菊花嫩莖快繁技術(shù)的研究生物技術(shù)及應(yīng)用(文件)
【正文】 基較佳配方,繼代周期為25～30d ,增殖倍數(shù)4～7 倍。2．4細(xì)菌、真菌污染及防治表5 初代、繼代培養(yǎng)中的污染統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)類型污染分類總計(jì)概率染菌表現(xiàn)初代真菌污染%外植體周圍有白色絨毛狀菌絲，培養(yǎng)基出現(xiàn)綠、白菌斑細(xì)菌污染13%培養(yǎng)基表層呈水漬狀污染，外植體周圍滴形云霧狀污染繼代真菌污染19%培養(yǎng)基表層出現(xiàn)黃、白色油滴狀菌斑細(xì)菌污染30%培養(yǎng)基表層有粉紅色如水漬狀分布的菌斑在實(shí)驗(yàn)過程中，我們會(huì)發(fā)現(xiàn)每次實(shí)驗(yàn)下來總有幾瓶污染的，大多都是真菌和細(xì)菌污染。激素水平對(duì)愈傷組織再分化關(guān)系密切, 隨激素水平的提高外植體的分化率增加,芽的分化系數(shù)也提高 , 但激素濃度過高和生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素配比失調(diào), 易導(dǎo)致玻璃化苗的產(chǎn)生。%瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)皿中濕度稍低。參考文獻(xiàn)：[1]李時(shí)珍. 本草綱目[M]. 第二冊(cè). 北京:人民衛(wèi)生出版社, 1979: 929.[2] 李金格等. 我國(guó)菊花研究狀況和發(fā)展趨勢(shì)文獻(xiàn)計(jì)量分析. 《現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技》,2008 ,16(2): 1007 5739[3] 孫滿芝,尹成濤. 植物組培過程中玻璃化現(xiàn)象的發(fā)生與解決措施. 山東林業(yè)科技,2001,(6):1920[4] 建德鋒,趙文若,趙海鋒,. 北方園藝,2007,(9) :200～201[5] 張素琴等. 非洲菊組織培養(yǎng)抑制褐變現(xiàn)象的研究. 貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2007 ,35 (2) :56[6] 劉忠榮,洪波. 培養(yǎng)因素對(duì)菊花組織培養(yǎng)的影響. 廣西農(nóng)業(yè)科學(xué),2004,(1):1921[7] 王艷玲,奚廣生. 不同濃度6BA對(duì)菊花分枝的影響. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué), 2008, 36 (20) : 8465[8] 胡軍榮. , 2008, 14 (5)[9] ,2007,23 (12):63[10] ,2007,(6) :208～210致 謝 感謝生養(yǎng)了我的父母是你們給了我學(xué)習(xí)上的支持，感謝培養(yǎng)了我的母校給我們即將踏上社會(huì)的引導(dǎo)，感謝指導(dǎo)了我的老師們，是你們辛勤的汗水換來了我們對(duì)未來的憧憬，感謝和我一同度過三年美好時(shí)光的同學(xué)。特別是在接種時(shí)如果發(fā)現(xiàn)嫩莖很難插進(jìn)培養(yǎng)基那么下次應(yīng)該適當(dāng)?shù)慕档铜傊壤?，如發(fā)現(xiàn)隨凝固但很軟就應(yīng)在下次增大比例 ，方案上的不一定都合適，要看實(shí)際情況而定。由此可見, 對(duì)某一品種的菊花進(jìn)行組培時(shí), 選用什么樣的激素種類和配比, 較難有一個(gè)固定的模式, 除了參照前人的經(jīng)驗(yàn)外, 最好的辦法還是先進(jìn)行小規(guī)模的試驗(yàn), 選出適宜的激素組合再擴(kuò)大生產(chǎn)。為了防止當(dāng)代培養(yǎng)基染菌，我們?cè)谂囵B(yǎng)基中附加50—150mg/l氨芐青霉素；為了防止生根培養(yǎng)基的試管苗染菌我們加入50mg/l 硫酸丁胺卡那霉素。在組織培養(yǎng)的過程中,試管苗移栽的成功與否也是一個(gè)關(guān)鍵的環(huán)節(jié),因?yàn)樵嚬苊缭谠嚬苤胁徽撋L(zhǎng)多好,移栽若不成功則導(dǎo)致前功盡棄。在實(shí)驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn),6BA/ NAA 比值越大有利于芽分化。當(dāng)褐變現(xiàn)象不再發(fā)生時(shí),要及時(shí)停止添加PVP ,以防長(zhǎng)期使用 PVP 對(duì)外植體產(chǎn)生毒副作用。為了防止褐變我們加入了VC溶液?！∫圃耘囵B(yǎng)待根長(zhǎng)至1～2cm時(shí)開瓶進(jìn)行練苗,先將瓶塞打開,讓其由無菌環(huán)境轉(zhuǎn)至有菌且濕度較低的環(huán)境之中約3d ,將苗取出,小心用流水洗去根表面的培養(yǎng)基殘留物,移栽到素沙中,適當(dāng)遮蔭,一星期后即可成活,成活率達(dá)95 %以上,一個(gè)月后即可上盆。經(jīng)過10d 菊花莖尖顏色逐漸變綠,基部逐漸增大,莖尖也逐漸伸長(zhǎng),一般25d 后,長(zhǎng)出叢生芽。接種完成后即轉(zhuǎn)入培養(yǎng)室進(jìn)行初代培養(yǎng) ,培養(yǎng)溫度22～28 ℃,光強(qiáng)1000～4000 Lx。 選取生長(zhǎng)健壯的嫩莖洗去表面泥土 ,在超凈工作臺(tái) ,用 75 %酒精處理 20～30 秒 ,再用無菌水沖洗 3～5 次 ,轉(zhuǎn)入 %升汞溶液浸泡 8～10 分鐘 ,再用無菌水沖洗 4～6 次 ,用濾紙吸干水分?！≡趯?shí)驗(yàn)的前一天,將接種室用高錳酸鉀和甲醛熏蒸進(jìn)行滅菌消毒。白色光一般能滿足生長(zhǎng)需要。 在愈傷誘導(dǎo)期進(jìn)行適量的暗培養(yǎng), 有促進(jìn)愈傷形成的作用。藥品與試劑：MS培養(yǎng)基母液、激素(生長(zhǎng)素 、細(xì)胞分裂素等)母液、有機(jī)物（瓊脂、蔗糖）、無菌水、 %升汞、 70 %、75%酒精、?，F(xiàn)在生產(chǎn)上多用扦插和嫁接繁殖,但該方法大面積綠化使用時(shí)成苗慢,根據(jù)植物細(xì)胞全能性 ,利用組織培養(yǎng)方法，在短時(shí)間內(nèi)將體細(xì)胞培養(yǎng)出大量植株 ,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中有著非常大的推廣潛力與意義。現(xiàn)代研究表明, 菊花花瓣中不僅含有多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì), 它還有食用、藥用等多種價(jià)值, 有抗病毒、抗炎、抗氧化、抗HIV 和癌細(xì)胞的成分、舒血管、降血壓、降血脂
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