第二章-熒光和化學(xué)發(fā)光分析法(文件)
【正文】 子 基態(tài) 的振動(dòng)能級(jí)結(jié)構(gòu)。 它表示激發(fā)分子發(fā)射出熒光 (或磷光 ) 的比例。 熒光效率 21:37:32 熒光分子與其他分子相互作用引起熒光強(qiáng)度降低甚至熒光消失的現(xiàn)象為 熒光猝滅 ， 又稱(chēng)熒光熄滅 。 猝滅 （ 4）、 氧的猝滅 氧對(duì)溶液熒光產(chǎn)生猝滅作用的原因比較復(fù)雜 ， 可能包含著多種機(jī)理 。 21:37:32 B 共軛效應(yīng) 產(chǎn)生熒光的有機(jī)物質(zhì) ， 都含有共軛雙鍵體系 ，共軛體系越大 ， 熒光量子產(chǎn)率越高 ， 向長(zhǎng)波方向移動(dòng) 。若這些 化合物和金屬離子形成螯合物，隨著分子的剛性增強(qiáng)，平面結(jié)構(gòu)的增大，常會(huì)發(fā)生熒光 。 溶劑 主要表現(xiàn)為 溶劑的極性 、 氫鍵 、 配位鍵 的形成對(duì)化合物的熒光發(fā)生變化 。 溫度升高，外轉(zhuǎn)換的幾率增加，熒光強(qiáng)度降低。 21:37:32 激發(fā)光源 汞燈 、 碘鎢燈 、 氙弧燈 、 激光等 。 單色器 激發(fā)單色器： 選擇激發(fā)光波長(zhǎng)， 用以分離出所需用的激發(fā)光。 化合物對(duì) DNA的安全性 電泳后 點(diǎn)樣處 a b c d pUC19 (2686bp) 質(zhì)粒 DNA瓊脂糖凝膠電泳， buffer: 50mM TrisHCl/50mM NaCl (Ph ) ，化合物 （ 37℃ 1h） a: DNA空白對(duì)照 b:巰基乙胺 ()+DNA c:DNA+ d:巰基乙胺 +DNA+ 21:37:33 分子磷光分析法 特點(diǎn) ? 發(fā)光速率慢 壽命比熒光長(zhǎng) 104— 10s ? 輻射的波長(zhǎng)比熒光的長(zhǎng) ? 磷光的發(fā)光壽命和輻射強(qiáng)度對(duì)重原子 及其敏感（使用含碘甲烷的混合溶劑） ? 受溫度影響大，低溫強(qiáng)度大 21:37:33 稠環(huán)芳烴和雜環(huán)化合物 具有較大的致癌性 21:37:33 DDT等 52種農(nóng)藥 植物生長(zhǎng)激素（ ） 血液和尿中的阿司匹林、苯巴比妥 可卡因、致幻劑、抗凝劑 21:37:33 作業(yè) ? 1. 激發(fā)態(tài)分子去激發(fā)的過(guò)程有哪些 ?熒光發(fā)射和磷光發(fā)射經(jīng)過(guò)哪些過(guò)程 ?為什么磷光發(fā)射比熒光發(fā)射慢 ? ? 2. 為什么有的分子能夠發(fā)射熒光 ,有的不能 ?有機(jī)物的熒光與其結(jié)構(gòu)的關(guān)系是怎樣的 ? ? ，寫(xiě)出 2個(gè)可能發(fā)出熒光的化合物，并闡明為什么有可能發(fā)出熒光 。 儀器裝置 21:37:32 二、 磷光分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)流程 光源 樣品池 激發(fā) 單色器 檢測(cè)器 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 發(fā)射 單色器 斬波器（磷光鏡） 利用熒光和磷光發(fā)射壽命的差別 通常情況下，樣品池需要放在盛液氮的石英杜瓦瓶?jī)?nèi)，來(lái)測(cè)定低溫磷光。 儀器裝置 21:37:32 檢測(cè)器 一般采用硒光電池。 實(shí)驗(yàn)條件對(duì)熒光強(qiáng)度的影響 21:37:32 儀器裝置 Cary Eclipse 熒光分光光度計(jì) 熒光、磷光化學(xué) /生物發(fā)光 美國(guó)瓦里安技術(shù)中國(guó)有限公司 21:37:32 一、 熒光分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)流程 儀器裝置 光源 樣品池 激發(fā) 單色器 檢測(cè)器 數(shù)據(jù)處理 儀器控制 發(fā)射 單色器 組成： 激發(fā)光源 、 樣品池 、 雙單色器 、 檢測(cè)器 、 顯示系統(tǒng) 。 氫鍵 、 配位鍵的形成主要影響熒光分子的 存在型體 、 電離狀態(tài) ，
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