發(fā)酵工程第四章無菌技術(shù)(文件)
【正文】 升 ， PenG迅速破壞 ，發(fā)酵一無所獲 。 滅菌后棄去 應迅速重新滅菌，補充必要的營養(yǎng)成分，重新接種 （ 3）不同發(fā)酵時期染菌對發(fā)酵的影響 ? 檸檬酸發(fā)酵 ：加入另一罐將近發(fā)酵成熟的醪液 ， pH下降 ， 黃曲霉自溶 。 ? 從雜菌種類看： ? 耐熱芽孢桿菌：與 ④ 有關(guān) ? 球菌 、 無芽孢桿菌：與 ① ② ③⑤ 有關(guān) ? 淺綠色菌落的雜菌：與水有關(guān) ， 即冷卻盤管滲漏 ? 霉菌：與 ④⑤ 有關(guān) ， 即無菌室滅菌不徹底或操作問題 ? 酵母菌：糖液滅菌不徹底或放置時間較長 ? 從染菌幅度看：各個發(fā)酵罐或多數(shù)發(fā)酵罐染菌 ， 且所污染的是同一種雜菌 ， 一般是空氣系統(tǒng)問題 ， 若個別罐連續(xù)染菌 ， 一般是設(shè)備問題 。 三、發(fā)酵工業(yè)的無菌技術(shù) ——滅菌方法 ? 干熱滅菌法 ? 濕熱滅菌法 ? 射線滅菌法 ? 化學藥劑滅菌法 ? 過濾除菌法 ? 火焰滅菌法 四、培養(yǎng)基及設(shè)備滅菌 （一） 濕熱滅菌原理 （二） 分批滅菌（實罐滅菌） （三） 連續(xù)滅菌（連消） （四） 分批滅菌與連續(xù)滅菌的比較 1. 熱阻 2. 微生物熱死定律：對數(shù)殘留定律 4. 影響培養(yǎng)基滅菌的其它因素 （一）濕熱滅菌原理 1. 熱阻 ? 定義： 微生物對熱的抵抗力稱為熱阻，可用 比死亡速率常數(shù) k來表示 。 kNdtdN ?? ktNN t ??0lntNNkt 0lo g/?(2) 非對數(shù)殘留定律 ? 某些微生物受熱死亡的速率 不符合對數(shù)殘留定律 ：如一些微生物芽孢。??)39。 3. 滅菌溫度和時間的選擇 4. 影響培養(yǎng)基滅菌的其它因素 ? 培養(yǎng)基成分 ? 油脂、糖類及一定濃度的蛋白質(zhì)、高濃度有機物等增加微生物的耐熱性 ? 低濃度（ 1%2%） NaCl對微生物有保護作用，隨著濃度增加，保護作用減弱，當濃度達 8%10%以上，則減弱微生物的耐熱性。 ? 培養(yǎng)基中的微生物數(shù)量 4. 影響培養(yǎng)基滅菌的其它因素 分空氣過濾器滅菌 并用空氣吹干 夾套或蛇管排冷水，開啟排氣管閥，空氣管通蒸汽，也可夾套內(nèi)通蒸汽 達 70℃ 左右 取樣管 放料管 通蒸汽 120℃ ， 1 105pa 保溫 保溫階段，凡液面以下各管道都應通蒸汽，液面上其余各管道則應排蒸汽，不留死角，維持壓力、溫度恒定 罐壓接近空氣壓力 向罐內(nèi)通無菌空氣 保溫結(jié)束，依次關(guān)閉各排汽、進汽閥門 夾套或蛇管中通冷水 培養(yǎng)基降溫到所需溫度 （二）分批滅菌（實罐滅菌） ? 升溫、冷卻兩階段也有一定的滅菌效果，考慮到滅菌的可靠性主要在保溫階段進行，故可以簡單地利用式 ㏑ (N/N0) =kt 來粗略估算滅菌所需時間。 ? 例 2．某發(fā)酵罐內(nèi)裝 40m3培養(yǎng)基，采用連續(xù)滅菌，滅菌溫度為 1310C，原污染程度為每 1ml含有2 105個雜菌，已知 1310C時滅菌速度常數(shù)為15min1，求滅菌所需的維持時間。 ? 空氣除菌方法 ? 輻射殺菌：超聲波 、 高能陰極射線 ， x射線 、 β射線 、γ射線 、 紫外線 (2265197。 常用的過濾介質(zhì)有棉花 、 活性炭 、 玻璃纖維 、 有機合成纖維 、 有機和無機燒結(jié)材料等等 。 ? 例 3： 20oC的大氣被壓縮至表壓 度是多少？ 解： T1=20+273=293k P2/P1=（ +） /= m= T2=T1(P2/P1)(m1)/m=293 ∴ t2=389273=116oC 空氣預處理流程設(shè)計 3. 幾個概念 ? 空氣的絕對濕度： 1m3 濕空氣中含有的水蒸氣絕對量 (kg) ? 空氣的相對濕度（ Φ）： 空氣的絕對濕度與同溫度下飽 和絕對濕度之比值或者空氣中水蒸汽分壓與同溫度時的 飽和水蒸汽壓之比值，稱為空氣的相對濕度。(Pw/Pg) =(PPw) （ 41） （ 1） Φ與 X的關(guān)系 將 ΦPs=Pw代入式 41中得 X=（ PΦPs） 所以 ， 已知某一溫度 T時 Φ值 ， 便可求得 X。 （ 1） Φ與 X的關(guān)系 思考題 ? 壓縮空氣的露點比原始空氣的露點更高，即更易析出水分，且壓縮比愈大，露點愈高，為什么？ 思考題答案： 由 可知當 ＝ 1時，求出 Ps2 對應 Td Ps2 愈高 ， Td 愈高 而 ∴ 壓縮空氣的露點 比原始空氣 高 ( P2P1) 壓縮比 愈大，露點愈高 122112 PPPPss ?? ??2?121s12s PPPP ???121s1 PPP?111s1 PPP?12PP加熱后空氣的溫度 ? 設(shè)析出水后 ， 在升溫階段 Δ
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