sds聚丙烯酰胺凝膠電泳測定蛋白質(zhì)的分子量(文件)
【正文】 原有的空間構(gòu)象。 ? 帶負電荷的蛋白質(zhì) SDS復(fù)合物由于結(jié)合了大量的 SDS，使蛋白質(zhì)喪失了原有的電荷狀態(tài)，形成了僅保持原有分子大小為特征的負離子團塊，從而降低或消除了各種蛋白質(zhì)分子之間天然的電荷差異。 在條件一定時 ， b和 K均為常數(shù) 。對于垂直板型電泳，一般樣品進膠前電流控制在 15～ 20mA，大約 15～ 20分鐘；樣品進膠后，將電流調(diào)到 40～ 50mA,保持電流強度不變。將膠置于培養(yǎng)皿內(nèi)，放入固定液（或 10%W/V三氯乙酸），沒過凝膠板。 有兩種染色液可供選擇 。 ? 蛋白質(zhì)分子量的求算：以樣品蛋白質(zhì)遷移率比照標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)的遷移率計算樣品的分子量 。 一天換 2～ 3次脫色液 ， 直至凝膠的藍色背景褪清 、 蛋白質(zhì)色帶清晰為止 。 實驗步驟 ? 染色 ： 棄去固定液 ， 加入染色液 。 ? 剝膠和固定：電泳結(jié)束后，取下
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