《my動(dòng)物細(xì)胞工程》ppt課件(文件)
【正文】 淋巴細(xì)胞，形成細(xì)胞群。 ? 利用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)大量培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞。 整個(gè)制備過程為何要經(jīng)過兩次篩選？ ①第一次 篩選得到雜交瘤細(xì)胞（多種）， 在 特定的 選擇性培養(yǎng)基 上 ,未融合的親本 細(xì)胞 (漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞 )和融合的具有同種核的 細(xì)胞(BB融合細(xì)胞、瘤瘤融合細(xì)胞 )都會(huì)死亡 ,只有融合的雜種細(xì)胞 (雜交瘤細(xì)胞 )才能生長。這里的 單克隆 確有 單個(gè)細(xì)胞 克隆的含義，只不過克隆的不是 B淋巴細(xì)胞，而是 雜交瘤細(xì)胞 。 僅用 兩個(gè)細(xì)胞融合，其效率太低，不一定能得到融合細(xì)胞。因?yàn)榭贵w具有特異性，鼠的 B淋巴細(xì)胞所產(chǎn)生的抗體與人體 B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是不同的 。 (4).圖中 B為 ________________過程，常用_________________作為誘導(dǎo)劑，該細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能 __________,又能___________。 我國利用地鼠的腎細(xì)胞培養(yǎng)狂犬病疫苗 ， 已取得良好效果 。固定毒株對(duì)人及動(dòng)物致病 。從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前，給小鼠注射的特定的物質(zhì)是 __________________________。 (4) 動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的環(huán)境條件有________________________________________。 已知某傳染性疾病的病原 體為 RNA病毒 ,該病毒表面的 A蛋白為主要抗原 ,其疫苗生 產(chǎn)和抗體制備的流程之一如下圖： 請(qǐng)回答： (1)過程①代表的是 。 對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí) ,可從疑似患者體內(nèi)分 離病毒 ,與已知病毒進(jìn)行 比較 。 史密斯和英國人馬 丁 借助這一從上世紀(jì) 80年代發(fā)展起來 的技術(shù) ,人們得以按照預(yù)先設(shè)計(jì)的方式對(duì)生物遺傳 信息進(jìn)行精細(xì)改造 。 這里的 “ 某種酶 ” 應(yīng)該是 酶 。 (3)利用細(xì)胞工程也可獲得可供老鼠移植之用的 “ 敲 除排斥基因”的老鼠 ,其過程大致如下圖所示： ①促進(jìn)卵細(xì)胞融合最常用的試劑是 。 第 二步是用修改過的基因取代原有基因 。 。 (3)滅活的病毒或聚乙二醇是動(dòng) 物細(xì)胞融合最常用的試劑 。 答案 (1)限制性核酸內(nèi)切 DNA連接 (2)用限制性核酸內(nèi)切酶切除小鼠胚胎干細(xì)胞中的 胰島素基因 ,用修改過的基因取代胰島素基因 用 胰島素基因探針檢驗(yàn)胰島素基因是否被 “ 敲除 ” (3)① 滅活的病毒或聚乙二醇 ② 液體培養(yǎng)基 動(dòng) 物血清 細(xì)菌等微生物生長繁殖快 ,消耗營養(yǎng)物質(zhì) 多 ,同時(shí)產(chǎn)生有害代謝產(chǎn)物 ,毒害動(dòng)物細(xì)胞 解析 (1)限制性核酸內(nèi)切酶是基因 “ 剪刀 ” ,DNA 連接酶是基因 “ 針線 ” 。 (2)假如要 “ 敲除 ” 小鼠的胰島素基因 ,請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)出 實(shí)驗(yàn)步驟 。請(qǐng)回答下 列問題： (1)“ 敲除 ” 一種基因需要分兩步來完成：第一步 是利用化學(xué) “ 剪刀 ” ,例如用某種酶切除哺乳動(dòng)物 染色體中有某種功能的基因 。 3位科學(xué)家的獲獎(jiǎng)原因是其研究為 “基因靶向”技術(shù)的發(fā)展奠定了基 礎(chǔ)。 答案 (1)逆 (反 )轉(zhuǎn)錄 (2)限制性核酸內(nèi)切酶 (限制酶 ) DNA連接酶 (兩空 可以互換 ) (3)細(xì)胞融合 雜交瘤細(xì)胞 (4)A蛋白 核酸 (基因 )序列 抗 A蛋白的單克隆 抗體 2022年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)分別授予美國人馬里奧 (3)過程③采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是 ,獲得的 X 是 。 答案： (1)活細(xì)胞 (2)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù) (3)① B淋巴 抗體 抗原 (或狂犬病病毒 ) ②病毒 (或仙臺(tái)病毒 ) ③ 特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可以大量制備 (4)無菌、無毒，溫度和 pH，氣體，營養(yǎng)物質(zhì) (5)作為診斷試劑；開發(fā)治療惡性腫瘤的抗體等 2022 ③ 特異性抗體的獲取方法也可以采用向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原 ， 使動(dòng)物產(chǎn)生抗體 ， 然后從動(dòng)物血清中分離所需抗體 。在制備單克隆抗體的過程中，應(yīng)用的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)是________________。從自然感染動(dòng)物體內(nèi)分離的病毒株稱為野毒株，其致病力強(qiáng)。 B淋巴細(xì)胞 抗體 細(xì)胞融合 滅活的病毒 雙親細(xì)胞 分泌抗體 無限增殖 原代 傳代 50 近年來 ， 我國死于狂犬病的人數(shù)有上升之勢(shì) 。下列相關(guān)敘述正確的 是（ ） ，產(chǎn) 生的血清抗體為單克隆抗體 B淋巴細(xì)胞可以獲得大量針對(duì) SARS 病毒的單克隆抗體 B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞混合，經(jīng) PEG誘 導(dǎo)融合后的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞 SARS病毒核衣殼蛋白特異 性結(jié)合的方法可診斷出病毒感染者 B 體外培養(yǎng) 骨髓瘤細(xì)胞 雜交瘤細(xì)胞 足夠數(shù)量的細(xì)胞群 注射到 小鼠腹腔 A C ，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案 制備單克隆抗體 不能，沒有將抗原注入小鼠體內(nèi)，無法獲得產(chǎn)生單一抗體的 B淋巴細(xì)胞。目前動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)最有價(jià)值的應(yīng)用是單克隆抗體的制備，而動(dòng)物體內(nèi) 產(chǎn)生的特異性抗體種類可多達(dá)百萬種以上 ，還有就是 每 一個(gè) B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體 ，如果僅取一個(gè)脾細(xì)胞（含 B淋巴細(xì)胞）和一個(gè)瘤細(xì)胞雜交，我們不能確定該脾細(xì)胞分泌的抗體是否正是我們所需要的；若用大量的脾細(xì)胞和瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，就可以從融合細(xì)胞中篩選出能分泌所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。 瘤 細(xì)胞是 癌 細(xì)胞嗎？ 有無限增殖能力（失去凋亡機(jī)制，失去接觸抑制等） 的 細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞，而具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細(xì)胞，稱為癌細(xì)胞，所以說， 瘤細(xì)胞不能等于癌細(xì)胞 。
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