家蠶核型多角體病毒lef-11與宿主相互作用項(xiàng)目申請(qǐng)書(shū)(文件)
【正文】 2 0 1 4 .9 西南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目計(jì)劃任務(wù)書(shū)（學(xué)生項(xiàng)目） —— 基本信息 1 基本信息 申 請(qǐng) 者 信 息 姓名 董戰(zhàn)旗 性別 男 出生年月 198912 學(xué)位 學(xué)士 職稱 博士生 研究領(lǐng)域 家蠶病理學(xué) 電話 02368250076 手機(jī) 18883252030 Email 單位 家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 項(xiàng)目 基本 信息 項(xiàng)目名稱 家蠶核型多角體病毒 lef11 與宿主相互作用用蛋白研究 學(xué)科及代碼 昆蟲(chóng)病毒學(xué) 1805460 國(guó)民行業(yè)代碼 0390 科技活動(dòng) 類型 起止時(shí)間 20xx 年 1月 至 20xx年 12 月 申請(qǐng)金額 1 萬(wàn)元 項(xiàng)目摘要 項(xiàng)目研究意義 (限 100字 ) 家蠶是鱗翅目模式昆蟲(chóng)，由 BmNPV 引起的膿病是危害蠶 桑產(chǎn) 業(yè)的 最大 病 害 。 LEF11相互作用蛋白鑒定 。） 研究意義 家蠶是重要的經(jīng)濟(jì)昆蟲(chóng)，家蠶核型多角體病毒 （ BmNPV） 引起家蠶膿病 ， 每年給蠶桑業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失，目前尚無(wú)有效的治療措施，其主要原因是病毒侵染宿主的作用機(jī)制不明確 [1]。由于其基因組只有 130kb左右，編碼 150個(gè)氨基酸左右病毒通常需要通過(guò)與宿主之間的相互作用來(lái)幫助病毒完成復(fù)制等過(guò)程 [3]。作為桿 狀病毒晚期表達(dá)因子 （ late expression factors， LEFs） 家族是參與病毒 DNA復(fù)制和病毒基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的一個(gè)十分重要的家族。同時(shí)我們過(guò)表達(dá)lef11基因 鑒定其定位與 DNA復(fù)制中心。 研究?jī)?nèi)容 西南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)資金項(xiàng)目計(jì)劃任務(wù)書(shū)（學(xué)生項(xiàng)目） 7 1） LEF11 核細(xì)胞定位研究 通過(guò)免疫熒光技術(shù)鑒定家蠶 核型多角體病毒 LEF11 蛋白定位在細(xì)胞核內(nèi)，利用 BrdU 標(biāo)記技術(shù)確定其定位于宿主細(xì)胞 DNA 復(fù)制中心。 2）揭示 LEF11 過(guò)表達(dá)對(duì)宿主細(xì)胞 蛋白表達(dá)的影響 。 1） BmNPV LEF11 蛋白核定位信號(hào)鑒定 利用 LEF11 抗體免疫熒光分析 LEF11 蛋白亞細(xì)胞定位，同時(shí)借助 BrdU抗體對(duì) LEF11 在細(xì)胞核內(nèi)進(jìn)行精細(xì)定位 ； （ 該部分研究?jī)?nèi)容已完成 ） 2） BmNPV LEF11 蛋白 過(guò)表達(dá)對(duì)宿主細(xì)胞 蛋白表達(dá)影響 ① 利用 LEF11 蛋白過(guò)表達(dá)后 ， 以 LEF11 為誘餌蛋白， 通過(guò)檢測(cè)蛋白條帶變化鑒定宿主細(xì)胞蛋白表達(dá)量差異的 變化。 (3)關(guān)鍵技術(shù) 1) 免疫共沉淀技術(shù)。同時(shí)，以上關(guān)鍵技術(shù)所涉及的儀器本單位都能提供和滿足。 本項(xiàng)目 選題既有理論意義，又有應(yīng)用價(jià)值， 研究方案切實(shí)可行，技術(shù)路線合理，所用實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法先進(jìn)，能夠按期完成預(yù)定研究任務(wù)。 本項(xiàng)目的特色與創(chuàng)新之處。 因此， 研究的理論和應(yīng)用價(jià)值上具有創(chuàng)新性。結(jié)果顯示：感染后 12 h，在細(xì)胞核內(nèi)可以檢測(cè)到LEF11 以聚集的形式存在。 圖 1 LEF11 的亞細(xì)胞定位 2)LEF11 過(guò)表達(dá)后 為了分析 LEF11 過(guò)表達(dá)后， 分析 LEF11 表達(dá)量 ， 通過(guò) Western blot 分析了 LEF11 過(guò)表達(dá)后， LEF11 蛋白表達(dá)效率 。本研究室是我國(guó)蠶學(xué)學(xué)科唯一的國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，并有特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物飼養(yǎng)全國(guó)重點(diǎn)學(xué)科為支持。 申請(qǐng)人簡(jiǎn)介 1．董戰(zhàn)旗 1） 個(gè)人簡(jiǎn)介（應(yīng)包含本項(xiàng)目中承擔(dān)的任務(wù)） 董戰(zhàn) 旗，西南大學(xué)，家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，博士生，本項(xiàng)負(fù)責(zé)人。如果獲得專項(xiàng)資金資助，我將履行項(xiàng)目負(fù)責(zé)人職責(zé)，嚴(yán)格遵守有關(guān)規(guī)定，認(rèn)真開(kāi)展工作，按時(shí)報(bào)送有關(guān)材料。 負(fù)責(zé)人（簽字）： 單位公章 日期： 七、學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)小組意見(jiàn) 建議資助金額 萬(wàn)元 建 議 立項(xiàng)意見(jiàn) 年 月 日 。 簽字：
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