專(zhuān)題1《基因工程》(1)(文件)
【正文】 法。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。 （ 4）由于重組 DNA分子成功導(dǎo)入受體細(xì)胞的頻率 ，所以在轉(zhuǎn)化后通常需要進(jìn)行 操作。請(qǐng)回答： （ 1）將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞，常用方法是 。 （ 5）為使外源基因在后代長(zhǎng)期保持，可將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞的 轉(zhuǎn)入 細(xì)胞中構(gòu)成重組細(xì)胞，使其發(fā)育成與供體具有相同性狀的個(gè)體。 PCR技術(shù)合成 DNA PCR:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) .是以 DNA變性、復(fù)制的 某些特性為原理設(shè)計(jì)的 . 前提條件是必須對(duì)目的基因有一定的了解， 需要設(shè)計(jì)引物。 ? 結(jié)果：目的基因的量成指數(shù)形式擴(kuò)增（ 2n) 高溫的作用是？ 引物是怎樣獲得的？ 四種脫氧核苷三磷酸（ 4 X dNTP) 酶 高溫 DNA 聚合酶 （ Taq 酶）， 原料 第一步：獲取目的基因 方法 ： 。 原核生物基因表達(dá)的調(diào) 控 乳糖代謝基因表達(dá)調(diào)控圖解： (有乳糖時(shí) ) Ｒ Ｐ Ｏ lacZ lacY lacA 調(diào)節(jié)基 因 啟動(dòng) 子 操縱基 因 結(jié)構(gòu)基 因 RNA聚合酶 信使 RNA 轉(zhuǎn) 錄 翻 譯 阻抑物與乳糖結(jié)合后構(gòu)象發(fā)生了改變，因而不能與 操縱基因結(jié)合，使得結(jié)構(gòu)基因進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。 或者從蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系出發(fā)，定向地 改造 天然蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)，特別是對(duì)功能基因的修飾，也可以制造新型的蛋白質(zhì)。由 酶制劑的生產(chǎn) 和 應(yīng)用 兩方面組成的。 。 蛋白質(zhì)工程 的重點(diǎn)則在于對(duì)已存在的蛋白質(zhì)分子的改造。 ? 蛋白質(zhì)工程是 ：確定蛋白質(zhì)的功能 → 蛋白質(zhì)應(yīng)有的高級(jí)結(jié)構(gòu) → 蛋白質(zhì)應(yīng)具備的折疊狀態(tài) → 應(yīng)有的氨基酸序列 → 應(yīng)有的堿基排列， ? 創(chuàng)造自然界不存在的蛋白質(zhì) 。 ? 滿(mǎn)足：（ 1）必須是單鏈，（ 2）帶有容易被檢測(cè)出來(lái)的標(biāo)記物。 PCR技術(shù)合成 DNA 3. mRNA差異顯示法獲得目的基因 （反轉(zhuǎn)錄） DNA合成儀人工合成長(zhǎng)度不是很大的DNA片段。 （ 2）以 DNA 小段寡聚核苷酸做引物，在 50℃ 的溫度下，找到可以配對(duì)的正鏈和負(fù)鏈，形成互補(bǔ)結(jié)合 （ 3）在 70℃ 高溫下，合成一條與模板 DNA 單鏈（正鏈或負(fù)鏈）互補(bǔ)結(jié)合的 DNA新鏈。 顯微注射法 受精卵（或早期胚胎） DNA分子雜交）（核酸探針） 受精卵（或早期胚胎細(xì)胞）具有全能性，可使外源基因在相應(yīng)組織細(xì)胞表達(dá) 去核的卵 膀胱上皮 細(xì)胞核 核移植（或克隆） 基本操作程序 為什么要獲得目的基因 為什么要把目的基因 與載體結(jié)合 受體細(xì)胞是指什么 為什么要進(jìn)行檢測(cè) 第一步：獲取目的基因 方法 ： 。 （ 3）通常采用 技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組。 答案：（ 1）從基因文庫(kù)中獲取 化學(xué)合成（人工合成） （ 2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶） DNA連接酶（連接酶） （ 3）質(zhì)粒 小型環(huán)狀（雙鏈環(huán)狀、環(huán)狀） （ 4）低 篩選 （ 5）氨基酸 （ 2022，山東理， 8分 ） 繼哺乳動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，膀胱生物反應(yīng)器的研究也取得了一定進(jìn)展。 （ 2）切割和連接 DNA分子所使用的酶分別是
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