【正文】 52 10. 自由基與腎臟病癥 53 多媒體顯微成像系統(tǒng)簡介 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 1 多媒體顯微成像系統(tǒng)簡介 一、多媒體顯微成像技術(shù)在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用現(xiàn)狀 顯微鏡誕生至今，己經(jīng) 300多年， 一直 是醫(yī)生用來研究，診斷和防治疾病不可缺少的工具。 復(fù)星實業(yè)擁有多個國內(nèi)外專利，擁有體外診斷產(chǎn)品、高智能醫(yī)療器械、核酸檢測產(chǎn)品、基因工程藥品、國家級中成新藥、西藥等六大系列產(chǎn)品體系。主要體外診斷產(chǎn)品包括長征生化診斷試劑、華泰酶免試劑、基因診斷試劑、捷瑞血球試劑；檢驗儀器有生化、多媒體顯微成像 系統(tǒng)，血球系統(tǒng)，免疫分析系統(tǒng)，細菌鑒定 /藥敏分析系統(tǒng)及 PCR 檢測系統(tǒng)等，檢驗設(shè)備與試劑種類齊全。 顯微鏡 的性能中， 放大倍率和分辨率是兩項基本技術(shù)指標。所以，一般認為將顯微鏡的最大放大倍率定為 1000 倍，就足以滿足人 眼觀察微細物體的要求。這將有利于減輕視覺疲勞，看清更多的細節(jié)，促進形態(tài)學(xué)研究的深入和發(fā)展。被視為醫(yī)學(xué)顯微技術(shù)的重多媒體顯微成像系統(tǒng)簡介 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 2 大進展。九五年，該產(chǎn)品進入我國市場，我國的北京、上海、哈爾濱、徐州、南昌、鷹潭、濟南等十余座大中城市都已推廣使用了該儀器。特別對揭示微循環(huán)障礙，血栓前狀態(tài)等病理生理環(huán)節(jié)的研究，更有其重要的臨床意義，又因其能使微觀世界簡便、直觀、快速、準確活態(tài)顯示，所以也適合醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等方面研究。再如：錢串狀紅細胞，紅細胞聚集 ,它的出現(xiàn)不僅限制了氧的輸送，而且也降低了毛細血管中的血流速度，隨著聚集的出現(xiàn)，逐漸在血液中形成團塊，如不及時加以糾正，可形成血凝塊而堵塞小血管。異常形態(tài)的紅細胞，如球形、橢圓形、口形、靶形、鐮刀形、呈錢串狀排列，形態(tài)不整，有核紅細胞，網(wǎng)織紅細胞，甚至紅細胞之間的蛋白聯(lián)合體、質(zhì)粒等，異常形態(tài)白細胞，如大小不等、中毒顆粒、多媒體顯微成像系統(tǒng)簡介 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 3 空泡變性、核變性 ，通過鏡檢清晰可辨。 通過多媒體顯微成像系統(tǒng)，我們可以看到血液及其它體液中的膽固醇結(jié)晶、內(nèi)外源性凝塊、乳糜顆粒，支原體等普通顯微鏡難于看到有形成分及其病原微生物。 對骨髓的檢查，基本上可以識別細胞類型，鑒別各型白血病原始細胞。 另外，根據(jù)布氏理論，我們的儀器 還 可用于末梢干血分析 對檢測者的健康狀態(tài)進行評估 。它是全身各系統(tǒng)新陳代謝失調(diào)和機體在應(yīng)激狀多媒體顯微成像系統(tǒng)簡介 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 4 態(tài)或疾病狀態(tài)下產(chǎn)生的，是自由基和體細胞相互作用的結(jié)果，是機體生理病理改變的表現(xiàn)，在點滴干燥血液中，呈白色多形性，并可有少量內(nèi)含物（如海氏小體等）。 （三）全息胚理論： 來源于中國中醫(yī)理論，其精華是機體的某一部分都是整個機體的縮影，貯藏著機體的所有信息。 (二 ) 通過熒光裝置可實現(xiàn)熒光顯微鏡的所有功能（如病原體抗體，自身免疫抗體，抗精子抗體的檢測等等）。而它們的出現(xiàn)，均可導(dǎo)致血液粘稠度增高，血流速度變慢，從而容易形成血栓。 (七 ) 各臟器病變的篩查，位置指導(dǎo)：適用于健康普查，尤其對于頭頸部、乳腺、消化系統(tǒng)、泌尿系統(tǒng)、肝臟等部位的檢查。 3． 陰道分泌物：采集前 24 小時禁止性交、盆浴、陰道檢查、陰道灌洗及局部上藥等。 6． 尿道拭子：用無菌棉拭子插入尿道 23 公分，旋轉(zhuǎn)一圈，停留 30 秒，取出置無菌試管保存送檢。 （二）血液標本的采集： 1． 將病人右手小指用酒精或乙醚消毒，待自然干燥或以消毒紙巾擦干。 4． 輕壓指尖并將流出的少許血液擦去（目的是排出毛細血管的血凝塊），再擠出一滴血，涂于玻片上半滴（使血液僅觸及玻片而不接觸皮膚），立即蓋上蓋玻片，輕壓以使血液充分擴散到整個玻片，再用帶橡皮頭的金屬桿末端輕敲玻片以消除靜電及氣泡。 2．活血放置時間：為了減少微生物的繁殖，保證細胞形態(tài)的變化減少及同等條件下提示結(jié)果，活血檢查應(yīng)在 30 分鐘之內(nèi)完成。 5．玻片需經(jīng)脫脂 2 小時以上，再無菌處理。當然，也是因為形態(tài)學(xué)的檢查方法，對檢查結(jié)果量的區(qū)分的影響因素也很多，因而對量的程度較難以把握。 2．血性白帶 ： 血量多少不定，有特殊異味，應(yīng)警惕惡性腫瘤，如宮頸癌及子宮內(nèi)膜癌等，并應(yīng)與子宮肌瘤、老年性陰道炎及宮內(nèi)節(jié)育器引起的副反應(yīng)造成的白帶中帶血而區(qū)別。由于厭氧菌新陳代謝產(chǎn)生氣體，有時可能呈泡沫狀。單純清潔度增加而不見滴蟲、霉菌者，可見于非特異性陰道炎。因此，在寒冷天氣 ，標本要采取保溫措施。 加德納桿菌 線索細胞是大量革蘭氏陰性（少量為陽性）球桿菌或短桿菌在鱗狀上皮細胞周邊內(nèi)成線狀密集排列，細胞邊緣成鋸齒狀且模糊不清。 1杜克雷嗜血桿菌 革蘭氏陰性短桿菌，呈多行長鏈狀平行排列的“魚群”狀。 （三）清潔度分級表： 清潔度 乳酸桿菌 病原體 pH 值 球菌 上皮細胞 白細胞 I 多 （ +++ ++++） — ~ — 滿視野 （ +++ ++++） 05/HP II 少（ + +++ ） — ~ 少 1/2 視野 （ ++ +++ ） 515/HP III 少（－ + ） 少量 （－ ++） ~ 多 少 （－ /+ ++ ） 1530/HP IV — 大量（ ++ ++++） ~ 大量 — ＞ 30/HP 女性陰道分泌物檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 15 （四）常見病原體的量化標準： 陰道毛滴蟲 ： 鏡檢到即為陽性，量化標準為： ++ 1— 5 /HP +++ 5— 15 /HP ++++ ≥ 15 /HP 真菌 （ 1） 真菌一般在陰道、宮頸分泌物中常見，而在前列腺液、精液、尿道拭子中較少見。這種情況，會出 現(xiàn)“和” +/“的報告 量化標準： ++++ 每個視野均見到較多的孢子密集分布；或見到較多的菌絲與孢子 +++ 每個視野均見到一定量的孢子分布；或見到一定量的菌絲與孢子 ++ 每個視野均見到一些孢子稀疏分布；或見到有菌絲與少量的孢子 + 一些視野見到有孢子 +/ 檢測完整個標本，偶有視野見到孢子 真 菌 孢 子 女性陰道分泌物檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 16 加德納桿菌： 分級標準： 分級標準 加德納桿菌 線索細胞（所占的比例） — — — +/ 極少量 10% + 少量 10— 30% ++ 大量 30— 50% +++ 1/2視野 50— 80% ++++ 滿視野 80— 100% 淋病雙球菌 （報告方式為白細胞內(nèi)革蘭氏陰性雙球菌） （ 1） 陽性標準 ： 革蘭氏染色后，在白細胞內(nèi)找到六對或以上的腎形革蘭氏陰性雙球菌為陽性。 量化標準： 以加德納桿菌充滿視野的量，結(jié)合其形成線索細胞的上皮細胞所占比例判定量化標準。男性前列腺液檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)使用手冊 18 二、男性前列腺液檢查 （一） 外觀 ： 正常前列腺液稀薄，呈淡乳白色，有蛋白光澤。注意：取樣后應(yīng)立即用顯微鏡進行高倍檢查，以免干涸。 結(jié)晶體 可見到主要以鈣組成的結(jié)石 （三）量化標準 卵磷脂小體 ++++ 滿視野密布 +++ 滿視野多量分布 ++ 視野稀疏分布 + 視野少見 +/ 視野偶見 － 視野未見 男性前列腺液檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 19 白細胞 ++++ ＞ 30/HP +++ 15— 30/HP ++ 5— 15/HP + 1— 5/HP +/ 視 野偶見 － 視野未見 紅細胞 ++++ ＞ 0/HP +++ 15— 30/HP ++ 5— 15/HP + 1— 5/HP +/ 視野偶見 － 視野未見 精液常規(guī)檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)使用手冊 20 三、精液常規(guī)檢查： （一）標本運送： 精液采集后應(yīng)立即送檢。 （二）外觀： 正常精液呈灰白色，自行液化后為半透明的乳白色，凡精液呈鮮紅、淡紅、暗紅或醬油色并含有大量紅細胞者稱為血精，可 能由于前列腺和精囊的非特異性炎癥、生殖系結(jié)核、腫瘤或結(jié)石所致。精液稀薄，粘稠度下降，也可見于精子濃度太低或無精子癥時。 1. 精液量 ： 精液量正常為 2~6ml，平均 ，小于 ，大于 8ml 可視為異常。 3. 精子活力： O 級 死精子、無活動力，加溫后 仍不活動 Ⅰ 級 不良，精子原地旋轉(zhuǎn)、擺動或抖動，運動遲緩 Ⅱ 級 較好，精子運動方向不明確，不呈直線運動，也不活潑 Ⅲ 級 為中速運動，但波形運動的較多 Ⅳ 級 良好，為快速的直線運動，很快超過一個視野，運動活潑 精液常規(guī)檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 21 ［參考值及臨床意義：］射精后 1 小時精子活動力級 Ⅲ ～ Ⅳ≥ 40％；射精后3 小時與 1 小時差別不顯著；射精后 6 小時精子活力 Ⅲ ～ Ⅳ 級僅占10％ ～ 15％。在精子形態(tài)學(xué)檢查過程中，正常精子必須遵循嚴格標準：正常精子頭部呈橢圓形 或卵圓形，長約 ~，寬約 ~3um，長與寬的比值為 ~，頂體區(qū)占頭部的 40%~70%；必須不存在頸、中段或尾部的缺陷；細胞質(zhì)微粒不大于正常頭部的 1/3；將所有處于邊沿異常狀態(tài)的精子均列為異常精子。 （ 3） 尾部異常：包括短尾、多尾、發(fā)夾狀尾、斷尾（角度＞ 90176。 精液常規(guī)檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 22 ［參考值及臨床意義：］正常精液中的異常精子應(yīng)＜ 30％，如超過 30％稱為畸形精子，與睪丸、附睪的功能異常密切相關(guān)。 8. 可能出現(xiàn)的病原菌：陰道滴蟲、念珠菌、支原體、衣原體等。 （ 1） 新鮮尿中的紅細胞形態(tài)對鑒別腎小球源性和非腎小球性血尿有重要價值，可用相差顯微鏡觀察紅細胞形態(tài)， 并依據(jù)形態(tài) 將其分為三種 ： a、 均一性血 尿 ：紅細胞外形及大小正常，整個尿 液 標本中不超過二種以上的紅細胞形態(tài)類型。 胞質(zhì)呈顆粒狀，沿紅細胞膜內(nèi)側(cè)間斷沉著； 有皺縮的紅細胞及大型紅細胞，胞質(zhì)沿紅細胞內(nèi)側(cè)呈線樣沉著； 細胞的一側(cè)向外展，類似葫蘆狀或發(fā)芽的酵母菌狀； 胞質(zhì)內(nèi)有散在的相對致密物，成細顆粒狀； 胞質(zhì)向四周集中形似炸面包圈樣，以及破碎的紅細胞等。 均 一 性 血 尿 尿液檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 24 （ 2）血尿的發(fā)病機理 腎小球性血尿，紅細胞形態(tài)學(xué)變化的機制目前認為可能是由于紅細胞通過有病理改變的腎小球濾膜時，受到了擠壓損傷；以后在通過各段腎小管的過程中又受到不同的 pH 和不斷變化的滲透壓的影響；加上介質(zhì)的張力，各種代謝產(chǎn)物（脂肪酸、溶血卵磷脂、膽酸等）的作用，造成紅細胞的大小、形態(tài)和血紅蛋白含量等變化。女性患者還應(yīng)注意月經(jīng)污染問題，應(yīng)通過動態(tài) 觀察 加以區(qū)別。 白細胞： 正常尿中可偶見 1－ 2 個白細胞 /HPF，如果＞ 5 個 /HPF 為增多。 其他成分 : (1) 是否有結(jié)晶體，判斷其類型，結(jié)合臨床判斷其意義。多見于蛋白代謝障礙引起的高蛋白血癥，多發(fā)性骨髓瘤的病人也有此現(xiàn)象，一般通過飲食的改善或補充來減少或分解清除血液中存在的過剩的蛋白和飽和脂肪。 （ 3）紅細胞形態(tài)異常：如大紅細胞，小紅細胞，巨紅細胞，球形、橢圓形，口形、靶形、鐮刀形紅細胞等，有利于各種貧血的診斷。 （ 6）可以直接觀察到白細胞數(shù)量的多核白細胞 亞健康檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 27 增多、減少，活動功能及其吞噬異物的功能，以此來判斷機體的免疫功能。血液中出現(xiàn)血小板針狀體是肝臟處于應(yīng)激狀態(tài)的標志，如藥物、酒精、疲勞、病毒等對肝臟的損傷。治療主要是去除病因，此外建議高蛋白飲食以促進肝細胞的再生。餐后 10— 12 小時血中乳糜微粒被清除掉，若禁食 12 小時后血中仍出現(xiàn)較多的乳糜微粒，應(yīng)高度懷疑高血脂（剛進食后形成的顆粒比較粗大）。 （ 12）異源性斑狀（內(nèi)外源性斑塊）：表現(xiàn)為血液中出現(xiàn)的脂質(zhì)斑塊，表明飲食結(jié)構(gòu)不合理，易導(dǎo)致動脈硬膽固醇結(jié)晶體 寄生蟲感染 亞健康檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 28 化，若增 多，增大，易堵塞小血管導(dǎo)致血栓形成。 以觀察第二、三滴為宜！ R1： 淋巴系統(tǒng)及皮膚組織 R2： 心臟 R3： 乳房、肝、肺、胸部、背部 R4： 腹部上部，背部下部 R5： 腹部中部，腰上部 R6： 腹部下部，腰部 R7： 腸道 R8： 盆腔 亞健康檢測 多媒體顯微成像系統(tǒng)操作手冊 29 2. ROTS 塊分布形狀與對應(yīng)的病癥 形 狀