媒介生物的抗藥性監(jiān)測ppt-媒介生物的抗藥性監(jiān)測浙江省(文件)
【正文】 錄各系列濃度的幼蟲死亡數(shù)。 ?結(jié)果處理： 將測試所獲得的結(jié)果匯總整理后，計(jì)算 LC50。接觸筒用有機(jī)玻璃制成，筒長 ，直經(jīng) 5cm，一端用尼龍紗封口，另一端有螺紋。 2h后后待乙醚完全揮發(fā)即可應(yīng)用 。觀察 24h試蟲死亡數(shù)，重復(fù) 45次，每劑量應(yīng)至少測 100只蚊蟲。 ? 溶劑： 分析純丙酮 。 ?試蟲來源： 應(yīng)在試驗(yàn)前夜捕捉剛吸血蚊蟲攜回室內(nèi)至次日上午做測定試驗(yàn)，此時(shí)胃血已開始消化。 ?家蠅的抗藥性監(jiān)定 ?微量點(diǎn)滴法： 全國家蠅抗性協(xié)作組統(tǒng)一推薦方法 。經(jīng)乙醚輕度麻醉后，選取健康雌蟲 50只，放置于平皿中，背部向上，然后用點(diǎn)滴器將藥液按以上設(shè)置的系列濃度由低到高的順序，點(diǎn)滴于中胸背板上（ l），點(diǎn)滴完畢把試蟲放入小型養(yǎng)蠅籠內(nèi)（亦可用 500ml潔凈的燒杯替代），放入少量的奶粉和海綿或脫脂棉球供水，飼養(yǎng) 24h，觀察死亡數(shù)，用丙酮液替代藥液作空白對(duì)照。將測試所獲得的結(jié)果匯總整理后，計(jì)算 LD50。 ?三角燒瓶藥膜法： ?藥膜瓶的制備：取潔凈的三角燒瓶 1只，用移液管吸取涂膜液 ，加入三角燒瓶內(nèi)，將瓶體傾斜，緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)，使涂膜液均勻地沾布在瓶體的內(nèi)壁，待丙酮揮發(fā)后形成一層藥膜。測試重復(fù)三次，對(duì)照組的死亡率 10%時(shí)，須進(jìn)行重新試驗(yàn)。 ? 藥劑配制： 先將原藥用丙酮稀釋成低濃度母液，測試時(shí)將母液用丙酮稀釋成等倍或等差的 57個(gè)濃度組（在正式測定前，先進(jìn)行預(yù)測）。 ?結(jié)果處理：將測試結(jié)果匯總填入表內(nèi)，計(jì)算出 LD50。測試重復(fù)三次，對(duì)照組死亡率 20%時(shí)，須進(jìn)行重新試驗(yàn)。 ?結(jié)果處理：將測試結(jié)果匯總填入表內(nèi)，計(jì)算出 KT50和各時(shí)間段的死亡率。制備完畢后，存放 24h供試驗(yàn)用。 ? 藥劑： 先將殺劑原藥用丙酮（分析純）稀釋成 1%母液（可根據(jù)實(shí)際需要），然后 然后進(jìn)一步稀釋成 %的涂膜液盛于磨口瓶內(nèi)，注明標(biāo)簽， 放置于冰箱內(nèi)備用（使用玻璃溶器，時(shí)間不過長）。 ?死亡判斷和結(jié)果處理： 凡腹部上翻，六足抽搐，用可用尖頭鑷子或昆蟲針輕輕觸之不能翻動(dòng) 5爬行者判為死亡。 ?藥劑： 先將殺劑原藥用丙酮（分析純）稀釋成1%母液（可根據(jù)實(shí)際需要），然后按等差或等倍配制成 57個(gè)系列濃度，放置于冰箱內(nèi)備用（使用玻璃溶器，時(shí)間不過長）。 ?操作程序： 把上述吸血雌蚊用乙醚麻醉，每 20頭仰臥排列在一玻璃器皿上，用藥液點(diǎn)于胸部的腹面，每蟲受藥量一般為 ，滴藥后把蚊蟲迅速移入小型養(yǎng)蚊籠內(nèi)恢復(fù)，給以正常飼養(yǎng)， 24h后檢查死亡數(shù)。 ? 藥液配制：每一次測定設(shè) 45個(gè)系列濃度，一般情況下藥液濃度均較低，最高濃度不超過 %。 ? 成蚊的微量點(diǎn)滴法： ? 操作較精確并要求高 ， 是研究抗性機(jī)制的重要方法之一 。 ?測試時(shí)先把恢復(fù)筒安裝在隔板的一面，用吸蚊器吸取 2025只雌蚊（羽化后約 23天，未吸血）吹入筒內(nèi)，然后關(guān)閉隔板，在隔板另一面裝上已襯貼藥紙的接觸筒，把隔板拉開，將恢復(fù)筒內(nèi)蚊蟲輕輕吹入接觸筒，迅速關(guān)上隔板，將筒放平，開始計(jì)算接觸時(shí)間，接觸 1h。 ?藥紙的制備： 將白油和乙醚按 1:2比例混合作為溶劑 。 ? 濾紙圓筒接觸法： 這是一種常用的測定方法 ， 是 WHO推薦的標(biāo)準(zhǔn)方法之一 。 ?死亡判斷標(biāo)準(zhǔn)： 檢查死亡數(shù)時(shí) ， 可用尖頭鑷子或昆蟲針輕輕觸動(dòng)幼蟲頭部和尾部 ，不動(dòng)者為死亡 ， 只是震顫也視為死亡 。 ?在每只容器內(nèi)加脫氯水 150ml。 ?器具： 50ml、 500ml容器 ， 1ml、 5ml刻度移液管 。 ?溶劑： 以丙酮（分析純）作溶劑。 ?3 飼養(yǎng)
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