【正文】 。 與國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品的比對研究 該研究項(xiàng)目已有相應(yīng)國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品，優(yōu)先使用國家（國際）標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行驗(yàn)證，重點(diǎn)觀察對相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品檢測結(jié)果的偏差情況。方法學(xué)比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實(shí)際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。 用已知活性的樣品進(jìn)行測試，記錄在試劑（盒）規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變。 校準(zhǔn)品溯源及質(zhì)控品賦值 應(yīng)參照 GB/T21415— 2021《體外診斷醫(yī)療器械生物樣 品中量的測量校準(zhǔn)品和控制物質(zhì)賦值的計(jì)量學(xué)溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準(zhǔn)品及試劑盒配套校準(zhǔn)品定值及不確定度的研究資料，提供質(zhì)控品賦值及其靶值范圍確定的研究資料。這里主要指試劑的穩(wěn)定性，通常包括保存 期穩(wěn)定性（有效期）、開瓶穩(wěn)定性、復(fù)溶穩(wěn)定性等（各 3 個批次）。 試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項(xiàng)中進(jìn)行詳細(xì)說明。在整個實(shí)驗(yàn)中，待評試劑和參比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及可重復(fù)性。 試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入 /排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。 開展體外診斷試劑臨床試驗(yàn)，申請人應(yīng)當(dāng)按照試驗(yàn)用體外診斷試劑的類別、風(fēng)險、預(yù)期用途等特性，組織制定科學(xué)、合理的臨床試驗(yàn)方案。企業(yè)在建立病例納入標(biāo)準(zhǔn)時，應(yīng)考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群。實(shí)驗(yàn)中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。 如產(chǎn)品發(fā)生涉及檢測條件優(yōu)化、增加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項(xiàng)，臨床樣本總數(shù)至少為 100 例，并在至少兩家臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)；變更參考區(qū)間及增加臨床適應(yīng)癥等變更事項(xiàng)，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品具體變更情況，酌情增加臨床試驗(yàn)總樣本數(shù)。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)假設(shè)，即評價待評試劑與參比試劑是否等效的 標(biāo)準(zhǔn)。申請人或臨床試驗(yàn)牽頭單位應(yīng)對各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的報(bào)告進(jìn)行匯總，并完成臨床 試驗(yàn)總結(jié)報(bào)告。 對臨床試驗(yàn)情況進(jìn)行簡單的 介紹。說明申請人和臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)間的合作關(guān)系。 對試驗(yàn)管理結(jié)構(gòu)的描述：管理結(jié)構(gòu)包括主要研究者、主要參加人員、實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制情況、統(tǒng)計(jì) /數(shù)據(jù)管理情況以及試驗(yàn)中發(fā)生的問題及其處理措施等。試驗(yàn)進(jìn)行時方案修改的情況和任 何方案以外的信息來源也應(yīng)詳細(xì)敘述。試驗(yàn)人員培訓(xùn)、儀器日常維護(hù)、儀器校準(zhǔn)、質(zhì)控品運(yùn)行情況，對檢測精密度、質(zhì)控品回收（或測量值）、抽查結(jié)果評估； 臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析方法：對各研究單位的病例數(shù)、病種分布情況進(jìn)行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比。 試驗(yàn)過程中方案的修改。 討論和結(jié)論。 。 （九）產(chǎn)品技術(shù)要求 產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》、《體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式》和《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2021 年第 9號）的相關(guān)規(guī)定。 試劑空白 試劑空白吸光度 在 37℃、 340nm、 1cm 光徑條件下試劑空白吸光度應(yīng)不大于 。按照生產(chǎn)企業(yè)規(guī)定的分析靈敏度計(jì)算公式計(jì)算分析靈敏度，應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)聲稱的要求。以稀釋濃度（ xi）為自變量，以測定結(jié)果均值（ yi）為因變量求出線性回歸方程。 20） U/L的血清樣本或質(zhì)控樣品，重復(fù)測試至少 20 次，分別計(jì)算測量值的平均值（ x）和標(biāo)準(zhǔn)差（ SD）。 用 (200177。 20)U/L的血清樣本或質(zhì)控樣品分別測試 3個不同批號的試劑（盒），每個批號測試 3 次，分別計(jì)算每批 3 次測定的均值xi(i=1,2,3)，按公式（ 4）、（ 5）計(jì)算相對極差（ R）。 相對偏差：相對偏差應(yīng)不超過177。 B M TT 100%?????????（ 6） 式中： B– 相對偏差； M– 測試結(jié)果均值； T– 有證參考物質(zhì)標(biāo)示值，或各濃度人源樣本定值。用線性回歸方法計(jì)算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)及每個濃度點(diǎn)的相對偏差。 注 1：熱穩(wěn)定性試驗(yàn)不能用于推導(dǎo)產(chǎn)品有效期，除非是采用基于大量的穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)建立的推導(dǎo)公式。凍干型校準(zhǔn)品和質(zhì)控品還應(yīng)檢測批內(nèi)瓶間差和復(fù)溶穩(wěn)定性。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告 2021 第 17 號）的要求。如產(chǎn)品有不同組分 ,可以寫明組分名稱。乳酸脫氫酶異常情況常見于哪些疾病，其升高或降低可能有哪些醫(yī)學(xué)解釋。 反應(yīng)式如下： +NADH+H+L乳酸 +NAD+ LDH5.【主要組成成分】應(yīng)明確以下內(nèi)容： 試劑盒提供的試劑組分的名稱、數(shù)量、每個組成成分在反應(yīng)體系中的比例或濃度。 試劑 2：煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（ NAD+）， 。干粉試劑應(yīng)明確復(fù)溶穩(wěn)定期。 7.【適用儀器】 說明可適用的儀器及型號，并提供與儀器有關(guān)的信息以便用戶能夠正確選擇使用。應(yīng)明確避免使用的提示）。 （ 2）試驗(yàn)條件：溫度、時間、測定主 /副波長、試劑用量、樣本用量、測定方法、反應(yīng)類型、反應(yīng)方向、反應(yīng)時間等以及試驗(yàn)過程中的注意事項(xiàng)。包括對每個系數(shù)及對每個計(jì)算步驟的解釋。注明―由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實(shí)驗(yàn)室建立自己的參考值（范圍）‖。 13.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 至少應(yīng)詳述以下性能指標(biāo)，性能指標(biāo)應(yīng)不低于標(biāo)準(zhǔn)有關(guān)技術(shù)指標(biāo)的要求。 （ 3）有關(guān)人源組分的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準(zhǔn)品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了 HBsAg、 HIV1/2Ab、 HCVAb 等項(xiàng)目的檢測，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。 14.【注意事項(xiàng)】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容： （ 1）本試劑盒僅供體外檢測使 用，試劑中含有的化學(xué)成分應(yīng)說明接觸人體后產(chǎn)生不良的影響后果。說明在何種情況下需要進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)。如果超出線性范圍，樣本需要稀釋測定時，應(yīng)根據(jù)試劑特性說明稀釋液的種類及最大稀釋倍數(shù)。 （ 4）質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等。 中度及重度溶血時，因紅細(xì)胞內(nèi)的乳酸脫氫酶濃度很高（約為血漿中 360 倍），避免使用此類樣本。如有血漿樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求（如草酸鹽既可與丙酮酸或乳酸發(fā)生競爭性抑制，又能與 LDH 及 NADH或 NAD+形成復(fù)合物。其他影響穩(wěn)定性的條件，如：光線、濕度等也必須說明。試劑盒如果配備質(zhì)控品，需注明質(zhì)控品靶值范圍。 例如： 本試劑盒由試劑 試劑 2和校準(zhǔn)品（選配）組成：試劑 1： Tris緩沖液， 80mmol/L（ 177。 4.【檢驗(yàn)原理】 應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分簡要說明檢驗(yàn)的原理、方法，必要時可采取圖示方法表示。 （ 1）包裝規(guī)格應(yīng)明確單、雙試劑類型；（ 2）不得多于技術(shù)要求中所列的包裝規(guī)格； （ 3）如不同包裝規(guī)格有與之特定對應(yīng)的機(jī)型，應(yīng)同時明確適用機(jī)型。 1.【產(chǎn)品名稱】 通用名稱應(yīng)當(dāng)按照《體外診斷試劑注冊管理辦法》規(guī)定的命名原則進(jìn)行命名，可適當(dāng)參考相關(guān)―分類目錄‖和 /或國家標(biāo)準(zhǔn)及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。出具注冊檢驗(yàn)報(bào)告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見。凍干品應(yīng)同時進(jìn)行復(fù)溶穩(wěn)定性試驗(yàn)，復(fù)溶后放臵到有效期末，產(chǎn)品性能應(yīng)符合線性區(qū)間、準(zhǔn)確度的技術(shù) 要求。取到有效期后的樣品檢測，線性區(qū)間、準(zhǔn)確度應(yīng)符合技術(shù)要求。 10%。 用可用于評價常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)（ CRM）對試劑（盒）進(jìn)行測試，重復(fù)檢測 3 次，取測試結(jié)果均值（ M）按式（ 6）計(jì)算相對偏差（ B）。 試劑（盒）批間相對極差應(yīng)不大于 10%。按式（ 2）、式（ 3）計(jì)算瓶間差的變異系數(shù)（ CV），批內(nèi)瓶間差均應(yīng)不大于5%。 （適用于干粉或凍干試劑） 用 (200177。 r [(xx)(y y)] (xx) (yy)ii2ii????????（ 1） 2 稀釋濃度（ xi）代入線性回歸方程，計(jì)算 yi 的估計(jì)值及 yi 與估計(jì)值的相對偏差或絕對偏差。 10U/L；101U/L— 750U/L區(qū)間內(nèi)，線性相對偏差應(yīng)不超過 10%。 用生理鹽水測試試劑（盒），在 37℃、 340nm、 1cm 光徑條件下，記錄測試啟動時的吸光度（ A1）和約 5min(t)后的吸光度（ A2）， A2 測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測試值，計(jì)算出吸光度變化值（｜ A2A1｜/t） (t 為測量時間間隔 )即為試劑空白吸光度變化率 (Δ A/min)。這里應(yīng)當(dāng)包括試劑（盒）包裝外觀、試劑內(nèi)包裝外觀、試劑的外觀。 。 有關(guān)臨床試驗(yàn)中特別情況的說明 附件 臨床試驗(yàn)中所采用的其他試驗(yàn)方法或其他診斷試劑產(chǎn)品的基本信息，如試驗(yàn)方法、診斷試劑產(chǎn)品來源、產(chǎn)品說明書及注冊批準(zhǔn)情況。試驗(yàn)過程中對方案的任何修改均應(yīng)說明，對更改的時間、理由、更改過程及有無備案進(jìn)行詳細(xì)闡述并論證其對整個研究結(jié)果評價的影響。 定量值相關(guān)性和一致性分析 用回歸分析驗(yàn)證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以 y=a+bx 和 R2 的形式給出回歸分析的擬合方程，其中： y 是考核試劑結(jié)果， x 是參比試劑結(jié)果， b 是方程斜率， a 是 y 軸 截距， R2 是判定系數(shù)，同時應(yīng)給出 b 的95%（或 99%）臵信區(qū)間，定量值結(jié)果應(yīng)無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。試驗(yàn)設(shè)計(jì)中應(yīng)包括以下內(nèi)容： 定的依據(jù)； 樣本選擇依據(jù)、入選標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn) 和剔除標(biāo)準(zhǔn)； 樣本采集、保存、運(yùn)輸方法等； 對比試劑的確立； 臨床試驗(yàn)用所有產(chǎn)品的名稱、規(guī)格、來源、批號、效期及保存條件，對比試劑的注冊情況。 。 說明本臨床試驗(yàn)所要達(dá)到的目的。 臨床試驗(yàn)報(bào)告中所用的縮略語的全稱。 包括試驗(yàn)用體外診斷試劑的通用名稱、試驗(yàn)開始日期、試驗(yàn)完成日期、主要研究者（簽名）、臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)（蓋章）、統(tǒng)計(jì)學(xué)負(fù)責(zé)人簽名及單位蓋章、申請人（蓋章）、申請人的聯(lián)系人及聯(lián)系方式、報(bào)告日期、原始資料保存地點(diǎn)。如無需復(fù)核，應(yīng)詳細(xì)說明理由。對于對比實(shí)驗(yàn)的等效性研究，最常用是對待評試劑和參比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點(diǎn)觀察相關(guān)系數(shù)（ r 值）或判定系數(shù)（ R2）、回歸擬合方程（斜率和 y 軸截距）等指標(biāo)。 申報(bào)的樣本類型均應(yīng)在臨床試驗(yàn)中進(jìn)行驗(yàn)證。總體樣本數(shù)不少于 200例，異常值樣本數(shù)不少于 60例。（ 10）其他需要說明的內(nèi)容。各研究單位選用的參比試劑及所用機(jī)型應(yīng)保持一致，以便進(jìn)行合理的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。各臨床研究機(jī)構(gòu)的方案設(shè)臵應(yīng)保持一致，且保證在整個臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動。臨床實(shí)驗(yàn)中的基本要求： 選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市的性能不低于試驗(yàn)用體外診斷試劑的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用試驗(yàn)用體外診斷試劑（以下稱待評試劑）與之進(jìn)行對比試驗(yàn)研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論，應(yīng)涵蓋產(chǎn)品中受穩(wěn)定性影響的性能指標(biāo)（如準(zhǔn)確度、線性范圍等）。研究結(jié)論應(yīng)與產(chǎn)品說明書【參考區(qū)間】的相應(yīng)描述保持一致。 不同適用機(jī)型的反應(yīng)條件如果有差異應(yīng)分別評估，不同樣本類型應(yīng)分別進(jìn)行分析性能評估。 ：可采用回收實(shí)驗(yàn)對不同濃度的溶血、黃疸、脂血對檢測結(jié)果的影響進(jìn)行評價，干擾物濃度的分布應(yīng)覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度，明確干擾物質(zhì)影響的最大濃度。 測量精密度的評估應(yīng)至少包括生理和病理兩個濃度水平的樣本進(jìn)行。如偏倚很小或在允許的誤差范圍內(nèi)，說明兩檢測系統(tǒng)對病人標(biāo)本測定結(jié)果基本相符，對同一份臨床樣本的醫(yī)學(xué)解釋，擬申報(bào)試劑與參比方法相比不會產(chǎn)生差異結(jié)果。 性能評估應(yīng)至少包括準(zhǔn)確度、精密度、線性范圍、分 析特異性（抗干擾能力）、分析靈敏度、其他影響檢測的因素等。 （二）主要原材料研究資料（如需提供）應(yīng)提供主要原材料、校準(zhǔn)品（如產(chǎn)品包含）、質(zhì)控品（如產(chǎn)品包含）的選擇、制備、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及驗(yàn)證有關(guān)的研究資料，質(zhì)控品、校準(zhǔn)品的定值試驗(yàn)材料，校準(zhǔn)品的溯源性文件等 。 ：如果體外診斷試劑中的主要原材料，采用各種動物、病原體、人源的組織和體液等生物材料經(jīng)處 理或添加某些物質(zhì)制備而成，為保證產(chǎn)品在運(yùn)輸、使用過程中對使用者和環(huán)境的安全，研究者應(yīng)提供對上述原材料所采用的滅活等試驗(yàn)方法的說明。 二、注冊申報(bào)材料要求 （一）綜述資料 綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、方法學(xué)特征、生物安全性評價、研究結(jié)果總結(jié)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告 2021年第 44 號）的相關(guān)要求。