病原性真菌檢驗臨床微生物學(xué)第三軍醫(yī)大學(xué)(文件)
【正文】 成分的蛋白胨水中 ， 所產(chǎn)生的亞硝酸鹽可與吲哚結(jié)合成亞硝酸吲哚 ， 滴加濃硫酸即可出現(xiàn)薔薇色 ， 稱為霍亂紅試驗陽性 ） ③ O/129敏感試驗： 將 O/129（ 2， 4二氨基－ 6， 7－二異丙基喋啶）藥敏紙片（ 10－ 150μ g）貼在接種有待測菌的瓊脂平板上作紙片擴散試驗， 凡藥物紙片周圍出現(xiàn)抑菌環(huán)者為敏感 。 ②生物型別的鑒定： 目前，兩型主要依靠第 Ⅳ 組霍亂噬菌體裂解試驗進行鑒別，并輔以多粘菌素敏感試驗、雞紅細胞凝集試驗、 V－ P試驗和溶血試驗。El Tor生物型為陽性，古典型為陰性 。 第二部分 彎曲菌屬 ? 彎曲菌屬 (Campylobacter)細菌是一類微需氧 、不分解糖類 、 氧化酶陽性 、 菌體彎曲呈逗點狀 、S型或螺旋狀 、 有動力的革蘭氏陰性菌 。 有莢膜 ， 不形成芽胞 。 在正常大氣或無氧環(huán)境中均不能生長 。 ? 可還原硝酸鹽，氧化酶和過氧化氫酶為陽性。但近年發(fā)現(xiàn)了不少耐藥菌株。 ? 污染食物和飲水 ， 可引起人類 急性腸炎和食物中毒 ， ? 其致病因素與腸毒素 、 內(nèi)毒素 、 細胞毒素 、 侵襲力有關(guān) 。 腦脊液制成涂片作懸滴檢查 。 鑒定要點 : 氧化酶陽性 ， 革蘭氏陰性 ， 菌體彎曲或稱 S形 ， 微需氧 ， 觸酶試驗陽性 ， 不利用糖類 ， 42℃ 時生長 。 謝 謝 。 加強衛(wèi)生防疫及人畜糞便管理 ，注意飲食和飲水衛(wèi)生 。 2． 分離培養(yǎng)： ? 選擇培養(yǎng)基分離 接種于具有高度選擇性的平板培養(yǎng) （ 布氏菌血瓊脂抗性分離培養(yǎng)基 ），然后放玻璃缸內(nèi)（內(nèi)含 85%N2， 10%CO2， 5%O2），置 42℃ 孵箱內(nèi)培養(yǎng) 48小時。 ? 如不能及時送檢 ， 應(yīng)將標(biāo)本接種于卡－布運送培養(yǎng)基 。 ? 根據(jù) O抗原，可把空腸彎曲菌分成 45個以上血清型。 （ 四 ） 抵抗力 ? 抵抗力不強 ， 易被干燥 、 直射日光及弱消毒劑所殺滅 ， 56℃ 5分鐘可被殺死 。 ? 在凝固血清和血瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng) 36小時可見無色半透明毛玻璃樣小菌落 ， 單個菌落呈中心凸起 ， 周邊不規(guī)則 ， 無溶血現(xiàn)象 。 圖注：空腸彎曲菌的兩端單鞭毛（ ↑） 負染， 21 000 （ 二 ） 培養(yǎng)特性 ? 為 微需氧菌 ， 在含 ～ 5%氧和 10%CO2的環(huán)境中生長最好 。 ? 本節(jié)主要以 空腸彎曲菌 介紹本屬的生物學(xué)特性和檢驗方法 一、生物學(xué)性狀 （ 一 ） 形態(tài)與染色 空 腸 彎 曲 菌 （ ） 菌體輕度彎曲似逗點狀 ， 長 ～ 5 μm， 寬 ～ μm。 四、防治原則 ? 必須貫徹 預(yù)防為主 。 ⒉ 多粘菌素 B敏感試驗： 取被檢菌 23h肉湯培養(yǎng)物點種到含藥營養(yǎng)瓊脂平板上（多粘菌素 B50U／ ml） ,37℃ 培養(yǎng) 24h， El Tor生物型生長，而古典型敏感。 與小川型血清凝集而與稻葉型血清不凝集者為小川型 ， 反之為稻葉型 。 ② 霍亂紅試驗： 出現(xiàn)薔薇色 ， 為霍亂紅試驗陽性 。 3） 生化反應(yīng)： 霍亂弧菌氧化酶試驗 、 靛基質(zhì)試驗 、粘絲試驗和霍亂紅試驗均陽性 。 1） 玻片凝集試驗： 從分離培養(yǎng)基上挑取可疑菌落于霍亂弧菌 多價診斷血清 作玻片凝集試驗 。 ?
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