乳酸菌的鑒定與乳酸菌的抑菌性畢業(yè)論文(文件)
【正文】 秀芳，南慶賢，等。完成論文歷程是艱苦的，但又是快樂(lè)的，因?yàn)槲沂斋@著碩果，提升了能力。中國(guó)乳品工業(yè)，1998，（1）：3032.[4] 吳玲，潘道東，2010，26（1）：157159.[5] 姚麗婭,徐為民,，2008，29（1）：160164.[6] [M].北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，1999：616．[7] 布坎南RE，吉布斯NE. 伯杰細(xì)菌鑒定手冊(cè)（第八版）[M]. 第8版, 北京: 科學(xué)出版社, 1984: 797808.致 謝在實(shí)驗(yàn)和論文撰寫過(guò)程中，要謝謝謝我的指導(dǎo)教師張夢(mèng)琴的指導(dǎo)與督促，同時(shí)也感謝她的諒解與包容。通過(guò)對(duì)5種指示菌進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，通過(guò)管碟法抑菌實(shí)驗(yàn)篩選出一種來(lái)源于進(jìn)口奶酪的抑致病菌活性較高的乳酸菌GL5。根據(jù)生理生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果，參考資料[6，7]，經(jīng)過(guò)刪選比對(duì)，菌株GL5的生理生化特性與干酪乳桿菌最相似。b. “+”表示陽(yáng)性反應(yīng)；“”表示陰性反應(yīng)。發(fā)酵上清液用過(guò)氧化氫酶處理,以未經(jīng)過(guò)氧化氫酶處理的發(fā)酵上清液為對(duì)照,以金黃色葡萄球菌為指示菌進(jìn)行抑菌實(shí)驗(yàn),結(jié)果見(jiàn)表3。其中，GL5抑菌效果最佳，如圖1所示。檢測(cè)時(shí)取培養(yǎng)液少許置于比色盤內(nèi)，同時(shí)取未加碳水化合物的PY培養(yǎng)液作為對(duì)照，滴加試劑比較顏色的變化，記錄產(chǎn)酸的強(qiáng)弱。另外接種已知菌的陰性反應(yīng)作對(duì)照。用濃度為50~100g/L的乙酸鉛將紙條浸透，然后置于烘干，放入培養(yǎng)皿或試管內(nèi)，滅菌后備用。如對(duì)照管凝固時(shí)，接種管液化為陽(yáng)性反應(yīng)，凝固為陰性反應(yīng)。含精氨酸培養(yǎng)中的培養(yǎng)液與試劑的反應(yīng)顯示強(qiáng)于對(duì)照液才能認(rèn)為是陽(yáng)性反應(yīng)。 生理生化實(shí)驗(yàn)過(guò)氧化氫酶測(cè)定將實(shí)驗(yàn)菌接種于PYG培養(yǎng)基斜面上，37℃培養(yǎng)20h—24h，取一環(huán)接種的培養(yǎng)物，涂于干凈的載玻片上，然后在其上滴加3%－15%的過(guò)氧化氫，有氣泡則為陽(yáng)性反應(yīng)，無(wú)氣泡為陰性反應(yīng)。過(guò)氧化氫酶溶解在50mmol /L 的磷酸緩沖液( pH= )中配成母液,加入到發(fā)酵液中使過(guò)氧化氫酶的終濃度為5mg/mL,在37℃水浴中溫育2h后取出,檢測(cè)過(guò)氧化氫酶處理后發(fā)酵液的抑菌活性。 革蘭氏染色洗片→載玻片上滴一滴蒸餾水→玻璃棒蘸取一滴菌液在玻片上→晾干→結(jié)晶紫初染1min→水洗→晾干→碘液媒染30s→水洗→晾干→95%酒精脫色20s→水洗→晾干→番紅復(fù)染→水洗→晾干→鏡檢。 樣品的處理奶酪的處理：以無(wú)菌操作取奶酪1g，放入含有9mL滅菌加熱至含40℃左右的生理鹽水的滅菌廣口瓶?jī)?nèi)，待奶酪溶解制成1:10的均勻稀釋液，并用無(wú)菌生理鹽水逐級(jí)稀釋至1010105。 試劑脫脂奶粉：光明乳業(yè)股份有限公司；%溴甲酚綠酒精溶液：自配；瓊脂：生化試劑,福建泉州市泉港化工廠；酵母膏：生化試劑,原上海酵母廠；蛋白胨：生化試劑,上?；瘜W(xué)試劑采購(gòu)供應(yīng)站中心化工廠；牛肉膏：生化試劑,北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司；葡萄糖：分析純?cè)噭?國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；乙酸鈉：分析純?cè)噭?成都科龍化工試劑廠；檸檬酸三銨：分析純?cè)噭?上海試四赫維化工有限公司；磷酸氫二鉀：分析純?cè)噭?上海光鏵科技有限公司；MgSO4PY培養(yǎng)基（100mL）：，（鹽溶液成分:無(wú)水CaCl2 ，MgSO4 ，K2HPO4 ，KH2PO4 ，NaHCO3 ，NaCl ，將CaCl2和MgSO4一起溶解于300mL蒸餾水中，再加500mL蒸餾水，一邊攪拌一邊緩慢加入其他鹽類，繼續(xù)攪拌直到全部溶解，加蒸餾水定容至1000mL，混合后貯備于4℃)。H2O 、MgSO4第2章 材料與方法 材料 樣品市售進(jìn)口奶酪 培養(yǎng)基BCG培養(yǎng)基：A、B液滅菌后混勻。本實(shí)驗(yàn)欲從進(jìn)口干酪中分離乳酸菌，并研究各種乳酸菌對(duì)食品中常見(jiàn)致病菌的抑制作用。乳酸菌是正常人畜腸道中極為重要的生理菌群，擔(dān)負(fù)著人畜機(jī)體多種重要的生理功能，具有維持人體中微生態(tài)平衡作用。到目前為止，人類日常食用的泡菜、酸奶、醬油、豆豉等，都是應(yīng)用乳酸菌這種原始而簡(jiǎn)單的隨機(jī)天然發(fā)酵的代謝產(chǎn)物。 乳酸菌的研究歷史 早在20世紀(jì)初，俄國(guó)著名的生物學(xué)家梅契尼柯夫（Mechnikoff,18451916），在他獲得諾貝爾獎(jiǎng)的“長(zhǎng)壽學(xué)說(shuō)”里已明確指出，保加利亞的巴爾干島地區(qū)居民，日常生活中經(jīng)常飲用的酸奶中含有大量的乳酸菌，這些乳酸菌能夠定植在人體內(nèi)，有效地抑制有害菌的生長(zhǎng)，減少由于腸道內(nèi)有害菌產(chǎn)生的毒素對(duì)整個(gè)機(jī)體的毒害，這是保加利亞地區(qū)居民長(zhǎng)壽的重要原因。 乳酸菌的類型乳酸菌大體上可分為兩大類。免疫調(diào)節(jié)作用，增強(qiáng)人體免疫力和抵抗力。
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