反芻動(dòng)物源性枯草芽孢桿菌的分離與鑒定畢業(yè)論文(文件)
【正文】 19. [11] 魏姍姍，馬紅霞，高云航等 .豬源益生枯草芽孢桿菌的分離鑒定及培養(yǎng)條件優(yōu)化 [J].中國(guó)飼料 .20xx，（ 05） :21 [12] 范利霞，郝永清，張萍慧等 .反芻動(dòng)物復(fù)合微生態(tài)制劑的研制 . 20xx， 31(1)： 2325. [13] 胡桂學(xué) .獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教程 [M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社， 20xx. [14] ， .伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)（第 8 版） [M].北京：科學(xué)出版社， 1999 [15] 東秀珠，蔡妙英 .常見(jiàn)細(xì)菌系統(tǒng)鑒定手冊(cè) [M].北京：科學(xué)出版社， 20xx:4265. [16] 張紅英，楊霞，金鉞，等 .雞腸源芽孢桿菌的分離、鑒定和抗菌活性 [J].中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志，20xx,19（ 6）： 504506. [17] 王振華，潘康成 .不同濃度中藥對(duì)枯草芽孢桿菌體外生長(zhǎng)的影響 [J].中國(guó)獸醫(yī)雜志， 20xx,43（ 10）： 4445. [18] 肖經(jīng)緯，崔濤，孟會(huì)林，等 .3 種急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)方法的比較 [J].毒理學(xué)雜志， 20xx,21（ 2）：135136. [19] LAU S K P,WOO P C Y,WOO G K S,et al. Catheterrelated microbacterium bacteremia identified by 16S rDNA gene sequencing[J]. J Clin Microbiol,20xx,40(7):26812685. 16 。為了驗(yàn)證枯草芽孢桿菌作為微生態(tài)試劑的安全性，利用該菌做了安全性試驗(yàn)，用 濃度約為 1011cfu/mL 菌液灌服空腹8h 的小鼠，兩周后小鼠沒(méi)有死亡，剖檢觀察小鼠腹腔和胸腔的器官也無(wú)病變， 說(shuō)明我們分離得到的枯草芽孢桿菌有較高的安全特性 ，為 此菌 作為微生態(tài)制劑的研究提供了有利的依據(jù) [18]。 耐藥性分析 為了進(jìn)一步為研制牛專用微生態(tài)制劑奠定基礎(chǔ)，我們分別對(duì)此菌的藥敏特性進(jìn)行試驗(yàn)研究。 圖 228 灌服 LB 肉湯的小鼠內(nèi)臟器官對(duì)照。 13 安全性試驗(yàn)結(jié)果 經(jīng) 14 d 的灌服觀察，小鼠生長(zhǎng)狀況良好，無(wú)死亡現(xiàn)象將小鼠剖檢后內(nèi)臟組織器官無(wú)異常變化（如圖 226， 227， 228），說(shuō)明枯草芽孢桿菌對(duì)小鼠無(wú)毒性。 圖 224 ○1 ○1 ○1 ○14對(duì)菌 K 有抑制作用， ○10對(duì)菌 K 無(wú)抑制作用。 圖 220 80 對(duì)菌 K 有抑制作用， 10對(duì)菌 K 無(wú)抑制作用。無(wú)拉絲現(xiàn)象， 2 1 2 1 3 2 1 10 M 1 2 注： M： DL Marker 20xx； 1：陽(yáng)性對(duì)照； 2：菌 K 將 分離的菌株 K 的 PCR 產(chǎn)物送北京華大生物公司測(cè)序， 測(cè)序結(jié)果與其他從GenBank 下載的芽孢桿菌屬的相關(guān)序列進(jìn)行同源性比較。 圖 217 接種菌 K 的尿素酶發(fā)酵管呈淺粉紅色，脲酶試驗(yàn) 陽(yáng)性。 1. 接種菌 K K 對(duì)照 圖 213 接種菌 K 的西蒙氏培養(yǎng)基仍為草綠色，檸檬酸鹽試驗(yàn)為陰性。 1. 接種菌 K K 對(duì)照 圖 28 枯草芽孢桿菌 VP試驗(yàn)為陰性。 圖 24 甘醇、葡萄糖、麥芽糖、乳糖、蔗糖發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性，蜜二糖發(fā)酵試驗(yàn)陰性 。 圖 22 革蘭氏染色 （ 1000）。 2 結(jié)果 形態(tài)學(xué)觀察 觀察 MYP 培養(yǎng)基， 為干燥型菌落， 灰白 色，無(wú)光澤，表面粗糙。 藥敏試驗(yàn) 按照擴(kuò)散法在 MYP 培養(yǎng)基上進(jìn)行 藥敏試驗(yàn) ，見(jiàn)文獻(xiàn) [13] 。 PCR 反應(yīng)體系： 總體系 25μL ， DNA 模板 2μL，上下游引物各加 1μL， 10 buffer ， ， Taq 酶 ， 。AGAGTTTGAT CCTGGCTCAG339。 芽孢染色 采用 孔雀綠沙黃染色法 ，見(jiàn)文獻(xiàn) [13]。 %沙黃、 5%孔雀綠溶液 自配 。本試驗(yàn)從健康奶牛糞便中分離鑒定枯草芽孢桿菌，以期為進(jìn)一
研究報(bào)告相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1