高效液相色譜-20xx(文件)
【正文】 淋洗液 至分離柱 六通 閥 （ＬＯＡＤ） （ＩＮＪＥＣＴ） 樣 品 環(huán) 續(xù)前 3． 色譜柱 ：直徑 4~6mm,柱長 10~30cm 柱效評價：色譜系統(tǒng)適應性試驗 R， n， fs（ 拖尾因子 ） 柱再生：維護 、 保養(yǎng) 、 柱子的沖洗 4． 檢測器 1） 紫外檢測器：適于吸收紫外光的物質(zhì) 2） 熒光檢測器：只能分析自身發(fā)光的物質(zhì) 靈敏度高 3） 示差折光檢測器：利用折光率的差別 靈敏度低 ， 溫度要求嚴格 4） 電化學檢測器 5） 化學發(fā)光 光電二極管陣列檢測器： 1024個二極管陣列 ， 各檢測特定波長 ， 計算機快速處理 ， 三維立體譜圖 ， 如圖所示 。39。 水的洗脫 能力為 0。第十三章 高效液相色譜法 HPLC 分析化學 (下，第三版 ) 高效液相色譜法： 以氣相色譜為基礎，在經(jīng)典液相 色譜實驗和技術基礎上建立的一種液相色譜法 主要內(nèi)容 一、概述 二、基本理論及條件選擇 三、各類高效液相色譜法 四、影響分離的因素 五、高效液相色譜儀 六、超效液相色譜技術簡介 七、 HPLC定量分析方法學考察 八、 HPLC應用 第一節(jié) 概述 一 、 HPLC與經(jīng)典 LC區(qū)別 二 、 HPLC與 GC差別 三 、 高效液相色譜儀流程圖 四 、 特點 一、 HPLC與經(jīng)典 LC區(qū)別 ? 主要區(qū)別：固定相差別 ， 輸液設備和檢測手段 1． 經(jīng)典 LC：僅做為一種分離手段 柱內(nèi)徑 1~3cm， 固定相粒徑 100μm 且不均勻 常壓輸送流動相 柱效低 （ H↑， n↓） 分析周期長 無法在線檢測 2． HPLC：分離和分析 柱內(nèi)徑 2~6mm， 固定相粒徑 10μm（ 球形 ， 勻漿裝柱 ） 高壓輸送流動相 柱效高 （ H↓， n↑） 分析時間大大縮短 可以在線檢測 二、 HPLC與 GC差別 ? 相同：兼具分離和分析功能 ， 均可以在線檢測 ? 主要差別：分析對象的差別和流動相的差別 1． 分析對象 GC：能氣化 、 熱穩(wěn)定性好 、 且沸點較低的樣品 ， 高沸點 、 揮發(fā)性差 、 熱穩(wěn)定性差 、 離子型及 高聚物的樣品不可檢測 占有機物的 20% HPLC：溶解后能制成溶液的樣品 ， 不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制 分子量大 、 難氣化 、 熱穩(wěn)定性差及高分子 和離子型樣品均可檢測 用途廣泛 ， 占有機物的 80% 續(xù)前 2． 流動相差別 ? GC：流動相為惰性氣體 ? 組分與流動相無親合作用力 ， 只與固定相作用 ? HPLC：流動相為液體 ? 流動相與組分間有親合作用力 ， 為提高柱的選擇性 、 改善分離度增加了因素 ， 對分離起很大作用 ? 流動相種類較多 ， 選擇余地廣 ? 流動相極性和 pH值的選擇也對分離起到重要作用 選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動相 可以增大分離選擇性 3． 操作條件差別 GC：加溫操作 HPLC：室溫；高壓 （ 液體粘度大 ， 峰展寬小 ） 三、高效液相色譜儀流程圖 1． 貯液罐 （ 濾棒 ， 可濾去顆粒狀物質(zhì) ） 2． 高壓泵 （ 輸液泵 ） 3． 進樣裝置 4． 色譜柱 ——分離 5． 檢測器 ——分析 6． 廢液出口或組分收集器 7． 記錄裝置 續(xù)前 四 、 HPLC的特點和應用 “三高 ” “ 一快 ” “ 一廣 ” 高柱效 ——n=104片 /米 ， 柱效高 （ 遠高于一般 LC） 高靈敏度 高選擇性 分析速度快 應用范圍廣泛 （ 可分析 80%有機化合物 ） 第二
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