菊花莖段快繁技術(shù)生物技術(shù)及應(yīng)用(文件)
【正文】 芽誘導(dǎo)）培養(yǎng)。當(dāng)叢生芽長至1厘米長時(shí)，在超凈工作臺上將芽從中的小芽切割開，分別轉(zhuǎn)入相同的新鮮培養(yǎng)基上繼代增值，每一個(gè)小芽又會(huì)以同樣的繁殖系數(shù)產(chǎn)生芽從。[3]當(dāng)叢生芽長成的小苗達(dá)2—3厘米時(shí)，在超凈工作臺上將其切下轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根。大規(guī)模的室外移栽需要在苗床上進(jìn)行 ,包括整地、 移栽、管理等環(huán)節(jié)。菊花的繼代培養(yǎng)擴(kuò)大增殖可以在兩個(gè)時(shí)期進(jìn)行。這種方法較為簡單，但效率低，不建議采用。培養(yǎng)材料會(huì)向培養(yǎng)基中釋放褐色物質(zhì)，即酚類物質(zhì)在多酚氧化酶的作用下，氧化形成褐色的醌類物質(zhì)，導(dǎo)致植株中蛋白質(zhì)變性、酶失活，而使培養(yǎng)基和培養(yǎng)材料逐漸變褐而死亡的現(xiàn)象。表6 %Vc溶液對比接種實(shí)驗(yàn)次數(shù)%Vc溶液總數(shù)褐變數(shù)褐變率1浸泡3013%未浸泡30413%2浸泡3000%未浸泡30620%3浸泡3000%未浸泡30517%褐變率=褐變數(shù)/總數(shù)100%由于試管苗發(fā)生生理失調(diào)，而形成發(fā)育不正常的組培苗。本文實(shí)驗(yàn)采用帶腋芽莖段作為外植體，相對純粹單一使用莖尖或莖段或側(cè)芽要簡單的多，且在技術(shù)操作上更加容易上手。通過調(diào)節(jié)生長素與細(xì)胞分裂素的濃度比例可以有效的控制菊花芽的分化、生長及生根。同時(shí)結(jié)合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，對容易產(chǎn)生問題的方面做了全面的分析，并提出了合理的解決方案。借此機(jī)會(huì)向兩年多以來在學(xué)習(xí)上悉心指導(dǎo)、為人處世上諄諄教導(dǎo)和生活上無私關(guān)懷的謝春芹老師致以衷心的感謝和崇敬的敬意！
此外,我也借此機(jī)會(huì)向三年以來在工作、學(xué)習(xí)和生活上給予我極大支持，幫助和指導(dǎo)的班主任張雪松老師和全體同學(xué)表示衷心的感謝。從論文的選題，實(shí)驗(yàn)的安排到論文的撰寫都傾注了導(dǎo)師大量的心血。本文結(jié)合實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，以科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)姆绞綄栈ㄇo段快繁的整體過程做了系統(tǒng)的論述和分析。菊花能作為外植體的部位很多，除本試驗(yàn)采用的帶側(cè)芽莖段外，尖、葉、花序梗、花序軸、花瓣和根等都能作為外植體。玻璃苗的出現(xiàn)是植物組培技術(shù)應(yīng)用于工廠化育苗的極大障礙,因而試管苗的玻璃化是植物組培過程中亟待解決的問題。方法如下：已做滅菌處理的外植體即帶腋芽莖段，%Vc溶液中浸泡5分鐘，不需無菌水沖洗，稍微在無菌濾紙上濾干，將材料放入無菌的錐形瓶中封口待用。若條件允許，可以在菊花培養(yǎng)基中附加50~150mg/L的氨芐青霉素和50mg/L的硫酸丁胺卡那霉素，可以很好地抑制細(xì)菌的生長，而且氨芐青霉素會(huì)對菊花生根有促進(jìn)作用， 而硫酸丁胺卡那霉素則會(huì)抑制生根。本實(shí)驗(yàn)采用的就是這種方法，本方法效率較高，缺點(diǎn)是接種較繁瑣。、繼代培養(yǎng)結(jié)果處理：表2 初代培養(yǎng)記錄表：次數(shù)接種量真菌污染細(xì)菌污染褐變玻璃化正常成活率160127623355%2601013812847%360910203965%460119313660%統(tǒng)計(jì)：240423919413657%表3 繼代培養(yǎng)記錄表：次數(shù)接種量真菌污染細(xì)菌污染褐變玻璃化正常成活率1992130304545%2841527004250%31171833036354%41082433304844%統(tǒng)計(jì)：408781236319849%成活率=正常/接種量100％：、繼代培養(yǎng)結(jié)果統(tǒng)計(jì)表4 初代、繼代培養(yǎng)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)類型7天生長情況14天生長情況21天生長情況28天生長情況初代培養(yǎng)莖段變粗，切口出現(xiàn)少量嫩綠色愈傷組織腋芽開始萌動(dòng)，部分已有叢生芽形成叢生芽大量形成，部分已長成苗從苗從長勢良好，可以做繼代培養(yǎng)繼代培養(yǎng)基部形成愈傷組織，叢生芽逐漸增長
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