20xx年醫(yī)學專題—第十六篇細胞因子及細胞粘附因子的測定-wenkub
2024-11-13 20 本頁面
【正文】 h233。)方法分類,第九頁，共三十八頁。j236。)的活性作用,刺激細胞增殖或集落形成的活性維持細胞生長和存活的特性 抑制細胞生長或破壞細胞的效應促進細胞趨化或抗病毒作用,第七頁，共三十八頁。,根據細胞因子特定的生物學活性,應用(y236。,第一節(jié) 生物學測定方法,第五頁，共三十八頁。bāo)粘附因子,是介導細胞間及細胞與細胞外基質間粘附作用的分子，其化學(hu224。),第三頁，共三十八頁。bāo)增殖測定法 二、細胞毒活性測定法 三、抗病毒活性測定法 四、趨化活性測定法 五、生物學活性測定方法學評價,第二節(jié) 免疫測定方法 一、ELISA方法 二、流式細胞分析法 三、酶聯(lián)免疫斑點試驗(sh236。bāo)因子與細胞(x236。bāo)粘附因子的測定,第一頁，共三十八頁。y224。,是由活化的免疫細胞及某些基質細胞表達并分泌的活性物質，其主要(zhǔy224。xu233。,1.基于DNA檢測(jiǎn c232。ngy242。,以細胞因子依賴性細胞株為靶向，通過觀察特定的細胞因子刺激或抑制依賴性細胞株增殖來評估(p237。n)細胞增殖和增殖抑制測定法,第八頁，共三十八頁。,通過檢測細胞DNA合成(h233。ch233。ng)于大標本量的測定,優(yōu)點(yōudiǎn),缺點,方法的特異性受依賴細胞株影響；放射性污染,(1) 放射性核素摻入法,第十頁，共三十八頁。,特點：不使用放射性核素， 以細胞(x236。,細胞增殖或抑制(y236。因此，待測細胞因子作一系列稀釋后加至指示細胞培養(yǎng)體系，以檢測(jiǎn c232。也可通過結晶紫、萘酚藍黑、MTT、NBB等著染活細胞，再用脫色液脫出染料后酶標儀比色測定吸光值。nɡ y242。,VSV、EMCV及Sindbis virus等,細胞病變效應(CPE)、 抑制病毒(b236。)的產量,三、抗病毒活性測定法,常用于檢測抗病毒活性的細胞株,常用于攻擊細胞的病毒,檢測抗病毒活性的方法,第十五頁，共三十八頁。 細胞被某種因素激活后，代謝增強，線粒體脫氫酶活性也增強， 著色也會加深。nɡ)于TNF等的測定,第十六頁，共三十八頁。nɡ)的病毒進行滴定。,趨化性(chemotaxis)： 誘導細胞向由趨化因子低濃度出向趨化因子高濃度處作定向移動的特性,可采用瓊脂糖和微孔小室趨化試驗。,趨化因子誘導(y242。ngji224。,根據抗體性質和特異性不同，夾心(jiāxīn)法ELISA可分為： 1. PcAb與McAb夾心法 2. McAb與PcAb夾心法 3. 雙McAb夾心法 4. 細胞、McAb夾心法,一、ELISA方法(fāngfǎ),ELISA法是應用最為廣泛的非均相酶標免疫分析技術，一步或多步的抗原抗體反應和一步酶促反應構成ELISA的基本步驟，可作定性或定量分析(d236。,敏感性偏低 不能判斷(p224。,二、流式細胞分析法,流式細胞分析法，是基于熒光抗體(k224。,1．分離和培養(yǎng)待檢細胞 2．細胞固定(g249。ng)流式細胞分析法，可以：,區(qū)分不同分泌特性的細胞亞群： Th1細胞 IFNγ Th2細胞 IL4 細胞表面的粘附分子或細胞因子受體： 單克隆抗體技術 直接或
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