家蠶核型多角體病毒lef-11與宿主相互作用項目申請書(文件)
【正文】 2 0 1 4 .9 西南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費專項資金項目計劃任務(wù)書（學(xué)生項目） —— 基本信息 1 基本信息 申 請 者 信 息 姓名 董戰(zhàn)旗 性別 男 出生年月 198912 學(xué)位 學(xué)士 職稱 博士生 研究領(lǐng)域 家蠶病理學(xué) 電話 02368250076 手機 18883252030 Email 單位 家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室 項目 基本 信息 項目名稱 家蠶核型多角體病毒 lef11 與宿主相互作用用蛋白研究 學(xué)科及代碼 昆蟲病毒學(xué) 1805460 國民行業(yè)代碼 0390 科技活動 類型 起止時間 20xx 年 1月 至 20xx年 12 月 申請金額 1 萬元 項目摘要 項目研究意義 (限 100字 ) 家蠶是鱗翅目模式昆蟲，由 BmNPV 引起的膿病是危害蠶 桑產(chǎn) 業(yè)的 最大 病 害 。 LEF11相互作用蛋白鑒定 。） 研究意義 家蠶是重要的經(jīng)濟昆蟲，家蠶核型多角體病毒 （ BmNPV） 引起家蠶膿病 ， 每年給蠶桑業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失，目前尚無有效的治療措施，其主要原因是病毒侵染宿主的作用機制不明確 [1]。由于其基因組只有 130kb左右，編碼 150個氨基酸左右病毒通常需要通過與宿主之間的相互作用來幫助病毒完成復(fù)制等過程 [3]。作為桿 狀病毒晚期表達因子 （ late expression factors， LEFs） 家族是參與病毒 DNA復(fù)制和病毒基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控的一個十分重要的家族。同時我們過表達lef11基因 鑒定其定位與 DNA復(fù)制中心。 研究內(nèi)容 西南大學(xué)基本科研業(yè)務(wù)費專項資金項目計劃任務(wù)書（學(xué)生項目） 7 1） LEF11 核細胞定位研究 通過免疫熒光技術(shù)鑒定家蠶 核型多角體病毒 LEF11 蛋白定位在細胞核內(nèi)，利用 BrdU 標(biāo)記技術(shù)確定其定位于宿主細胞 DNA 復(fù)制中心。 2）揭示 LEF11 過表達對宿主細胞 蛋白表達的影響 。 1） BmNPV LEF11 蛋白核定位信號鑒定 利用 LEF11 抗體免疫熒光分析 LEF11 蛋白亞細胞定位，同時借助 BrdU抗體對 LEF11 在細胞核內(nèi)進行精細定位 ； （ 該部分研究內(nèi)容已完成 ） 2） BmNPV LEF11 蛋白 過表達對宿主細胞 蛋白表達影響 ① 利用 LEF11 蛋白過表達后 ， 以 LEF11 為誘餌蛋白， 通過檢測蛋白條帶變化鑒定宿主細胞蛋白表達量差異的 變化。 (3)關(guān)鍵技術(shù) 1) 免疫共沉淀技術(shù)。同時，以上關(guān)鍵技術(shù)所涉及的儀器本單位都能提供和滿足。 本項目 選題既有理論意義，又有應(yīng)用價值， 研究方案切實可行，技術(shù)路線合理，所用實驗技術(shù)方法先進，能夠按期完成預(yù)定研究任務(wù)。 本項目的特色與創(chuàng)新之處。 因此， 研究的理論和應(yīng)用價值上具有創(chuàng)新性。結(jié)果顯示：感染后 12 h，在細胞核內(nèi)可以檢測到LEF11 以聚集的形式存在。 圖 1 LEF11 的亞細胞定位 2)LEF11 過表達后 為了分析 LEF11 過表達后， 分析 LEF11 表達量 ， 通過 Western blot 分析了 LEF11 過表達后， LEF11 蛋白表達效率 。本研究室是我國蠶學(xué)學(xué)科唯一的國家重點實驗室，并有特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)全國重點學(xué)科為支持。 申請人簡介 1．董戰(zhàn)旗 1） 個人簡介（應(yīng)包含本項目中承擔(dān)的任務(wù)） 董戰(zhàn) 旗，西南大學(xué)，家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室，博士生，本項負責(zé)人。如果獲得專項資金資助，我將履行項目負責(zé)人職責(zé)，嚴格遵守有關(guān)規(guī)定，認真開展工作，按時報送有關(guān)材料。 負責(zé)人（簽字）： 單位公章 日期： 七、學(xué)校領(lǐng)導(dǎo)小組意見 建議資助金額 萬元 建 議 立項意見 年 月 日 。 簽字：
研究報告相關(guān)推薦
鄂ICP備17016276號-1