電鏡生物樣品制備技術(shù)(文件)
【正文】 屬損耗大，容易產(chǎn)生污染和熱 損傷，容易形成 “死角 ”。臨界點(diǎn)干燥法 原理 ：利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時(shí)， 氣 相與液相 的界面消失，樣品在沒(méi)有表面張力的 情況下進(jìn)行干燥。n 優(yōu)點(diǎn) ：脫水劑為低表面張力物質(zhì)，揮發(fā)過(guò)程中減少了樣品的收縮及損傷n 缺點(diǎn) ：常常使樣品發(fā)生變形收縮n 適用范圍 ：鑄型或體表比較堅(jiān)硬的甲殼昆蟲等含水量較少的樣品冷凍干燥法n 方法 ：將含大量水分的生物樣品迅速投入液氮中，使樣品冷凍固化，而后將樣品移入真空鍍膜儀內(nèi)，在高真空狀態(tài)下升華，脫水劑直接由固態(tài)轉(zhuǎn)為氣態(tài)，樣品隨之得到干燥。 化學(xué)方法 : 用酶消化法注意事項(xiàng)： 在保證不破壞觀察面的條件下，充分暴露觀察面 不要損傷觀察面或者使樣品膨脹、收縮等 不要將樣品裸露在空間，防止樣品皺縮變型清洗液的選擇n 一般組織：等滲生理鹽水n 游離組織細(xì)胞：緩沖液、等張液n 表面覆有大量黏液的組織（如胃腸粘膜）：低濃度蛋白水解酶n 組織培養(yǎng)細(xì)胞：組織培養(yǎng)液n 特殊樣品：特殊洗液（如生藥表面的蠟質(zhì)，選用去垢劑 Triton X100）三、 固定目的： 保存樣品表面的真實(shí)結(jié)構(gòu)； 硬化組織，減少脫水干燥時(shí)水的表面張力對(duì)樣品的損傷； 提高樣品的二次電子發(fā)射率； 提高樣品的耐熱性和導(dǎo)電性。生物樣品的特性含水量高質(zhì)地柔軟導(dǎo)電性差二次電子產(chǎn)率低對(duì)熱、電子束等敏感掃描電鏡生物樣品要求 ： 不含水份 具有較高的二次電子發(fā)射率 良好的導(dǎo)電性 耐熱性 最大限度的保持樣品的形貌 掃描電鏡樣品常規(guī)制備的操作程序掃描電鏡樣品常規(guī)制備的操作程序 1. 取 材 2. 清 洗 3. 固
環(huán)評(píng)公示相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號(hào)-1