葡聚糖凝膠測(cè)蛋白質(zhì)分子量-wenkub
2024-10-31 05 本頁(yè)面
【正文】 面空隙之間的水相體積。,第四頁(yè)，共十頁(yè)。,第三頁(yè)，共十頁(yè)。例如，G25為每克凝膠膨脹(p233。,目的要求： 學(xué)習(xí)凝膠過濾法的操作方法 學(xué)習(xí)使用凝膠過濾法測(cè)定蛋白質(zhì)的相對(duì)分子量 實(shí)驗(yàn)原理： 凝膠層析法〔即凝膠過濾法，gel filtration〕是以具有網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的凝膠顆粒作為固定相，葡聚糖凝膠是由線性葡聚糖和交聯(lián)劑組成的有不同孔隙度的立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，根據(jù)物質(zhì)在凝膠顆粒的微孔中擴(kuò)散的速率進(jìn)行別離(fēnl237。凝膠過濾法測(cè)定(c232。)，大分子移動(dòng)的速度快，先被洗脫出來(lái)，而小分子物質(zhì)移動(dòng)的速度慢，后被洗脫出來(lái)。ng zh224。,在洗脫過程中，大分子不能進(jìn)入凝膠內(nèi)部而沿凝膠顆粒間的空隙最先流出柱外，而小分子可以進(jìn)入凝膠內(nèi)部，流速緩慢，以致最后流出柱外，從而使樣品中分子大小不同的物質(zhì)得到(d233。,將凝膠裝柱后，柱床體積稱為“總體積〞，以Vt〔total volume〕表示。利用有顏色以便于觀察的蛋白質(zhì)，分子量約200萬(wàn)的藍(lán)色葡聚糖2000通過實(shí)際(sh237。中等分子〔分子大小在上述兩種極限之間〕所需洗脫液體積介于兩者之間，Ve＝V0＋KdVi〔0Kd1〕， Kd為分配系數(shù)，它表示一種物質(zhì)在孔隙內(nèi)的滲透程度，相當(dāng)于這種物質(zhì)在孔隙內(nèi)所占體積和孔隙總體積的比值。同樣兩
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