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正文內(nèi)容

第三章酶的生產(chǎn)(文件)

2025-01-18 13:41 上一頁面

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【正文】 原因是由于葡萄糖降解物阻遏了分解乳糖酶系的合成。 流加和連續(xù)培養(yǎng)退出( 3) .其他 促進(jìn)分泌:添加表面活性劑 離子型 對細(xì)胞有毒害作用 表面活性劑 Tween- 80 非離子型 TritonX- 100 非離子型增加細(xì)胞通性 , 添加產(chǎn)酶促進(jìn)劑 植酸鈣鎂,聚乙烯醇等退出第四節(jié) 酶發(fā)酵動力學(xué) 細(xì)胞生長速度 產(chǎn)物生成速度 基質(zhì)消耗速度 環(huán)境因素的影響細(xì)胞生長動力學(xué)發(fā)酵產(chǎn)酶動力學(xué)發(fā)酵動力學(xué)研究內(nèi)容:退出一、酶生物合成的模式微生物細(xì)胞的生長歷程退出按細(xì)胞生長和酶產(chǎn)生的關(guān)系,酶生物合成具有下列四種模式:同步合成型延續(xù)合成型中期合成型滯后合成型1. 生長偶聯(lián)型(又稱同步合成型) 酶的生物合成與細(xì)胞生長同步。特點: 酶的合成受產(chǎn)物的反饋阻遏或分解代謝物阻遏。 所對應(yīng)的 mRNA相當(dāng)穩(wěn)定。 所對應(yīng)的 mRNA穩(wěn)定性高。dX/dt+ β細(xì)胞開始生長就有酶的產(chǎn)生,直至細(xì)胞生長進(jìn)入平衡期后,酶還可以繼續(xù)生成一段時間。退出目的:提高產(chǎn)酶率和縮短發(fā)酵周期最理想的合成模式:延續(xù)合成型策略措施:① 菌種選育:提高 mRNA的穩(wěn)定性,解除分解代謝物阻遏和反饋阻遏。退出兩個基本環(huán)節(jié):分離和純化 分離:將酶從原料中抽提出來,并盡可能少引入雜質(zhì),得到粗酶液 純化:將酶和雜質(zhì)中分離開來,或者有選擇地將酶從包含雜質(zhì)中分離出來,得到一定純度的酶。 建立一個可靠和快速、易行的測定酶活方法 物理因素、化學(xué)因素和生物因素導(dǎo)致酶失活(經(jīng)濟、宜行): 純化倍數(shù)、酶活回收率和重現(xiàn)性 (衡量優(yōu)劣) 經(jīng)濟、可靠,建立靈敏、快速、特異、精確的檢測(酶活和蛋白質(zhì)的含量)手段。 Kcat,單位 1/s退出(二)酶活力單位及比活力 ( 1)形態(tài)上分 : 固體 液體 ( 2)用途:工業(yè)酶制劑、飼料酶制劑、食品酶制劑、醫(yī)藥酶制劑和洗滌酶制劑 ( 3)組成:單一酶制劑和復(fù)合酶制劑 ( 4)含量:普通酶制劑和濃縮酶制劑 ( 5)來源: ( 6)生產(chǎn)加工方法:游離酶制劑、固定化酶制劑、酶試紙、酶電極等退出二、工業(yè)酶制劑的要求,有利生物催化的專一性,操作穩(wěn)定性和儲存穩(wěn)定性(固定化酶)退出三、酶的保存(一)失活機理(酶空間結(jié)構(gòu)改變) 變性劑、去污劑、巰基試劑 顆粒狀退出(二)酶活性的保護(hù) 無機鹽(硫酸銨、氯化鈉)、糖(蔗糖、乳糖等)、多元醇(山梨醇、甘油等)或高分子聚合物(聚乙二醇)。退出酶的比活力 指每 mg酶蛋白(或每 mg蛋白氨)所含的酶活力單位數(shù)即:比活力 =活力單位數(shù) /酶蛋白(氮) mg 表示酶制劑的純度,比活力愈高,酶愈純。 IU: umol/min Kat: mol/s 1 Kat=6107 IU用酶催化的反應(yīng)速度來表示酶活力,即用單位時間內(nèi),單位體積中底物的減少量或產(chǎn)物增加量來表示。酶活力退出③ 提取方法的經(jīng)濟性和可分析性 盡量減少添加劑的使用 盡早使用高效分離方法,將昂貴、費時的分離方法放在最后階段。 前者給純化帶來了困難,而后者卻迅速找出純化過程
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