抗體制備技術(shù)(文件)
【正文】 過濾l3）離子交換l4）親和層析 在凝膠過濾柱（ sephadex G200）上血清蛋白的層析示意 (M=IgM, G=IgG, A=IgA)在 DEAE纖維素上人血清蛋白的層析示意圖(M=IgM, G=IgG, A=IgA) 親和層析純化 IgG基本過程示意圖 (四 )免疫血清的鑒定抗體效價的測定（凝集、擴散、 ELISA）特異性的鑒定（免疫印跡、雙擴散）純度的鑒定（ SDSPEAG）親和力的鑒定 — affnity指抗體與抗原結(jié)合 的牢固程度，以親和常數(shù)表示。l 對于單克隆抗體，一般親合力要求 107L/mol，好的單抗多大于 109 L/mol。l 制備過程 — 致敏 B淋巴細胞（免疫動物） 雜交細胞瘤制備、篩選 雜交瘤細胞分泌抗體的確認 分泌抗體的雜交瘤細胞克隆 單克隆抗體的批量生產(chǎn)（二）單克隆抗體制備的技術(shù)要點l免疫動物選擇純系 Balb/c小鼠l骨髓瘤細胞用以融合前應(yīng)經(jīng)過篩選l細胞融合l陽性克隆的篩選l克隆化l單克隆抗體的制備l單克隆抗體的純化和鑒定l單克隆抗體的保存（三）影響雜交瘤技術(shù)的因素l試劑與器材 用前必須經(jīng)嚴格的篩選，尤其血清、融合劑l培養(yǎng)技術(shù) 防止污染，細胞培養(yǎng)的嫻熟技能～l早期克隆化 避免無關(guān)細胞克隆的過度生長，但又應(yīng)避免 克隆細胞的丟失。l 嵌合抗體（ chimeric antibody）l 改形抗體（ reshaped antibody）（二）小分子抗體l 小分子抗體指相對分子質(zhì)量比較小但具有抗原結(jié)合功能的分子片段～。 噬菌體展示 (phage display)，即用分子克隆的方法將外源基因片段插入噬菌體殼蛋白的非必需區(qū)，該基因的表達產(chǎn)物與殼蛋白一起以融合蛋白的形式展示于噬菌體顆粒的表面。他具有針對兩個不同抗原位點結(jié)合的特性，可同時與兩種不同抗原發(fā)生結(jié)合，不同于天然抗體。l 包括 ：（一）人源化、小分子、雙價特異
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