發(fā)育生物學(xué)——發(fā)育生物學(xué)研究技術(shù)(文件)
【正文】 致死性 ? 功能喪失 ：最常見。 1. 大規(guī)模誘變篩選 。在小鼠和果蠅中常用于轉(zhuǎn)基因分析。 分子生物學(xué)技術(shù) 目的：檢測(cè)目的基因或蛋白質(zhì)在某一發(fā)育時(shí)期或特定組織中的表達(dá) 分類： ? Polymerase chain reaction (PCR): DNA amplification ? Realtime quantitative PCR: RNA 定量 ? RTPCR/Northern blotting: mRNA expression ? Western blotting: protein expression ? 免疫共沉淀 (CoIP): proteinprotein interaction Northern Blotting Analysis Southern Blotting Analysis Realtime PCR 儀 原位雜交技術(shù) 目的：檢測(cè)某一特定基因 mRNA在某胚胎和組織中的分布情況 分類： ? 放射性標(biāo)記探針：放射自顯影 ? 非放射性標(biāo)記探針： 地高辛 (DIG)免疫組化 熒光素 熒光免疫組化 (FISH) 原位探測(cè)基因表達(dá) ? Gene expressing guiding development ? When and where particular genes are active ? Intact embryos or sections of embryos In situ hybrid: probesradioactive isotope, fluorescence tag or an enzyme Dectection: autoradiography, fluorescence microscope, enzymesubstrate reaction 原位探測(cè)基因表達(dá) 原位探測(cè)基因表達(dá) Distribution of mRNA for the growth factor Vg1 in the amphibian egg. In situ hybridization with a radioactive probe. (yellow signals) 原位探測(cè)基因表達(dá) 利用原位雜交技術(shù)研究基因表達(dá)的時(shí)空譜 mRNA的檢測(cè) FISH 探測(cè)基因表達(dá) 報(bào)道基因 (reporter gene) 技術(shù) 目的： 用于啟動(dòng)子 /增強(qiáng)子的分析研究。 ? 顯微注射 。發(fā)育生物學(xué)研究技術(shù)
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