高效液相色譜-20xx(文件)
【正文】 淋洗液 至分離柱 六通 閥 （ＬＯＡＤ） （ＩＮＪＥＣＴ） 樣 品 環(huán) 續(xù)前 3． 色譜柱 ：直徑 4~6mm,柱長(zhǎng) 10~30cm 柱效評(píng)價(jià)：色譜系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn) R， n， fs（ 拖尾因子 ） 柱再生：維護(hù) 、 保養(yǎng) 、 柱子的沖洗 4． 檢測(cè)器 1） 紫外檢測(cè)器：適于吸收紫外光的物質(zhì) 2） 熒光檢測(cè)器：只能分析自身發(fā)光的物質(zhì) 靈敏度高 3） 示差折光檢測(cè)器：利用折光率的差別 靈敏度低 ， 溫度要求嚴(yán)格 4） 電化學(xué)檢測(cè)器 5） 化學(xué)發(fā)光 光電二極管陣列檢測(cè)器： 1024個(gè)二極管陣列 ， 各檢測(cè)特定波長(zhǎng) ， 計(jì)算機(jī)快速處理 ， 三維立體譜圖 ， 如圖所示 。39。 水的洗脫 能力為 0。第十三章 高效液相色譜法 HPLC 分析化學(xué) (下，第三版 ) 高效液相色譜法： 以氣相色譜為基礎(chǔ)，在經(jīng)典液相 色譜實(shí)驗(yàn)和技術(shù)基礎(chǔ)上建立的一種液相色譜法 主要內(nèi)容 一、概述 二、基本理論及條件選擇 三、各類(lèi)高效液相色譜法 四、影響分離的因素 五、高效液相色譜儀 六、超效液相色譜技術(shù)簡(jiǎn)介 七、 HPLC定量分析方法學(xué)考察 八、 HPLC應(yīng)用 第一節(jié) 概述 一 、 HPLC與經(jīng)典 LC區(qū)別 二 、 HPLC與 GC差別 三 、 高效液相色譜儀流程圖 四 、 特點(diǎn) 一、 HPLC與經(jīng)典 LC區(qū)別 ? 主要區(qū)別：固定相差別 ， 輸液設(shè)備和檢測(cè)手段 1． 經(jīng)典 LC：僅做為一種分離手段 柱內(nèi)徑 1~3cm， 固定相粒徑 100μm 且不均勻 常壓輸送流動(dòng)相 柱效低 （ H↑， n↓） 分析周期長(zhǎng) 無(wú)法在線(xiàn)檢測(cè) 2． HPLC：分離和分析 柱內(nèi)徑 2~6mm， 固定相粒徑 10μm（ 球形 ， 勻漿裝柱 ） 高壓輸送流動(dòng)相 柱效高 （ H↓， n↑） 分析時(shí)間大大縮短 可以在線(xiàn)檢測(cè) 二、 HPLC與 GC差別 ? 相同：兼具分離和分析功能 ， 均可以在線(xiàn)檢測(cè) ? 主要差別：分析對(duì)象的差別和流動(dòng)相的差別 1． 分析對(duì)象 GC：能氣化 、 熱穩(wěn)定性好 、 且沸點(diǎn)較低的樣品 ， 高沸點(diǎn) 、 揮發(fā)性差 、 熱穩(wěn)定性差 、 離子型及 高聚物的樣品不可檢測(cè) 占有機(jī)物的 20% HPLC：溶解后能制成溶液的樣品 ， 不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制 分子量大 、 難氣化 、 熱穩(wěn)定性差及高分子 和離子型樣品均可檢測(cè) 用途廣泛 ， 占有機(jī)物的 80% 續(xù)前 2． 流動(dòng)相差別 ? GC：流動(dòng)相為惰性氣體 ? 組分與流動(dòng)相無(wú)親合作用力 ， 只與固定相作用 ? HPLC：流動(dòng)相為液體 ? 流動(dòng)相與組分間有親合作用力 ， 為提高柱的選擇性 、 改善分離度增加了因素 ， 對(duì)分離起很大作用 ? 流動(dòng)相種類(lèi)較多 ， 選擇余地廣 ? 流動(dòng)相極性和 pH值的選擇也對(duì)分離起到重要作用 選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動(dòng)相 可以增大分離選擇性 3． 操作條件差別 GC：加溫操作 HPLC：室溫；高壓 （ 液體粘度大 ， 峰展寬小 ） 三、高效液相色譜儀流程圖 1． 貯液罐 （ 濾棒 ， 可濾去顆粒狀物質(zhì) ） 2． 高壓泵 （ 輸液泵 ） 3． 進(jìn)樣裝置 4． 色譜柱 ——分離 5． 檢測(cè)器 ——分析 6． 廢液出口或組分收集器 7． 記錄裝置 續(xù)前 四 、 HPLC的特點(diǎn)和應(yīng)用 “三高 ” “ 一快 ” “ 一廣 ” 高柱效 ——n=104片 /米 ， 柱效高 （ 遠(yuǎn)高于一般 LC） 高靈敏度 高選擇性 分析速度快 應(yīng)用范圍廣泛 （ 可分析 80%有機(jī)化合物 ） 第二
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