致病性大腸埃希氏菌及其檢驗(yàn)(更新版)
【正文】 毒素大腸埃希氏菌毒素試驗(yàn) 雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn) : 將被檢菌按 5點(diǎn)環(huán)形接種于Elek氏培養(yǎng)基上，以同樣操作共做兩份， 36177。 致病性大腸埃希氏菌的檢驗(yàn) （四）血清學(xué)試驗(yàn) 證實(shí)試驗(yàn)： 制備 O抗原懸液 ,稀釋血清 .稀釋血清與抗原懸液在 10mm 75mm試管內(nèi)等量混合 ,做試管凝集試驗(yàn) . （五）、產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌毒素試驗(yàn) 動(dòng)物試驗(yàn) 將經(jīng)過生化證實(shí)試驗(yàn)的大腸埃希氏菌培養(yǎng)物接種肉湯管，于 36+1℃ 培養(yǎng) 24小時(shí)， 3000轉(zhuǎn)／分離心30分鐘。必要時(shí)做氧化酶實(shí)驗(yàn)或革藍(lán)氏染色鏡檢。在伊紅美蘭平板上的典型菌落呈紫黑色，圓形，邊緣整齊，表面光滑濕潤，常有金屬光澤。 1℃ 培養(yǎng) 6小時(shí)。 ? 3） K抗原 ? 是細(xì)胞外部的莢膜或菌體表面物質(zhì)，又稱包膜抗原。耐熱腸毒素 (ST)無免疫性 ,耐熱 ,100℃ 經(jīng) 1020min不被破壞 ,也可使腸道細(xì)胞的 CAMP水平升高 ,引起腹瀉 . LT與 ST的比較 特性 不耐熱腸毒素 耐熱腸毒素 分子量 較大， 73000 較小， 15005000 耐熱性 不耐熱 耐熱 免疫原性 有 無 B亞單位受體 腸黏膜 GM1神經(jīng)節(jié)苷酯 腸黏膜 GM1神經(jīng)節(jié)苷酯 致病機(jī)理 活化細(xì)胞腺苷酸環(huán)化酶，細(xì)胞內(nèi) cAMP含量升高，分泌功能亢進(jìn)，引起腹瀉 活化細(xì)胞鳥苷酸環(huán)化酶，細(xì)胞內(nèi) cGMP含量升高，分泌功能亢進(jìn)，引起腹瀉 一、埃希氏菌屬生物學(xué)特性 致病性：（ 2）所致疾病 ? 腸外感染： 泌尿系統(tǒng)感染最常見病原菌。 3）本菌可使賴氨酸脫鞍、不能使苯丙氨酸脫羧。 普通大腸埃希氏菌 Escherichia Coli ? 培養(yǎng)特性 1)需氧及兼性厭氧菌 2)對營養(yǎng)的要求不高，在普通瓊脂上就生長良好，在 15C45℃ 范圍內(nèi)均可生長，但最適生長溫度為37℃ ，最適 pH為 。但當(dāng)機(jī)體抵抗力下降或大腸埃希氏菌侵入腸外組織或器官時(shí)，可作為條件致病菌而引起腸道外感染。引起大腸埃希氏菌中毒的主要是一些動(dòng)物性食品，如乳與乳制品、肉類、水產(chǎn)品等，牛和豬是傳播這種病菌、引起中毒的主要原因。 ? 一、埃希氏菌屬生物學(xué)特性 5）在鮮血瓊脂平板上生長，有些菌株可見 β 溶血環(huán)。后四項(xiàng)生化特性是典型的大腸埃希氏菌，與此不一致的即為非典型大腸埃希氏菌菌。 一、埃希氏菌屬生物學(xué)特性 ? 血清學(xué)特性 大腸埃希氏菌的抗原構(gòu)造主要由菌體抗原 (O)，鞭毛抗原 (H)和莢膜抗原 (K)三部分組成。 ? O抗原可將大腸埃希氏菌分成若干血清群，再根據(jù) K抗原和 H抗原進(jìn)一步分為若干個(gè)血清型或亞型，根據(jù)大腸埃希氏菌抗原的鑒定結(jié)果，寫出其抗原式如 O111：K58(B)H12，一般認(rèn)為 H抗原與致病性無關(guān)，因此，一般不需要進(jìn)行 H抗原的鑒定。 于 36177。 培養(yǎng)１８ — ２４小時(shí)，檢查有無疑似大腸桿菌菌落。但個(gè)別大腸桿菌的ＩＭＶｉＣ反應(yīng)，也可能出現(xiàn)“＋－－－”和“＋＋－＋”等等異?，F(xiàn)象。麻醉后剖腹，取出回腸段，按1015cm為一段，分段結(jié)扎，取一段注射肉湯 2mL作為陰性對照，另一段注射已知產(chǎn)毒菌肉湯培養(yǎng)物的上清液 2ml作為陽性對照。放于 36+1℃ 經(jīng) 15～ 20小時(shí)觀察結(jié)果，在菌斑和抗毒素之間出現(xiàn)白色沉淀帶為陽性，無沉淀帶者為陰性。
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