13第十三章基因工程與基因組學(xué)-wenkub
2023-02-02 03:55:55 本頁面
【正文】 ） 載體的基本條件 ①有獨(dú)立的復(fù)制原點(diǎn) (ori)，能獨(dú)立地自我復(fù)制，而且能帶動(dòng)外源 DNA一起復(fù)制。 獲得外源 DNA片段（分） 限制性內(nèi)切酶切割外源 DNA片段與載體（切） 外源 DNA片段與載體連接（接） 重組 DNA分子轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞（轉(zhuǎn)） 重組子的篩選與鑒定（篩） 目的基因的確認(rèn)與分析 三、基因工程的流程及相關(guān)技術(shù) （一）外源 DNA片段的分離方法 1. 構(gòu)建基因組文庫分離法 2. 差別顯示反轉(zhuǎn)錄 PCR 3. 利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)擴(kuò)增目的基因 用克隆載體將某種生物的基因組全部遺傳信息儲(chǔ)存于一個(gè)受體菌的群體，即構(gòu)成了這種生物的基因組文庫。 通過用相同的限制性核酸內(nèi)切酶切割，連接形成一個(gè)重組DNA分子 （二）、外源 DNA片段與載體的切割和連接 （三）、重組 DNA轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞 DNA轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞 熱激轉(zhuǎn)化法 電穿孔轉(zhuǎn)化法 DNA轉(zhuǎn)入真核細(xì)胞 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 重組 DNA 感受態(tài) 細(xì)胞 冰浴 混合、靜置 42186。 基因組學(xué)研究的最終目標(biāo) ? 獲得生物體全部基因組序列 ? 鑒定所有基因的功能 ? 明確基因之間的相互作用關(guān)系 ? 闡明基因組的進(jìn)化規(guī)律 基因組學(xué)研究內(nèi)容 結(jié)構(gòu)基因組學(xué) (structural genomics) 功能基因組學(xué) (functional genomics) 比較基因組學(xué) (parative genomics) 結(jié)構(gòu)基因組學(xué)（ structural genomics） ? 基因定位 ? 基因組作圖 ? 測定核苷酸序列 ? 遺傳圖（連鎖圖） ? 物理圖 ? 轉(zhuǎn)錄圖 ? 序列圖 二、基因組圖譜的構(gòu)建 基因組計(jì)劃的第一個(gè)環(huán)節(jié)：構(gòu)建基因組圖譜 連鎖圖 (linkage map)，是指基因標(biāo)志在染色體上的遺傳距離，即確定各基因在基因組中的相對(duì)位置和排列順序。 類型：
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