致病性大腸埃希氏菌及其檢驗(yàn)(文件)
【正文】 在內(nèi)，共代表了絕大多數(shù)大腸桿菌（占９９％）的實(shí)際反應(yīng)結(jié)果，因而受到了國(guó)際上的廣泛承認(rèn)，并將其列為大腸桿菌的常規(guī)鑒別ＩＭＶｉＣ反應(yīng)公式。不凝集的培養(yǎng)物可做陰性報(bào)告。 致病性大腸埃希氏菌的檢驗(yàn) （五）、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌毒素試驗(yàn) 動(dòng)物試驗(yàn) 1）家免結(jié)軋回腸段試驗(yàn)：取體重為 2kg的家兔，禁食使腸內(nèi)容物排空。 測(cè)定 LT時(shí)，于注射后 18小時(shí)剖腹檢查 測(cè)定 ST時(shí)，于注射后 68小時(shí)剖腹檢查 取出腸管分別抽取腸段的積液，測(cè)定其容量，并測(cè)定腸段的長(zhǎng)度。在一份平板的孔內(nèi)滴加LT抗毒素 30ul，另一份平板的孔內(nèi)滴加 ST毒素30ul。在一份平板的孔內(nèi)滴加抗毒素 ，另一份平板的孔內(nèi)滴加 毒素經(jīng) ～ 小時(shí)觀察結(jié)果，在菌斑和抗毒素之間出現(xiàn)白色沉淀帶為陽(yáng)性，無(wú)沉淀帶者為陰性。 致病性大腸埃希氏菌的檢驗(yàn) （七）、結(jié)果報(bào)告 ? 根據(jù)以上生化試驗(yàn)、血清學(xué)試驗(yàn)、腸毒素試驗(yàn)和豚鼠角膜試驗(yàn)的結(jié)果出報(bào)告，如果是產(chǎn)毒大腸埃希氏菌時(shí)應(yīng)有腸毒素試驗(yàn)的結(jié)果；如果是侵襲性大腸埃希氏蔭應(yīng)有豚鼠角膜試驗(yàn)和血清學(xué)試驗(yàn)的結(jié)果；如果是腸致病性大腸埃希氏菌時(shí)應(yīng)有血清學(xué)試驗(yàn)結(jié)果。 ? 體重 400500g的健康豚鼠 (角膜與結(jié)膜外觀正常，并經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)檢查 )的角膜上接種待試菌懸液 1滴。 （五）、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌毒素試驗(yàn)、雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) 將被檢菌按 點(diǎn)環(huán)形接種于氏培養(yǎng)基上，以同樣操作共做兩份， 177。 （五）、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌毒素試驗(yàn) 動(dòng)物試驗(yàn) 2）乳鼠灌胃試驗(yàn)：將被檢菌株接種于 Honda氏產(chǎn)毒肉湯內(nèi) ,36度培養(yǎng) 24小時(shí) ,離心 ,取上清夜 ,注入 14日齡乳胃內(nèi) ,禁食 34小時(shí) ,麻醉 ,取出腸管 ,稱量腸管 (包括積液 )質(zhì)量及剩余體質(zhì)量 ,二者之比大于 , . 致病性大腸埃希氏菌的檢驗(yàn) 致病性大腸埃希氏菌的檢驗(yàn) （五）、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌毒素試驗(yàn) 雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) : 將被檢菌按 5點(diǎn)環(huán)形接種于Elek氏培養(yǎng)基上，以同樣操作共做兩份， 36177。其他各段分別注射待試菌株肉湯培養(yǎng)物的濾液 2mL。 致病性大腸埃希氏菌的檢驗(yàn) （四）血清學(xué)試驗(yàn) 證實(shí)試驗(yàn)： 制備 O抗原懸液 ,稀釋血清 .稀釋血清與抗原懸液在 10mm 75mm試管內(nèi)等量混合 ,做試管凝集試驗(yàn) . （五）、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌毒素試驗(yàn) 動(dòng)物試驗(yàn) 將經(jīng)過(guò)生化證實(shí)試驗(yàn)的大腸埃希氏菌培養(yǎng)物接種肉湯管，于 36+1℃ 培養(yǎng) 24小時(shí)， 3000轉(zhuǎn)／分離心30分鐘。由于這種異常反應(yīng)出現(xiàn)的頻率極少，沒(méi)有普遍性的代表意義，因而在分類鑒別和統(tǒng)計(jì)學(xué)上，可以忽略不計(jì)。必要時(shí)做氧化酶實(shí)驗(yàn)或革藍(lán)氏染色鏡檢。大腸桿菌在麥康凱平板上的典型菌落呈鮮艷的桃紅、粉紅色 . 大腸埃希氏菌在麥康凱瓊脂平板上的特征 大腸埃希氏菌在麥康凱瓊脂平板上的特征 大腸埃希氏菌在麥康凱瓊脂平板粘稠菌落的特征 沙門氏菌麥康凱瓊脂平板菌落 不發(fā)酵乳糖 二、致病性大腸埃希氏菌的檢驗(yàn) （三）、生化試驗(yàn) 選取在麥康凱或伊紅美蘭平板上發(fā)酵乳糖或不發(fā)酵乳糖的菌落 5個(gè)以上，分別接種于三糖鐵 (TSI)或克氏雙糖鐵瓊脂 (KI).同時(shí)將這些培養(yǎng)物分別接種蛋白胨水、半固體、尿素瓊脂、氰化鉀肉湯和賴氨酸脫羧酶實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)基。在伊紅美蘭平板上的典型菌落呈紫黑色，圓形
黨政相關(guān)相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1