【正文】 (n=3)　177。% 頭孢 他 啶 均 值 :F= 10 3 (n=5)　　　均 值 ： F=10 3(n=5)　177。即兩種不同規(guī)格柱并列，可根據(jù)實(shí)際條件選擇，測定結(jié)果是一致的。（見圖 ，圖 ）圖 分析周期縮短至 4560分鐘，是原方法周期的 1/3。在上述二個(gè)基本條件不變的前提下進(jìn)行方法學(xué)的改進(jìn) ,完善。 （ 2023年版新增 19個(gè)品種） 原料 制 劑 頭孢唑肟鈉 注射用頭孢唑肟鈉 頭孢替唑鈉 注射用頭孢替唑鈉 頭孢尼西鈉 注射用頭孢尼西鈉 頭孢噻吩鈉 注射用頭孢噻吩 磺芐西林鈉 注射用磺芐西林鈉 阿洛西林鈉 注射用阿洛西林鈉 美洛西林鈉 注射用美洛西林鈉 氯唑西林鈉 注射用氯唑西林鈉 苯唑西林鈉 注射用苯唑西林鈉 普魯卡因青霉素 表 HPLC測 定高分子聚合物 （ 2023年版新增 2個(gè)品種） 原料 制 劑 頭孢 地 嗪鈉 注射用 頭孢 地 嗪鈉l 國內(nèi)關(guān)于 β 內(nèi)酰胺類抗生素高分子雜質(zhì)的研究工作是于 70年代開始，經(jīng)歷了近 40年的研究，于 2023年版藥典在 4個(gè)品種 8個(gè)藥品標(biāo)準(zhǔn)中正式收載了高分子雜質(zhì)檢查。l 其中 40個(gè)品種以葡聚糖凝膠 G10(40～120μm) 為填充劑的玻璃柱（ ～ 30cm）色譜柱的凝膠色譜法測定，l 2個(gè)品種以球狀蛋白色譜用親水硅膠（分子量為 1000－ 5000）為填充劑為色譜柱的 HPLC法測定。l 如：頭孢拉定中已知雜質(zhì)：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l 雙氫苯苷氨酸（ 220nm）l 頭孢氨芐l 頭孢氨芐中已知雜質(zhì)：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l α 苯苷氨酸l 頭孢羥氨芐中已知雜質(zhì)：l 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸（ 7ADCA）l α 對羥基苯苷氨酸l 頭孢哌酮鈉中已知雜質(zhì)：l 雜質(zhì) A（原稱為頭孢哌酮降介物 β ）l 如：頭孢羥氨芐 : l 供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，含 α 對羥基苯甘氨酸和 7氨基去乙酰氧基頭孢烷酸按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算， 均不得過 %；其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面（ %），其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的 3倍（ %） ,供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積 .l 如：頭孢哌酮鈉l 供試品溶液色譜圖中如有雜質(zhì)峰，含 雜質(zhì) A按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算， 不得過 %，其他單個(gè)雜質(zhì)峰面積不得大于對照溶液主峰面積的 2倍（ 2％），其他各雜質(zhì)峰面積的和不得大于對照溶液主峰面積的 3倍（ %） ,供試品溶液色譜圖中任何小于對照溶液主峰面積 可忽略不計(jì)。用雜質(zhì)對照品外標(biāo)法計(jì)算已知雜質(zhì)的含量 ,用加校正因子與不加校正因子的自身對照法計(jì)算已知雜質(zhì)和未知雜質(zhì)的含量和雜質(zhì)的總量。l 由于梯度洗脫基線噪音相對較大，故規(guī)定供試品溶液色譜圖中小于對照溶液主峰面積 。 總 數(shù) 有關(guān)物 質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 20 20 11 制 劑 28 23 15 表 碳青霉烯類與單環(huán) β 內(nèi) 酰 胺 類 有關(guān)物 質(zhì)檢查 總 數(shù) 有關(guān)物 質(zhì) HPLC梯度洗脫 原料 2 2 1 制 劑 2 2 1表 青霉素類與酶 抑制劑 有關(guān)物 質(zhì)檢查l 采用梯度洗脫時(shí)，由于不同色譜柱的行為略有差異，故在系統(tǒng)適用性試驗(yàn)中，應(yīng)規(guī)定主峰的出峰時(shí)間，主峰與已知雜質(zhì)的分離度等要求。l 本版藥典有多個(gè)品種采用紫外 可見分光光度法在特定的波長處測定吸光度，控制溶液的顏色，如：頭孢尼西鈉、 頭孢噻肟鈉。 l 固體口服制劑一般用 HPLC或 HPLC與 TLC作為鑒別，二法并列。注射用氨曲南l 2023年版藥典本類抗生素藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要點(diǎn) l 性狀 l 本類藥物均為半合成的頭孢菌素及其制劑，原料藥外觀性狀一般為白色至微黃色粉末或結(jié)晶性粉末。阿莫西林克拉維酸鉀分散片；l l l 原料： l三、抗生素品種分類介紹 下面將重點(diǎn)介紹 β 內(nèi)酰胺類、大環(huán)內(nèi)酯類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、酰胺醇類、利福霉素類、喹諾酮類、抗腫瘤類、肽類的抗生素在新版藥典中的增修訂的情況。l 13. 更多的品種用細(xì)菌內(nèi)毒素的檢查替代熱原檢查 。l l 另由于生產(chǎn)工藝的不同，各生產(chǎn)廠使用的有機(jī)溶媒也不同，同一品種中可能有幾十種的溶媒，為方便操作、經(jīng)試驗(yàn)在標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定各溶劑的相對調(diào)整保留時(shí)間（ RART），檢查時(shí)可先做供試品，從供試品中檢出的溶媒的 RART與規(guī)定的 RART比較，確定為何種溶媒時(shí)，再進(jìn)行對照品測定，可減少工作量，大大降低檢驗(yàn) 成本 ， 提高工作效率。l 9. 有關(guān)物質(zhì)含量采用多種計(jì)算方法，如：不加校正因子的自身對照法，加校正因子的自身對照法，雜質(zhì)對照品外標(biāo)法。并根據(jù)國內(nèi)產(chǎn)品實(shí)際情況，制定合理的限度。雜質(zhì) A用 HPLC檢測 ,靈敏度與正確性均優(yōu)于 TLC法。l 4. β 內(nèi)酰胺類抗生素的有關(guān)物質(zhì)檢查方法與國外藥典基本一致，在分離度試驗(yàn)中根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行修改，更有利方法的可操作性。l 由于系統(tǒng)適用性對照品及標(biāo)準(zhǔn)圖譜的提供，確定各雜質(zhì)峰的保留時(shí)間，有利于制劑的有關(guān)物質(zhì)檢查。l 在系統(tǒng)適用性試驗(yàn)中均規(guī)定了主峰與指定雜質(zhì)峰的分離度，l 梯度洗脫時(shí)標(biāo)明主峰的保留時(shí)間，使方法的可操作性強(qiáng)，保證了結(jié)果的準(zhǔn)確性。l 3. 本版藥典抗生素類增修訂有關(guān)物質(zhì)項(xiàng)較多， β 內(nèi)酰胺類抗生素 127個(gè)品種中有 116個(gè)品種采用 HPLC測定有關(guān)物質(zhì)。 如 : 硫酸依替米星及制劑的有關(guān)物質(zhì) ,硫酸鹽及含量測定。l 2. 新方法新技術(shù)進(jìn)一步在標(biāo)準(zhǔn)中擴(kuò)大應(yīng)用。 中國藥典 2023年版抗生素品種 增修訂概況 一 、概況 : 2023年版藥典抗生素品種收載情況，見表： 品種 原料 新增 制 劑 新增 總 數(shù) 新增β 內(nèi)酰 胺類頭孢 菌素 類 27 11 48 19 75 30青霉素 類 與 酶 抑制 劑 20 3 28 6 48 9碳青 酶 烯類 及 單環(huán) β內(nèi) 酰 胺 類2 1 2 1 4 2大 環(huán) 內(nèi) 酯類 13 2 35 4 48 6氨基糖苷 類 14 25 1 39 1四 環(huán) 素 類 6 12 18利福霉素 類 1 7 8林可霉素 類 2 4 6酰 胺醇 類 4 11 15多 肽類 與 肽類 4 2 4 2 8 4抗真菌 類 3 3 6抗 腫 瘤抗生素 類 6 2 6 1 12 3磷霉素 類 3 5 8其他抗生素 3 4 7喹諾酮類 12 3 34 5 46 8總計(jì) 120 24 228 39 348 63l二、 2023年版藥典抗生素類藥標(biāo)準(zhǔn)增修訂要點(diǎn) :l 鑒別項(xiàng)下盡可能應(yīng)用專屬性強(qiáng)的鑒別反應(yīng) , 如：光譜法： IR 色譜法： HPLC TLC等，與鈉、鉀、鹽酸鹽、硫酸鹽的鑒別反應(yīng) . 標(biāo)準(zhǔn)中鑒別反應(yīng) HPLC與 TLC二法并列。 應(yīng)用 HPLCELSD測定氨基糖苷類抗生素的組分，有關(guān)物質(zhì)，特定雜質(zhì)及含量的品種進(jìn)一步增加。 硫酸卡那霉素及制劑的有關(guān)物質(zhì)卡 B以及含量測定， 硫酸慶大霉素及制劑的慶大霉素 C組分及有關(guān)物質(zhì)測定， 硫酸小諾霉素及其制劑的組分測定。l 喹諾酮類 46個(gè)品種就有 40個(gè)品種用 HPLC法測定有關(guān)物質(zhì)。l 對雜質(zhì)數(shù)多或多組分的、分離難度大的品種，中檢所提供混合雜質(zhì)對照品，多組分對照品及標(biāo)準(zhǔn)圖譜 .l 如阿莫西林、阿莫西林克拉維酸、氨芐西林、吉他霉素、乙酰螺旋霉素等?？衫脤φ掌啡芤荷V圖中雜質(zhì)的保留時(shí)間，對特定雜質(zhì)進(jìn)行控制。l 有很多品種采用 HPLC梯度洗脫法測定有關(guān)物質(zhì)，如：頭孢地尼，頭孢唑林鈉，拉氧頭孢鈉 , 阿莫西林及其復(fù)方制劑，氨芐西林等。使該類品種標(biāo)準(zhǔn)的技術(shù)含量高于國外藥典標(biāo)準(zhǔn)。l 7. 氨基糖苷類用 HPLCELSD替代 TLC檢查有關(guān)物質(zhì)與組分，提高檢測靈敏度；l l 同時(shí)可用該方法測定硫酸鹽（ SO4）的含量。根據(jù)各品種雜質(zhì)的情況，在同一品種中可以同時(shí)應(yīng)用 2種或 3種的計(jì)算方法。l 11. 為保證臨床使用的安全有效，供注射用 β內(nèi)酰胺抗生素，除檢查有關(guān)物質(zhì)外，增加高分子聚合物的檢查。l 14. 大容量注射液與眼用制劑增加滲透壓摩爾濃度檢查。l 內(nèi)酰胺類抗生素 本類抗生素包括：頭孢菌素類、青霉素類、酶抑制劑類、碳青霉烯類與單環(huán) β 內(nèi)酰胺類共 127個(gè)品種，占抗生素品種的 %。 l 注射用粉針劑的外觀性狀與原料相同。少數(shù)有用 UV法作為鑒別。l 有關(guān)物質(zhì) l 頭孢菌素類藥物原料 27個(gè)品種均規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)，制劑 42個(gè)品種除 6個(gè)品種顆粒與干混懸劑由于輔料干擾未規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)外 , 其他品種均有有關(guān)物質(zhì)檢查。頭孢 菌素的有關(guān)物 質(zhì)檢查 總 數(shù) 有關(guān)物 質(zhì) HPLC梯度洗脫原料 27 27 12制 劑 42 36 17l 青霉素類、酶抑制劑、碳青霉烯類與單環(huán) β 內(nèi)酰胺類原料 22個(gè)品種均規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)，l 制劑 25個(gè)品種除 5個(gè)品種片，顆粒與干混懸劑等由于輔料干擾未規(guī)定檢查有關(guān)物質(zhì)外 , 其他品種均有有關(guān)物質(zhì)檢查。l 如：頭孢地尼規(guī)定 :l 主成分頭孢地尼峰保留時(shí)間約為 22分鐘 ， E異構(gòu)體峰保留時(shí)間約為頭孢地尼峰保留時(shí)間的 ，理論板數(shù)按頭孢地尼峰計(jì)算不低于 7000， 頭孢地尼峰與其相對保留時(shí)間 。以免基線噪音影響結(jié)果正確性。l 有關(guān)物質(zhì)包括已知雜質(zhì)與未知雜質(zhì)，故在方法中可分別規(guī)定用雜質(zhì)對照品外標(biāo)法、加校正因子與不加校正因子的自身對照法計(jì)算。l 在檢測中根據(jù)雜質(zhì)最大吸收波長的不同，采用雙波長測定，l 如：頭孢拉定有關(guān)物質(zhì)測定時(shí)，用不同波長 測定不同雜質(zhì)，l 用 220nm波長檢測雙氫苯苷氨酸，l 用 254nm波長檢測其他雜質(zhì)。表 凝膠色 譜測 定高分子聚合物（ 200５年版已收 載 21個(gè)品種 ） 原料 制 劑 頭孢哌酮鈉 注射用 頭孢哌酮鈉 頭孢唑 林 鈉 注射用 頭孢唑 林 鈉 頭孢 曲松 鈉 注射用 頭孢 曲松 鈉 頭孢噻肟鈉 注射用 頭孢噻肟鈉 頭孢呋 辛 鈉 注射用 頭孢呋 辛 鈉 頭孢 他 啶 注射用 頭孢 他 啶 青霉素 鈉 注射用青霉素 鈉 青霉素 V鉀 青霉素 V鉀 膠囊 阿莫西林 阿莫西林膠囊 頭孢 拉定表 .l 2023年版藥典擴(kuò)大到 11個(gè)品種的 21個(gè)藥品標(biāo)準(zhǔn)中均有高分子雜質(zhì)檢查。l 擬采用直徑較細(xì)，內(nèi)徑為 1cm,長為 30cm的玻璃柱作為色譜柱。（見圖 ，圖 ）l 在系統(tǒng)適用性試驗(yàn)中規(guī)定分離度的要求，在高分子雜質(zhì)檢查時(shí)，某些藥物分子單體與高聚物不能達(dá)到基線分離時(shí)，其分離度計(jì)算公式為：l R=聚合體的峰高 /單體與聚合體之間的谷高l （分離度 R應(yīng)大于 ）。 品種 2023年版 藥 典方法 F值改 進(jìn) 后的方法F值相 對 偏差 阿莫西林 均 值 ： F=*103 (n=36)均 值 ： F=*103 (n=31)177。%* F值為對照品溶液濃度 (μg/ml) 與峰面積的比值表 F值 的比 較表 ％頭孢唑 林 鈉 比 對樣 品（ 蘇 州制 藥 ） 均 值 ： % (n=2)　均 值 ： % (n=6)　177。l 標(biāo)準(zhǔn)中增加有機(jī)溶媒檢查的品種較多l(xiāng) 本檢查法大多采用涂層毛細(xì)管柱為色譜柱，等溫，程序升溫，頂空進(jìn)樣，l 內(nèi)標(biāo)法，外標(biāo)法計(jì)算結(jié)果。l 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以 6%氰丙基苯基 94%二甲基聚硅氧烷為固定液（或極性相近）的毛細(xì)管柱為色譜柱，柱溫 40℃ ，維持 22分鐘，以每分鐘 100℃ 速率升溫至 120℃ ，維持 10分鐘。l 供試品溶液的制備 取本品約 ，精密稱定，置頂空瓶中，精密