流式細(xì)胞技術(shù)與圖像處理(文件)
【正文】 流式細(xì)胞的主要信息 :Fluorescence ?FL1 ?FL2 ?FL3 ?FL4 最常用的標(biāo)記方法是熒光素分子標(biāo)記的抗體與細(xì)胞抗原結(jié)合 ? Forward scatter (FSC) ? Side scatter (SSC) ? FL1綠色 ? FL2黃色 、 橙色 ? FL3紅色 ? FL4紅色 488 FL1 BP 530/30 515545nm FITC（綠色， 520nm） FL2 BP 585/42 564606nm PE（黃色， 575nm） FL3 670 LP ﹥ 670nm PECy PerCP、 PECy7（紅色） 635 FL4 BP 661/16 653669nm APC（紅色， 660nm） 流式常見圖形 (Histogram Plot) 適用于：單參數(shù)分析 DNA倍體分析 抗原表達(dá)分析 流式常見圖形 (Dot Plot) 散點(diǎn)圖 偽彩圖 假三維圖和三維圖 Counts SSC → 等高圖和密度圖 ? 等高圖：類似于地圖中的等高線，同一條線上的細(xì)胞數(shù)目相等，越在里面的曲線代表細(xì)胞數(shù)目越多。 PMT 前向散射光 光電二極管 光信號的類型： ? 散射光信號 ： 與標(biāo)記熒光素?zé)o關(guān)， 是細(xì)胞的固有參數(shù)。 ? 前置放大電路 將信號等比例放大，輸出電脈沖信號。 ? 高速時(shí)樣本流變寬，單位時(shí)間內(nèi)流經(jīng)激光照射區(qū)的細(xì)胞數(shù)就增加，這樣會導(dǎo)致變異系數(shù)增加。 ? 分選型 流式細(xì)胞儀 ? 既能流式分析，還能對分析的目的細(xì)胞進(jìn)行分選； ? 進(jìn)樣管道較長，需要保持無菌狀態(tài)，所以分選型流式細(xì)胞儀一般只用于分選，不兼單純分析。FLOW CYTOMETRY 流式細(xì)胞技術(shù) 流式細(xì)胞術(shù) 流式細(xì)胞術(shù)（ Flow Cytometry， FCM）是以流式細(xì)胞儀為檢測手段的一項(xiàng)能快速、精確的對單個(gè)細(xì)胞 (或生物學(xué)顆粒 )的理化特性進(jìn)行多參數(shù)定量分析和分選的技術(shù)。 流式細(xì)胞儀 特點(diǎn) 單細(xì)胞懸液或生物顆粒 分析速度高 多參數(shù) 精度高 當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù) 流式細(xì)胞儀的分類 ? 分析型 流式細(xì)胞儀 ? 細(xì)胞樣本分析后最終進(jìn)入廢液桶，不能回收利用。 鞘液 鞘液 細(xì)胞流 激光照射點(diǎn) 流體動力學(xué)聚焦示意圖 液流驅(qū)動系統(tǒng) 進(jìn)樣速率控制 ? 通過改變樣本壓
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