保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌相互作用及研究(文件)
【正文】 胞發(fā)酵液對菌株CNRN302的生長具有強(qiáng)烈的抑制效果。3 評(píng)價(jià)拮抗作用的方法 有機(jī)酸抑菌實(shí)驗(yàn)分析 由于有機(jī)酸具有殺菌作用，為了證明這種抑菌作用不是由于有機(jī)酸的存在而發(fā)生的，需用的NaOH溶液調(diào)整無細(xì)胞發(fā)酵液的pH值到6．5～7．0之間，消除有機(jī)酸的影響，然后，利用中和后的抑制菌發(fā)酵液作拮抗試驗(yàn)，判斷是否存在其他抑菌物質(zhì)。4 評(píng)價(jià)體系 酸奶的質(zhì)量與發(fā)酵劑的優(yōu)劣密切相關(guān)，所以長期以來人們一直在探索如何控制發(fā)酵劑的質(zhì)量。研究嗜熱鏈球菌與保加利亞乳桿菌菌株之間的協(xié)同(或拈抗)關(guān)系，可以為篩選出適合工業(yè)化生產(chǎn)的優(yōu)良菌株以及制備質(zhì)量穩(wěn)定的酸奶發(fā)酵劑提供重要的科學(xué)依據(jù)，并在生產(chǎn)中確保發(fā)酵劑的質(zhì)量，從發(fā)酵劑這一環(huán)節(jié)上來確保酸奶最終產(chǎn)品的質(zhì)量。5 小 結(jié) 傳統(tǒng)上，普遍認(rèn)為嗜熱鏈球菌與保加利亞乳桿菌存在共生關(guān)系，因?yàn)楸＜永麃喨闂U菌在乳中代謝生成的氨基酸可以刺激嗜熱鏈球菌的生長，而嗜熱鏈球菌在代謝過程中產(chǎn)生的甲酸可以促進(jìn)保加利亞乳桿菌的生長。 蛋白類抑菌物質(zhì)的確定 為了判斷菌株是否產(chǎn)生蛋白類抑菌物質(zhì)，試驗(yàn)中可將待定菌株的無細(xì)胞發(fā)酵液pH調(diào)整至中性，并分裝到Eppendorf管中，然后向發(fā)酵液中添加蛋白酶酶液(如蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶、d一胰凝乳蛋白酶等)，混勻，在38。．鑒于這種具有殺菌作用的蛋白物質(zhì)的分子最處在50～100 ku之間，且具有不耐熱的特性，所以按乳酸蔭細(xì)菌素分類標(biāo)準(zhǔn)，將它們的蛋白物質(zhì)歸結(jié)為大分子量的熱敏感型的細(xì)菌素。結(jié)果表明，鏈球菌菌株CNRN302的生長明顯受到抑制，特別是添加對數(shù)期的德氏乳桿菌vll007的無細(xì)胞發(fā)酵液的抑制效果要大于延遲期，而H這種抑制效果既便是加入過氧化氖酶也不能被消除．顯然，除了H2O2的抑制效果外，嗜熱鏈球菌CNRN302的生長抑制也與菌株vIl007無細(xì)胞發(fā)酵液中存在的其他物質(zhì)有關(guān)。發(fā)酵液經(jīng)70～100℃處理15 rain后，可以消除其對菌株VIl005的殺菌作用，但50℃的加熱處理并不影響其殺菌效果。研究表明，乳桿菌之間的生長抑制作用是由細(xì)菌素引起的，這種細(xì)菌素屬于熱穩(wěn)定的、小分子量的非羊毛硫多肽物質(zhì)。細(xì)菌素的殺菌作用是通過干擾能量生成、大分子化合物的生物合成、膜的運(yùn)輸和滲透作用而實(shí)現(xiàn)的。Van de Guchte等的研究發(fā)現(xiàn)，添加過氧化氫酶到保加利亞乳桿菌菌株V11007的無細(xì)胞發(fā)酵液中，就可以消除其對嗜熱鏈球菌的抑制作用，特別是添加過氧化氫酶后可以使嗜熱鏈球菌表現(xiàn)出高的生長速率，而且提高了最終菌體的細(xì)胞數(shù)量。 過氧化氫的效果 Vandevoorde等認(rèn)為許多乳桿菌、鏈球菌和片球菌都能代謝產(chǎn)生過氧化氫，過氧化氫抑菌作用主要來源于它能夠產(chǎn)生更多的有活性的、對細(xì)胞具有毒素作用的羥基。Miteva等在對大量分離獲得的德氏乳桿菌菌株產(chǎn)細(xì)菌素能力的研究表明，德氏乳桿菌菌株代謝生成細(xì)菌素是一種普遍現(xiàn)象。1 引起協(xié)同生長不平衡的因素 除以乳酸作為最終代謝產(chǎn)物外，乳酸菌還能夠產(chǎn)生細(xì)菌素、其他形式的有機(jī)酸、H：O：、乙醇和羅伊氏素(Feuterin)等多種抑菌物質(zhì)。Bielecka和MajkaowskaI 71在研究了366對保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌菌株間的協(xié)同生長后發(fā)現(xiàn)，僅有下列8對菌株間(7046和6086，151和Mk
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