【正文】 (n=3)　177。% 頭孢 他 啶 均 值 :F= 10 3 (n=5)　　　均 值 ： F=10 3(n=5)　177。即兩種不同規(guī)格柱并列，可根據(jù)實際條件選擇，測定結果是一致的。（見圖 ，圖 ）圖 分析周期縮短至 4560分鐘，是原方法周期的 1/3。在上述二個基本條件不變的前提下進行方法學的改進 ,完善。 （ 2023年版新增 19個品種） 原料 制 劑 頭孢唑肟鈉 注射用頭孢唑肟鈉 頭孢替唑鈉 注射用頭孢替唑鈉 頭孢尼西鈉 注射用頭孢尼西鈉 頭孢噻吩鈉 注射用頭孢噻吩 磺芐西林鈉 注射用磺芐西林鈉 阿洛西林鈉 注射用阿洛西林鈉 美洛西林鈉 注射用美洛西林鈉 氯唑西林鈉 注射用氯唑西林鈉 苯唑西林鈉 注射用苯唑西林鈉 普魯卡因青霉素 表 HPLC測 定高分子聚合物 （ 2023年版新增 2個品種） 原料 制 劑 頭孢 地 嗪鈉 注射用 頭孢 地 嗪鈉l 國內關于 β 內酰胺類抗生素高分子雜質的研究工作是于 70年代開始，經歷了近 40年的研究，于 2023年版藥典在 4個品種 8個藥品標準中正式收載了高分子雜質檢查。l 其中 40個品種以葡聚糖凝膠 G10(40～120μm) 為填充劑的玻璃柱（ ～ 30cm）色譜柱的凝膠色譜法測定，l 2個品種以球狀蛋白色譜用親水硅膠（分子量為 1000－ 5000）為填充劑為色譜柱的 HPLC法測定。l 如：頭孢拉定中已知雜質：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l 雙氫苯苷氨酸（ 220nm）l 頭孢氨芐l 頭孢氨芐中已知雜質：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l α 苯苷氨酸l 頭孢羥氨芐中已知雜質：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l α 對羥基苯苷氨酸l 頭孢哌酮鈉中已知雜質：l 雜質 A（原稱為頭孢哌酮降介物 β ）l 如：頭孢羥氨芐 : l 供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，含 α 對羥基苯甘氨酸和 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸按外標法以峰面積計算， 均不得過 %；其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面（ %），其他各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的 3倍（ %） ,供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積 .l 如：頭孢哌酮鈉l 供試品溶液色譜圖中如有雜質峰，含 雜質 A按外標法以峰面積計算， 不得過 %，其他單個雜質峰面積不得大于對照溶液主峰面積的 2倍（ 2％），其他各雜質峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的 3倍（ %） ,供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積 可忽略不計。用雜質對照品外標法計算已知雜質的含量 ,用加校正因子與不加校正因子的自身對照法計算已知雜質和未知雜質的含量和雜質的總量。l 由于梯度洗脫基線噪音相對較大，故規(guī)定供試品溶液色譜圖中小于對照溶液主峰面積 。 總 數(shù) 有關物 質 HPLC梯度洗脫 原料 20 20 11 制 劑 28 23 15 表 碳青霉烯類與單環(huán) β 內 酰 胺 類 有關物 質檢查 總 數(shù) 有關物 質 HPLC梯度洗脫 原料 2 2 1 制 劑 2 2 1表 青霉素類與酶 抑制劑 有關物 質檢查l 采用梯度洗脫時，由于不同色譜柱的行為略有差異，故在系統(tǒng)適用性試驗中，應規(guī)定主峰的出峰時間，主峰與已知雜質的分離度等要求。l 本版藥典有多個品種采用紫外 可見分光光度法在特定的波長處測定吸光度，控制溶液的顏色，如：頭孢尼西鈉、 頭孢噻肟鈉。 l 固體口服制劑一般用 HPLC或 HPLC與 TLC作為鑒別，二法并列。注射用氨曲南l 2023年版藥典本類抗生素藥質量標準要點 l 性狀 l 本類藥物均為半合成的頭孢菌素及其制劑，原料藥外觀性狀一般為白色至微黃色粉末或結晶性粉末。阿莫西林克拉維酸鉀分散片；l l l 原料： l三、抗生素品種分類介紹 下面將重點介紹 β 內酰胺類、大環(huán)內酯類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、酰胺醇類、利福霉素類、喹諾酮類、抗腫瘤類、肽類的抗生素在新版藥典中的增修訂的情況。l 13. 更多的品種用細菌內毒素的檢查替代熱原檢查 。l l 另由于生產工藝的不同，各生產廠使用的有機溶媒也不同，同一品種中可能有幾十種的溶媒，為方便操作、經試驗在標準中規(guī)定各溶劑的相對調整保留時間（ RART），檢查時可先做供試品，從供試品中檢出的溶媒的 RART與規(guī)定的 RART比較，確定為何種溶媒時，再進行對照品測定，可減少工作量，大大降低檢驗 成本 ， 提高工作效率。l 9. 有關物質含量采用多種計算方法，如：不加校正因子的自身對照法，加校正因子的自身對照法，雜質對照品外標法。并根據(jù)國內產品實際情況，制定合理的限度。雜質 A用 HPLC檢測 ,靈敏度與正確性均優(yōu)于 TLC法。l 4. β 內酰胺類抗生素的有關物質檢查方法與國外藥典基本一致，在分離度試驗中根據(jù)實際情況進行修改，更有利方法的可操作性。l 由于系統(tǒng)適用性對照品及標準圖譜的提供，確定各雜質峰的保留時間，有利于制劑的有關物質檢查。l 在系統(tǒng)適用性試驗中均規(guī)定了主峰與指定雜質峰的分離度，l 梯度洗脫時標明主峰的保留時間，使方法的可操作性強，保證了結果的準確性。l 3. 本版藥典抗生素類增修訂有關物質項較多， β 內酰胺類抗生素 127個品種中有 116個品種采用 HPLC測定有關物質。 如 : 硫酸依替米星及制劑的有關物質 ,硫酸鹽及含量測定。l 2. 新方法新技術進一步在標準中擴大應用。 中國藥典 2023年版抗生素品種 增修訂概況 一 、概況 : 2023年版藥典抗生素品種收載情況，見表： 品種 原料 新增 制 劑 新增 總 數(shù) 新增β 內酰 胺類頭孢 菌素 類 27 11 48 19 75 30青霉素 類 與 酶 抑制 劑 20 3 28 6 48 9碳青 酶 烯類 及 單環(huán) β內 酰 胺 類2 1 2 1 4 2大 環(huán) 內 酯類 13 2 35 4 48 6氨基糖苷 類 14 25 1 39 1四 環(huán) 素 類 6 12 18利福霉素 類 1 7 8林可霉素 類 2 4 6酰 胺醇 類 4 11 15多 肽類 與 肽類 4 2 4 2 8 4抗真菌 類 3 3 6抗 腫 瘤抗生素 類 6 2 6 1 12 3磷霉素 類 3 5 8其他抗生素 3 4 7喹諾酮類 12 3 34 5 46 8總計 120 24 228 39 348 63l二、 2023年版藥典抗生素類藥標準增修訂要點 :l 鑒別項下盡可能應用專屬性強的鑒別反應 , 如：光譜法： IR 色譜法： HPLC TLC等，與鈉、鉀、鹽酸鹽、硫酸鹽的鑒別反應 . 標準中鑒別反應 HPLC與 TLC二法并列。 應用 HPLCELSD測定氨基糖苷類抗生素的組分，有關物質，特定雜質及含量的品種進一步增加。 硫酸卡那霉素及制劑的有關物質卡 B以及含量測定， 硫酸慶大霉素及制劑的慶大霉素 C組分及有關物質測定， 硫酸小諾霉素及其制劑的組分測定。l 喹諾酮類 46個品種就有 40個品種用 HPLC法測定有關物質。l 對雜質數(shù)多或多組分的、分離難度大的品種，中檢所提供混合雜質對照品，多組分對照品及標準圖譜 .l 如阿莫西林、阿莫西林克拉維酸、氨芐西林、吉他霉素、乙酰螺旋霉素等。可利用對照品溶液色譜圖中雜質的保留時間，對特定雜質進行控制。l 有很多品種采用 HPLC梯度洗脫法測定有關物質，如：頭孢地尼，頭孢唑林鈉，拉氧頭孢鈉 , 阿莫西林及其復方制劑，氨芐西林等。使該類品種標準的技術含量高于國外藥典標準。l 7. 氨基糖苷類用 HPLCELSD替代 TLC檢查有關物質與組分，提高檢測靈敏度；l l 同時可用該方法測定硫酸鹽（ SO4）的含量。根據(jù)各品種雜質的情況，在同一品種中可以同時應用 2種或 3種的計算方法。l 11. 為保證臨床使用的安全有效，供注射用 β內酰胺抗生素，除檢查有關物質外，增加高分子聚合物的檢查。l 14. 大容量注射液與眼用制劑增加滲透壓摩爾濃度檢查。l 內酰胺類抗生素 本類抗生素包括：頭孢菌素類、青霉素類、酶抑制劑類、碳青霉烯類與單環(huán) β 內酰胺類共 127個品種，占抗生素品種的 %。 l 注射用粉針劑的外觀性狀與原料相同。少數(shù)有用 UV法作為鑒別。l 有關物質 l 頭孢菌素類藥物原料 27個品種均規(guī)定檢查有關物質，制劑 42個品種除 6個品種顆粒與干混懸劑由于輔料干擾未規(guī)定檢查有關物質外 , 其他品種均有有關物質檢查。頭孢 菌素的有關物 質檢查 總 數(shù) 有關物 質 HPLC梯度洗脫原料 27 27 12制 劑 42 36 17l 青霉素類、酶抑制劑、碳青霉烯類與單環(huán) β 內酰胺類原料 22個品種均規(guī)定檢查有關物質，l 制劑 25個品種除 5個品種片，顆粒與干混懸劑等由于輔料干擾未規(guī)定檢查有關物質外 , 其他品種均有有關物質檢查。l 如：頭孢地尼規(guī)定 :l 主成分頭孢地尼峰保留時間約為 22分鐘 ， E異構體峰保留時間約為頭孢地尼峰保留時間的 ，理論板數(shù)按頭孢地尼峰計算不低于 7000， 頭孢地尼峰與其相對保留時間 。以免基線噪音影響結果正確性。l 有關物質包括已知雜質與未知雜質，故在方法中可分別規(guī)定用雜質對照品外標法、加校正因子與不加校正因子的自身對照法計算。l 在檢測中根據(jù)雜質最大吸收波長的不同，采用雙波長測定，l 如：頭孢拉定有關物質測定時，用不同波長 測定不同雜質，l 用 220nm波長檢測雙氫苯苷氨酸，l 用 254nm波長檢測其他雜質。表 凝膠色 譜測 定高分子聚合物（ 200５年版已收 載 21個品種 ） 原料 制 劑 頭孢哌酮鈉 注射用 頭孢哌酮鈉 頭孢唑 林 鈉 注射用 頭孢唑 林 鈉 頭孢 曲松 鈉 注射用 頭孢 曲松 鈉 頭孢噻肟鈉 注射用 頭孢噻肟鈉 頭孢呋 辛 鈉 注射用 頭孢呋 辛 鈉 頭孢 他 啶 注射用 頭孢 他 啶 青霉素 鈉 注射用青霉素 鈉 青霉素 V鉀 青霉素 V鉀 膠囊 阿莫西林 阿莫西林膠囊 頭孢 拉定表 .l 2023年版藥典擴大到 11個品種的 21個藥品標準中均有高分子雜質檢查。l 擬采用直徑較細，內徑為 1cm,長為 30cm的玻璃柱作為色譜柱。（見圖 ，圖 ）l 在系統(tǒng)適用性試驗中規(guī)定分離度的要求，在高分子雜質檢查時，某些藥物分子單體與高聚物不能達到基線分離時，其分離度計算公式為：l R=聚合體的峰高 /單體與聚合體之間的谷高l （分離度 R應大于 ）。 品種 2023年版 藥 典方法 F值改 進 后的方法F值相 對 偏差 阿莫西林 均 值 ： F=*103 (n=36)均 值 ： F=*103 (n=31)177。%* F值為對照品溶液濃度 (μg/ml) 與峰面積的比值表 F值 的比 較表 ％頭孢唑 林 鈉 比 對樣 品（ 蘇 州制 藥 ） 均 值 ： % (n=2)　均 值 ： % (n=6)　177。l 標準中增加有機溶媒檢查的品種較多l(xiāng) 本檢查法大多采用涂層毛細管柱為色譜柱，等溫，程序升溫，頂空進樣，l 內標法，外標法計算結果。l 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以 6%氰丙基苯基 94%二甲基聚硅氧烷為固定液（或極性相近）的毛細管柱為色譜柱，柱溫 40℃ ，維持 22分鐘，以每分鐘 100℃ 速率升溫至 120℃ ，維持 10分鐘。l 供試品溶液的制備 取本品約 ，精密稱定，置頂空瓶中，精密