【正文】 0.7。n)分光光度法,測定波長(bōch225。2nm以內(nèi)，并以吸光度最大的波長作為測定波長。ng)的方法進(jìn)行。,高效(ɡāo xi224。 注意： 如使用緩沖液或含鹽溶液作為流動相，在試驗結(jié)束后，應(yīng)先用不含鹽的流動相沖洗，使色譜柱內(nèi)的鹽完全溶解洗脫出來，再用較高濃度的甲醇/乙腈水溶液沖洗。o)液相色譜法,檢測器,第五十五頁，共九十一頁。0.2pH值單位。lǜ)，用前脫氣處理。,高效(ɡāo xi224。,第五十七頁，共九十一頁。ng)二極管陣列檢測器檢查峰純度。 別離度：除另有規(guī)定外，待測物質(zhì)色譜峰與相鄰色譜峰之間的別離度應(yīng)大于1.5。)色譜系統(tǒng)的檢測能力。o)液相色譜法,拖尾因子：以峰高作定量參數(shù)時，除另有規(guī)定外，T值應(yīng)在0.95～1.05之間；以峰面積作定量參數(shù)時，嚴(yán)重拖尾會對積分造成(z224。采用內(nèi)標(biāo)法時，通常配制相當(dāng)于80%、100%和120%的對照品溶液，參加規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成3種不同濃度的溶液，分別至少進(jìn)樣2次，計算平均校正因子,其RSD應(yīng)不大于2.0%。 外標(biāo)法 加校正因子的主成分(ch233。,高效(ɡāo xi224。當(dāng)對其測定結(jié)果產(chǎn)生爭議時，應(yīng)以品種(pǐnzhǒng)項下規(guī)定的色譜條件的測定結(jié)果為準(zhǔn)。nzh232。,高效(ɡāo xi224。*不含靈敏度，定性、定量、溶出度、含量均勻度測定無需驗證；有關(guān)物質(zhì)需驗證靈敏度，到達(dá)對照〔品〕溶液二十分之一即可。ngli224。 注：新方法中應(yīng)注明載氣流速。 pǔ)柱：填充柱、毛細(xì)管柱。 驗證工程：鑒別試驗，限量或定量檢查，原料藥或制劑中有效成分含量測定，制劑中其他成分〔如防腐劑等〕測定，獸藥溶出度、釋放度中溶出量的測定。 在分析方法驗證中，須采用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進(jìn)行試驗。 ③ 視具體情況予以驗證。ng)指導(dǎo)原那么,準(zhǔn)確度：方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，一般用回收率〔％〕表示。,第六十九頁，共九十一頁。 中藥化學(xué)成分測定 用對照品進(jìn)行加樣回收率測定，即向被測成分含量的供試品中再精密參加一定量的被測成分對照品，依法測定。 相對校正因子可采用替代物〔對照品〕和被替代物〔待測物〕標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率比值進(jìn)行比較獲得；采用紫外吸收檢測器時，可將替代物〔對照品〕和被替代物〔待測物〕在規(guī)定波長和溶劑條件下的吸收系數(shù)比值進(jìn)行比較，計算(j236。,第七十一頁，共九十一頁。 ②3種不同濃度〔化學(xué)藥1.2﹕1﹕0.8﹕1左右；中藥(zhōngy224。,第七十二頁，共九十一頁。n)程度。,第七十四頁，共九十一頁。u)范圍,第七十五頁，共九十一頁。nz224。,獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證(y224。 雜質(zhì)不可得：①與另一得到驗證方法比較； ②加速破壞試驗。 檢測限作為限度試驗(sh236。 數(shù)據(jù)要求 上述計算方法獲得的檢測限數(shù)據(jù)須用含量相近的樣品進(jìn)行驗證。)準(zhǔn)確度和精密度要求。,獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證(y224。zh224。,獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)(zhǐdǎo)原那么,范圍：分析方法能到達(dá)一定精密度、準(zhǔn)確度和線性要求時的上下限濃度或量的區(qū)間。30％，或為下限的20％至上限的+20％； 雜質(zhì)測定：規(guī)定限度的177。,獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)(zhǐdǎo)原那么,耐用性：在測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度。ix237。,分析方法驗證轉(zhuǎn)移(zhuǎny237。,分析方法驗證(y224。當(dāng)獸藥生產(chǎn)工藝變更、制劑的組分變更、原分析方法進(jìn)行修訂時，那么質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法也需進(jìn)行驗證。ng)轉(zhuǎn)移確認(rèn),方法轉(zhuǎn)移 方法研發(fā)實驗室建立(ji224。,分析方法驗證(y224。ngpǐn)及其檢驗報告。ng)轉(zhuǎn)移確認(rèn),方法確認(rèn) 一是對象是藥典分析方法或法定分析方法 二是證明藥典分析方法或法定分析方法適用于被測樣品 三是證明方法使用人員(r233。,分析方法驗證(y224。 新標(biāo)準(zhǔn)要進(jìn)行方法確認(rèn),第八十八頁，共九十一頁。,內(nèi)容(n232。規(guī)定的這些數(shù)值不管是百分?jǐn)?shù)還是絕對數(shù)字，其最后一位數(shù)字都是有效位。謝 謝,第九十一頁，共九十一頁。比色池：1cm石英吸收(xīshōu)池。ng)總結(jié),?中國獸藥典?二〇一五年版 〔一部〕 解讀 汪 霞 wangxiaivdc.org 。o)液相色譜法〔氣相色譜法〕 四、獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)原那么 五、分析方法驗證轉(zhuǎn)移確認(rèn),第八十九頁，共九十一頁。ng)轉(zhuǎn)移確認(rèn),方法確認(rèn) 無需確認(rèn)的工程：枯燥失重、熾灼殘渣、重金屬、熱分析法、各種濕法化學(xué)分析，如酸值測定、用簡單(jiǎndān)儀器進(jìn)行的檢驗，如pH值測定等。n)有能力成功地操作藥典分析方法或法定分析方法。,分析方法驗證(y224。ng)轉(zhuǎn)移確認(rèn),方法轉(zhuǎn)移 研發(fā)實驗室 接收實驗室 質(zhì)控實驗室、分地點質(zhì)控實驗室、合同公司質(zhì)控實驗室、產(chǎn)品購置公司質(zhì)控實驗室、注冊或復(fù)核檢驗實驗室 比對性測試 被測樣品(y224。)了分析方法經(jīng)過驗證后，其他實驗室使用這個方法進(jìn)行檢測，出現(xiàn)方法在2個〔方法研發(fā)和方法接收〕不同實驗室之間轉(zhuǎn)移，方法接收實驗室要證明其能夠成功地在本實驗室運行該方法，就是方法轉(zhuǎn)移了。,分析方法驗證(y224。ng)轉(zhuǎn)移確認(rèn),方法驗證〔上一局部已介紹〕 在建立獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)時，分析方法需經(jīng)驗證，這項工作大多是由產(chǎn)品研發(fā)者來完成，從新產(chǎn)品雛形開始質(zhì)量控制方法研究就要介入，隨著產(chǎn)品研發(fā)過程的不斷深入，產(chǎn)品的質(zhì)量控制方法也在根據(jù)產(chǎn)品的變化而不斷調(diào)整和優(yōu)化，最終(zu236?！搏F藥典：方法驗證的目的是證明采用的方法適合于相應(yīng)檢測要求。 氣相：不同品牌或批號的色譜柱、固定相、不同類型的擔(dān)體、載氣流速、柱溫、進(jìn)樣口和檢測器溫度等。 典型變動因素：被測溶液的穩(wěn)定性、樣品的提取次數(shù)、時間等。 校正因子測定時，范圍一般應(yīng)根據(jù)其應(yīng)用對象的測定范圍確定。sh236。 數(shù)據(jù)要求：應(yīng)列出回歸方程、相關(guān)系數(shù)和線性圖〔或其他數(shù)學(xué)模型〕。ng)指導(dǎo)原那么,線性：在設(shè)計的范圍內(nèi)，測試響應(yīng)值與試樣中被測物濃度呈比例關(guān)系的程度。應(yīng)附測試圖譜，說明測試過程和定量限結(jié)果，包括準(zhǔn)確度和精密度驗證數(shù)據(jù)。,獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)(zhǐdǎo)原那么,定量限：被測物能被定量測定的最低量，其測定結(jié)果應(yīng)符合(fn)指標(biāo)和定性鑒別的依據(jù)，沒有定量意義。,第七十七頁，共九十一頁。ng)指導(dǎo)原那么,含量測定和雜質(zhì)測定 雜質(zhì)可得：向試樣中參加(jiār249。 如方法專屬性不強，應(yīng)采用多種不同原理的方法予以補充。nzh232。nzh232。 中間精密度：同實驗室、不同時間、不同人員。ngpǐn)中待測成分含量和回收率限度,第七十三頁，共九十一頁。 應(yīng)報告測定方法、測定結(jié)果和RSD%或置信區(qū)間。nzh232。n)獲得。,獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)(zhǐdǎo)原那么,校正因子的準(zhǔn)確度 絕對〔或定量〕校正因子是指單位面積的色譜峰代表的待測物質(zhì)的量。j236。 制劑： ①處方量空白輔料(fǔ li224。,獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證(y224。,獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分析方法驗證指導(dǎo)(zhǐdǎo)原那么,① 已有重現(xiàn)性驗證，不需要驗證中間精密度。nw233。 溫度設(shè)置：柱、進(jìn)樣口〔高于柱溫30~50℃〕、檢測器〔FID比柱溫高，不低于150 ℃ ，通常為250~350 ℃ 〕,第六十六頁，共九十一頁。 注：頂空進(jìn)樣方法中，應(yīng)注明平衡溫度、平衡時間、傳輸線溫度、定量環(huán)溫度等。,第六十五頁，共九十一頁。,高效(ɡāo xi224。nh242。 轉(zhuǎn)換需調(diào)整的參數(shù)：流速、進(jìn)樣量、梯度洗脫程序。,高效(ɡāo xi224。 相比于HPLC，UPLC的運行時間更短、別離度更好、靈敏度更高、溶劑用量更少。n)自身對照法〔雜質(zhì)檢查〕 不加校正因子的主成分自身對照法〔雜質(zhì)檢查〕 面積歸一化法：用于雜質(zhì)檢查時，由于儀器響應(yīng)的線性限制，峰面積歸一化法一般不宜用于微量雜質(zhì)的檢查。,高效(ɡāo xi224。nɡ)影響，此時應(yīng)在品種正文項下對拖尾因子作出規(guī)定。,第五十