說，空氣激發(fā)不那么敏感。,第四十三頁，共五十二頁。)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，然后對(duì)存活的各孔細(xì)胞向各系進(jìn)行分化趨向的統(tǒng)計(jì)。 FITCIsotype : 設(shè)置陰性對(duì)照門, 去除抗體非特異性吸附(xīf249。)的質(zhì)量控制,（一）單細(xì)胞懸液制備(zh236。bāo)的培養(yǎng),第五十一頁，共五十二頁。防止耦聯(lián)染料(rǎnli2
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