《細(xì)胞工程》ppt課件(文件)
【正文】 是一種無(wú)菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須 保證無(wú)微生物污染 和不受其它有害因素的影響。 ? 內(nèi)設(shè)超凈工作臺(tái)、培養(yǎng)箱等細(xì)胞培養(yǎng)的必要設(shè)備，應(yīng)具備紫外消毒、通風(fēng)及溫控設(shè)施。風(fēng)淋室可以配合加熱器，冬天可以加熱，溫度可調(diào)，一般控制溫度在 3035℃ 較為適宜。 冰箱 ? 細(xì)胞培養(yǎng)的冰箱應(yīng)特別注意清潔， 防止污染。微化濾膜濾器是目前應(yīng)用最廣泛的過(guò)濾裝置。 ? 分析間： 顯微鏡、計(jì)算機(jī)及打印機(jī)等。 火焰消毒 ? 所使用物品均應(yīng)經(jīng)過(guò)燒灼，所用瓶口等開(kāi)啟或封蓋時(shí)均需迅速旋轉(zhuǎn)過(guò)火焰進(jìn)行消毒。 ? 合理布局 右手使用方便的用品放右側(cè)，左手使用方便的用品放左側(cè)。獨(dú)特之處有： 液體培養(yǎng)基 成分中有動(dòng)物血清等 因?yàn)檫@些組織或器官上的細(xì)胞生命力旺盛，分裂能力強(qiáng) 成塊組織不利培養(yǎng)，分散了做成細(xì)胞懸浮液利于培養(yǎng) 不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只能使細(xì)胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動(dòng)物個(gè)體 一、動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞融合是正常的生命活動(dòng) 兩個(gè)細(xì)胞正在融合 受精作用 動(dòng)物細(xì)胞融合 細(xì)胞 A 細(xì)胞 B 雜種細(xì)胞 滅活的病毒 物理法 化學(xué)法 仙臺(tái)病毒 皰疹病毒 新城雞瘟病毒 用滅活的病毒誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合過(guò)程 細(xì)胞核 病毒顆粒 細(xì)胞核 細(xì)胞融合與融合誘導(dǎo)細(xì)胞融合物質(zhì) 誘導(dǎo)劑： 仙臺(tái)病毒 聚乙二醇 電融合 誘導(dǎo)細(xì)胞融合的仙臺(tái)病毒必須滅活。 ２．動(dòng)物體內(nèi)的 B淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生百萬(wàn)種以上的抗體，每種抗體對(duì)特定的抗原具有特異性免疫作用。 應(yīng)用主要有： 臨床診斷 作為載體，運(yùn)載抗癌藥物，形成“生物導(dǎo)彈”治療腫瘤 資料 ： 目前世界各國(guó)已經(jīng)研制出數(shù)以百計(jì)的單克隆抗體。 胚胎移植技術(shù) 試管動(dòng)物（嬰兒）培養(yǎng)過(guò)程 卵細(xì)胞 精子 體外受精 受精卵 胚胎 新個(gè)體 母體子宮內(nèi) 孕育、產(chǎn)出 一、動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物 動(dòng)物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度不同 受精卵 胚胎干細(xì)胞 多能干細(xì)胞 單能干細(xì)胞 體細(xì)胞 核移植 胚胎細(xì)胞核移植 體細(xì)胞核移植（難度高） 動(dòng)物體細(xì)胞核移植 是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核 ,移如入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中 .使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎 ,這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。 動(dòng)物細(xì)胞特點(diǎn)？ ?分化潛能變窄 ：隨著細(xì)胞分化程度的提高而逐漸受到限制，分化潛能變窄，這是指整體細(xì)胞而言。 。 在生物的個(gè)體發(fā)育中，由于基因在特定時(shí)間和空間下選擇性地表達(dá)而形成不同器官，因此，要實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的全能性，首先必須使生物體的細(xì)胞處于離體狀態(tài)。 再分化 脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)又可以重新分化成根或芽等器官，這一過(guò)程稱為植物細(xì)胞的再分化。 異想天開(kāi) 植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用 ? 繁殖植物的新途徑 –微型育種 –作物脫毒 –人工種子 ? 育種新方法 –單倍體育種 –誘導(dǎo)突變體 ? 細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn) 概念： 應(yīng)用組織培養(yǎng)技術(shù)，快速繁殖植物（也叫快速繁殖技術(shù)） 原理： 植物細(xì)胞的全能性 優(yōu)點(diǎn)： 繁殖率高，可大批量生產(chǎn) 取材少 培養(yǎng)周期短 保持優(yōu)良性狀 微型繁殖 作物脫毒 ? 病毒在作物體內(nèi)逐年積累，會(huì)導(dǎo)致作物產(chǎn)量降低，品質(zhì)變差 ? 分生區(qū)附近（莖尖、根尖）的病毒極少，甚至沒(méi)有 ? 采用莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng) 人工種子 ? 結(jié)構(gòu)： – 人工薄膜 +胚狀體（不定芽、頂芽、腋芽） ? 優(yōu)點(diǎn)： – 不受氣候、季節(jié)、地域的限制 – 保留優(yōu)良性狀 – 時(shí)間短，占地少 ? 技術(shù)： – 組織培養(yǎng) ? 原理： – 細(xì)胞全能性 ? 養(yǎng)分、無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)碳源、農(nóng)藥、抗生素、有益菌 ? 生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑 單倍體育種 ? 方法： – 花藥離體培養(yǎng) ? 技術(shù)： – 組織培養(yǎng)獲得單倍體 – 秋水素處理單倍體的幼苗，使染色體加倍 ? 優(yōu)點(diǎn)： – 明顯縮短了育種年限 – 后代穩(wěn)定遺傳 突變體的利用 ? 利用組織培養(yǎng)時(shí)，分裂狀態(tài)的細(xì)胞易受培養(yǎng)條件和外界壓力（如射線，化學(xué)物質(zhì)等）的影響而產(chǎn)生突變的原理，誘導(dǎo)并篩選出對(duì)人類有用的突變體。 （不同種生物之間存在著生殖隔離，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點(diǎn)的） 相關(guān)問(wèn)題 （ 1）要想讓兩個(gè)來(lái)自不同植物的體細(xì)胞融合在一起，遇到的第一個(gè)障礙是什么？ （ 2）有沒(méi)有一種溫和的去細(xì)胞壁的方法？ （ 3）為什么兩個(gè)原生質(zhì)體能發(fā)生融合，這與細(xì)胞膜的什么特性有關(guān)？ （ 4）如果兩個(gè)來(lái)源不同的原生質(zhì)體發(fā)生融合形成了雜種細(xì)胞，下一步該對(duì)此細(xì)胞做何種處理？ （ 5）如何將雜種細(xì)胞培育成雜種植株？ 植物體細(xì)胞雜交過(guò)程 植物細(xì)胞 A 植物細(xì)胞 B 去掉細(xì)胞壁 去掉細(xì)胞壁 原生質(zhì)體 A 原生質(zhì)體 B 原生質(zhì)體融合 雜合的原生質(zhì)體 再生出細(xì)胞壁 雜種細(xì)胞 細(xì)胞分裂 分化發(fā)育 愈傷組織 雜種植株 植物體細(xì)胞雜交過(guò)程 原生質(zhì)體制備（酶解法去細(xì)胞壁） 原生質(zhì)體融合（人工誘導(dǎo)） 雜種細(xì)
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