【正文】 1. 進(jìn)入規(guī)定 ? 在處理危險(xiǎn)度 2 級(jí)或更高危險(xiǎn)度級(jí)別的微生物時(shí)，在實(shí)驗(yàn)室門上應(yīng)標(biāo)有國(guó)際通用的生物危害警告標(biāo)志（圖 1）。 網(wǎng)孔結(jié)構(gòu) 一級(jí)和二級(jí)生物安全水平 安全指南 主要 內(nèi) 容 ? 實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和設(shè)施 ? 實(shí)驗(yàn)室的基本規(guī)范 ? 健康和醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè) ? 培訓(xùn) ? 實(shí)驗(yàn)室設(shè)備 ? 檢測(cè)過(guò)程安全防護(hù) ? 廢棄物處理 一、實(shí)驗(yàn)室的設(shè)計(jì)和設(shè)施 ? 在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)室和安排某些類型的實(shí)驗(yàn)工作時(shí)，對(duì)于那些可能造成安全問(wèn)題的情況要加以特別關(guān)注，這些情況包括： ? 氣溶膠的形成 ? 處理大容量和 ∕ 或高濃度微生物 ? 儀器設(shè)備過(guò)度擁擠和過(guò)多 ? 嚙齒動(dòng)物和節(jié)肢動(dòng)物的侵?jǐn)_ ? 未經(jīng)允許人員進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室 ? 工作流程：一些特殊標(biāo)本和試劑的使用。 一、生物安全基本知識(shí) —— 實(shí)驗(yàn) 室分 級(jí) 實(shí)驗(yàn)室可以分為： ? 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室 —— 生物安全防護(hù)水平一級(jí)（ BSL1） ? 基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室 —— 生物安全防護(hù)水平二級(jí)（ BSL2） ? 防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 —— 生物安全防護(hù)水平三級(jí) （ BSL3） ? 最高防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 —— 生物安全防護(hù)水平四級(jí)（ BSL4） ? 根據(jù)操作不同危險(xiǎn)度等級(jí)微生物所需的實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)特點(diǎn)、建筑構(gòu)造、防護(hù)設(shè)施、儀器、操作以及操作程序來(lái)決定實(shí)驗(yàn)室的生物安全水平。 ? 危險(xiǎn)度 2 級(jí)（個(gè)體危險(xiǎn)中等，群體危險(xiǎn)低） 病原體能夠?qū)θ嘶騽?dòng)物致病，但對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作人員、社區(qū)、牲畜或環(huán)境不易導(dǎo)致嚴(yán)重危害。 ? 實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)（ biosafety protection for laboratories) 是指當(dāng)實(shí)驗(yàn)室工作人員所處理的實(shí)驗(yàn)對(duì)象含有致病性微生物及其毒素時(shí)，通過(guò)在實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、使用個(gè)體防護(hù)設(shè)施、嚴(yán)格遵守標(biāo)準(zhǔn)化工作及操作程序等方面采取綜合措施，以確保實(shí)驗(yàn)室工作人員不受實(shí)驗(yàn)室對(duì)象侵染，確保周圍環(huán)境不受污染。（共七章七十二條）。 ? 國(guó)家環(huán)境保護(hù)總局令第 32號(hào) 《 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全環(huán)境管理辦法 》 （ 2023年 5月 1日實(shí)施） ? 福建省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可證管理辦法（共 15條， 2023年十月一日實(shí)施） ? CNAS已于 2023年 06月 30日發(fā)布 《 實(shí)驗(yàn)室生物安全認(rèn)可準(zhǔn)則 》 （ CNASCL05:2023）， 2023年 07月 01日正式實(shí)施。 一、生物安全基本知識(shí) ? 實(shí)驗(yàn)室生物安全保障（ laboratory biosecurity） “實(shí)驗(yàn)室生物安全保障”則是指單位和個(gè)人為防止病原體或毒素丟失、被竊、濫用、轉(zhuǎn)移或有意釋放而采取的安全措施。實(shí)驗(yàn)室暴露也許會(huì)引起嚴(yán)重感染，但對(duì)感染有有效的預(yù)防和治療措施，并且疾病傳播的危險(xiǎn)有限。表 1 敘述了與不同危險(xiǎn)度等級(jí)相對(duì)應(yīng)的（而非“等同的”）各危險(xiǎn)度等級(jí)微生物所要求的實(shí)驗(yàn)室生物安全水平。 ? 設(shè)施和設(shè)備要求詳見 GB/T 194892023中的要求 典型的一級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室 典型的二級(jí)生物安全水平實(shí)驗(yàn)室 在生物安全柜中進(jìn)行可能發(fā)生氣溶膠的操作程序。 ? 只有經(jīng)批準(zhǔn)的人員方可進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域。 ? 與實(shí)驗(yàn)室工作無(wú)關(guān)的動(dòng)物不得帶入實(shí)驗(yàn)室。 ? 在處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和動(dòng)物后，以及在離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手。 ? 禁止在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域進(jìn)食、飲水、吸煙、化妝和處理隱形眼鏡。 ? 嚴(yán)禁將實(shí)驗(yàn)材料置于口內(nèi)。除了進(jìn)行腸道外注射或抽取實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體液，皮下注射針頭和注射器不能用于替代移液管或用作其他用途。 ? 污染的液體在排放到生活污水管道以前必須清除污染（采用化學(xué)或物理學(xué)方法）。 ? 發(fā)生具有潛在危害性的材料溢出以及在每天工作結(jié)束之后，都必須清除工作臺(tái)面的污染。 5. 生物安全管理 ? 實(shí)驗(yàn)室主任（對(duì)實(shí)驗(yàn)室直接負(fù)責(zé)的人員）負(fù)責(zé)制訂和采用生物安全管理計(jì)劃以及安全或操作手冊(cè)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)應(yīng)備有可供取閱的安全或操作手冊(cè)。監(jiān)測(cè)的目的是監(jiān)控職業(yè)獲得性疾病。疾病和實(shí)驗(yàn)室意外事故應(yīng)迅速報(bào)告，所有工作人員都應(yīng)意識(shí)到應(yīng)用規(guī)范的實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)的重要性。 ? 育齡期婦女應(yīng)知道某些微生物（如風(fēng)疹病毒）的職業(yè)暴露對(duì)未出生孩子的危害。培訓(xùn)內(nèi)容包括 : ? 1. 實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)定、自身防護(hù)的規(guī)定及相關(guān)的其它規(guī)定 ； ? 2. 實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)儀器裝備的使用方法； ? 3. 正確的著裝方法； ? 4. 微生物學(xué)操作基本技術(shù)及無(wú)菌操作方法； ? 5. 實(shí)驗(yàn)室清潔及消毒方法； ? 6. 意外事故處理方法； ? 7. 國(guó)內(nèi)外新技術(shù)、新方法等的不定期培訓(xùn)。 ? (3) 培訓(xùn)內(nèi)容 : ① 本實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)成文的規(guī)章制度 :生物安全防護(hù)、廢棄物處理、安全制度、衛(wèi)生制度、責(zé)任制度、試劑定購(gòu)制度、儀器使用制度等?？己吮竞细裾唔氈匦聦W(xué)習(xí) ,不能進(jìn)入下一步的培訓(xùn)。 ②實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作技術(shù) :包括無(wú)菌觀念、平板的制備、劃線分離、顯微鏡觀察、菌落接種、活化、菌體收集、菌（毒）種保存等。 ⑥消毒和滅菌方法 : 物理滅菌（紫外、過(guò)濾、灼燒、高壓 )法、化學(xué)滅菌 (熏蒸、酒精、消毒液 ) 法等。 ? 需要詳細(xì)咨詢?cè)O(shè)備的性能和結(jié)構(gòu)規(guī)格，以確保設(shè)施具備必要的安全特性。 ? 一次性塑料接種環(huán)，也可在生物安全柜內(nèi)使用電加熱接種環(huán)，以減少生成氣溶膠。 ? 在投入使用前，像高壓滅菌器和生物安全柜等設(shè)備必須用正確方法進(jìn)行驗(yàn)收。 ? II級(jí)生物安全柜在設(shè)計(jì)上不但能提供個(gè)體防護(hù)，而且能保護(hù)工作臺(tái)面的物品不受空氣的污染，其有四種不同的類型（ A A B1和 B2型），可用于操作危險(xiǎn)度II級(jí)和 III級(jí)的感染性物質(zhì)。 （ 11）每年應(yīng)對(duì)生物安全防護(hù)效果進(jìn)行測(cè)試，定期維護(hù)。 (2)應(yīng)按照操作手冊(cè)來(lái)操作離心機(jī)。 (6)離心桶的裝載、平衡、密封和打開必須在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。 (1 O)對(duì)于危險(xiǎn)度 3級(jí)和 4級(jí)的微生物，必須使用可封口的離心桶 (安全杯 )。 (1 3)應(yīng)當(dāng)檢查離心轉(zhuǎn)子和離心桶是否有腐蝕或細(xì)微裂痕。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)（ 4） ? 移液管、移液器 (1)應(yīng)使用移液設(shè)備，嚴(yán)禁用口吸取。 (5)不能將液體從移液管內(nèi)用力吹出。 (8)盛放廢棄移液管的容器不能放在外面，應(yīng)當(dāng)放在生物安全柜內(nèi)。 常用設(shè)備的 安全操作注意事項(xiàng)（ 5） ? 接種環(huán) 使用封閉式微型電加熱器消毒接種環(huán)，能夠避免在酒精燈的明火上加熱所引起的感染性物質(zhì)爆濺。冰箱內(nèi)物品放置應(yīng)規(guī)范。 (4)除非有防爆措施，否則冰箱內(nèi)不能放置易燃溶液。 (3)應(yīng)使用飽和蒸氣，并且其中不含腐蝕性抑制劑或其他化學(xué)品，這些物質(zhì)可能污染正在滅菌的物品。 (7)即使溫度下降到 80℃ 以下，操作者打開門時(shí)也應(yīng)當(dāng)戴適當(dāng)?shù)氖痔缀兔嬲謥?lái)進(jìn)行防護(hù)。 (1O)應(yīng)當(dāng)注意保證高壓滅菌器的安全閥沒(méi)有被高壓滅菌物品中的紙等堵塞。 以食品微生物檢測(cè)中常見的沙門氏菌屬為例，其屬于第三類病原微生物，實(shí)驗(yàn)活動(dòng)所需生物安全實(shí)驗(yàn)室級(jí)別為二級(jí)。 UN編號(hào)為： UN3373。 ? 用以處理潛在感染性微生物或動(dòng)物組織的所有的實(shí)驗(yàn)室物品，在被丟棄前應(yīng)考慮的主要問(wèn)題有： ? 是否已采取規(guī)定程序?qū)@些物品進(jìn)行了有效的清除污染或消毒？ ? 如果沒(méi)有，他們是否以規(guī)定的方式包裹，以便就地焚燒或運(yùn)送到其他有焚燒設(shè)施的地方進(jìn)行處理？ ? 丟棄已清除污染的物品時(shí)，是否會(huì)對(duì)直接參與丟棄的人員，或在設(shè)施外可能接觸到丟棄物的人員造成任何潛在的生物學(xué)或其他方面的危害？ 污染性材料和廢棄物的處理和丟棄程序 ? 實(shí)驗(yàn)室應(yīng) 建立 廢棄物處理程序 ? 要對(duì)感染性物質(zhì)及其包裝物進(jìn)行鑒別并分別進(jìn)行處理，相關(guān)工作要遵守國(guó)家和國(guó)際規(guī)定。 二、微生物實(shí)驗(yàn)室應(yīng)急措施（ 1） 手套的損壞、污染 ? 1. 手套被污染時(shí)應(yīng)立即用消毒劑噴灑手套； ? 2. 脫下手套，放入黃色垃圾袋內(nèi)，待消毒，脫手套的方法為： a.用一手捏起另一只手套近手腕處的外緣； 將手套外表面翻轉(zhuǎn)入內(nèi)； c. 用戴著手套的手拿住該手套； d. 用脫去手套的手指插入另一手套腕部?jī)?nèi)面； e. 脫下該手套使其內(nèi)面向外并形成一個(gè)由兩個(gè)手套組成的袋狀； f. 丟棄在高溫消毒袋中待消毒處理； g. 更換新手套繼續(xù)實(shí)驗(yàn)。 手部清洗消毒的方法：應(yīng)推薦使用肘動(dòng)式或自動(dòng)式洗手開關(guān)，用流動(dòng)水