【正文】 tellite DNA；功能不詳，可能與染色體穩(wěn)定有關(guān)，也有種屬的特異性．衛(wèi)星DNA依照其重復(fù)單位的的大小分為衛(wèi)星序列、小衛(wèi)星序列（minisatellite sequence）、微衛(wèi)星序列（microsatellite sequenc）。間隔基因的存在對(duì)生物的意義：有利于儲(chǔ)存較多的信息，增加信息量。4）真核細(xì)胞中許多來(lái)源相同、結(jié)構(gòu)相似、功能相關(guān)的基因往往成套組合成一個(gè)基因家族（gene family）； 非編碼序列多于編碼序列；原核生物編碼蛋白質(zhì)的基因序列絕大多數(shù)是連續(xù)的，而真核生物編碼蛋白質(zhì)的基因絕大多數(shù)是不連續(xù)的，是被一些稱(chēng)作內(nèi)含子（intron）的序列隔開(kāi)，為間隔基因；原核基因組中除了rDNA、tDNA基因有多個(gè)拷貝外，重復(fù)序列不多。用放射性核素標(biāo)記待測(cè)DNA一側(cè)末端；將標(biāo)記DNA分為G、A+G、C+T、C 4個(gè)反應(yīng)體系；用不同的化學(xué)試劑處理不同反應(yīng)體系，隨機(jī)斷裂DNA片段某種堿基中的任何一個(gè)，產(chǎn)生一組一端為放射線標(biāo)記的末端，另一端為不同大小的DNA片段的混合物；電泳分離，放射自顯影得到互相錯(cuò)落的梯形圖譜，即可讀出DNA序列。但一些生命活動(dòng)過(guò)程中存在正超螺旋.:使DNA形成高度致密狀態(tài)從而得以裝入核中；推動(dòng)DNA結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)化以滿足功能上的需要,如負(fù)超螺旋分子所受張力會(huì)引起互補(bǔ)鏈分開(kāi)導(dǎo)致局部變性，利于復(fù)制和轉(zhuǎn)錄。 bp/helix為最穩(wěn)定構(gòu)型。 Tm值的因素GC含量，高則高；鹽濃度，高澤高，但有一定范圍；有變性劑存在，如尿素，降低；極端pH條件的影響有足夠的鹽濃度以消除磷酸基的靜電斥力，；有足夠高的溫度以破壞無(wú)規(guī)則的鏈內(nèi)氫鍵，但又不能太高．否則配對(duì)堿基之間的氫鍵又難以形成的。自然狀態(tài)下，ADNA可能存在于DNARNA的雜交分子，和雙鏈RNA分子中。 ，往往是蛋白質(zhì)因子結(jié)合特異DAN序列的位點(diǎn)。直徑20197。載體（“車(chē)子”）－基因工程（技術(shù)）誕生的第2個(gè)技術(shù)準(zhǔn)備。核酸的分子生物學(xué)；蛋白質(zhì)的分子生物學(xué)；分子生物學(xué)技術(shù)40年代，Avery發(fā)現(xiàn)了生物遺傳物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)是DNA。1970年， Baltimore和 Temin等同時(shí)各自發(fā)現(xiàn)了逆轉(zhuǎn)錄酶，打破了遺傳學(xué)的中心法則，使真核基因的制備成為可能。；螺距為34197。氫鍵 ；堿基堆積力，堿基處于疏水環(huán)境中；磷酸基上負(fù)電荷被胞內(nèi)組蛋白或正離子中和，離子鍵；范德華力％所得到的DNA鈉鹽纖維；還發(fā)現(xiàn)了A、C、D、E等右手雙螺旋和左手雙螺旋,Z構(gòu)象等形式。與BDNA相比，ZDNA更為細(xì)長(zhǎng)。一般使用比Tm低20℃25℃的溫度。(緊縮態(tài))。拓?fù)洚悩?gòu)酶I通過(guò)使DNA的一條鏈發(fā)生斷裂和再連接，能使超螺旋DNA轉(zhuǎn)變成松弛型環(huán)狀DNA，每催化一次可消除一個(gè)負(fù)超螺旋，即使L增加１，反應(yīng)無(wú)需供給能量；拓?fù)洚悩?gòu)酶II則剛好相反，可使松弛型環(huán)狀DNA轉(zhuǎn)變成負(fù)超螺旋DNA，每催化一次，L 減少２，可引入負(fù)超螺旋。18. 病毒的核酸類(lèi)型 單股正鏈RNA病毒，SARS冠狀病毒 ；單股負(fù)鏈RNA病毒，禽流感病毒(H5N1)；雙鏈RNA病毒，呼腸孤病毒 ；逆轉(zhuǎn)錄病毒，人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）；線性雙鏈DNA病毒，腺病毒 ；雙鏈環(huán)狀DNA病毒，乳頭瘤病毒 ；單鏈環(huán)狀DNA病毒，噬菌體phiX174；開(kāi)環(huán)部分雙鏈DNA病毒，乙型肝炎病毒（HBV）；開(kāi)環(huán)部分雙鏈DNA病毒，乙型肝炎病毒（HBV）；：自主復(fù)制性 ；可擴(kuò)增性 ；可轉(zhuǎn)移性 ；不相容性 。高等動(dòng)植物基因組中存在大量的重復(fù)序列；原核生物基因組一般是一個(gè)復(fù)制子，而真核生物基因組的復(fù)制起始點(diǎn)很多，有多個(gè)復(fù)制子。一些斷裂基因以不同的剪接方式可以產(chǎn)生兩種以至多種mRNA，于是編碼不同功能的多肽；有利于變異和進(jìn)化；增加重組機(jī)率；可能是基因調(diào)控裝置。23. DNA 的復(fù)制酶和相關(guān)蛋白聚合酶：催化DNA的合成。這種合成DNA引物的酶就稱(chēng)為引發(fā)酶 。連接酶：是一種封閉DNA鏈上缺口酶，借助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA鏈的539。106 ）；DNA聚合酶的校對(duì)功能（錯(cuò)配堿基被3’5’外切酶切除）；起始時(shí)以RNA作為引物。脫氧核苷酸那樣直接摻入新合成的DNA鏈中，但因3’ 端不具OH基，DNA鏈合成至此中斷。 第三個(gè)反應(yīng)的都以G結(jié)尾, 第四個(gè)反應(yīng)的都以T結(jié)尾, 電泳后就可以讀出序列了.26. 真核生物的DNA聚合酶α、β、δ、ε、γ五種 α β δ ε γ位置 核內(nèi) 核內(nèi) 核內(nèi) 核內(nèi) 線粒體合成 與引發(fā) 修復(fù) 合成 合成,修復(fù) 復(fù)制功能 酶結(jié)合 前導(dǎo)鏈 后隨鏈3’－5’校 NO NO Yes Yes Yes正活性27. DNA損傷的來(lái)源：堿基的脫落；堿基(核苷)的改變（堿基類(lèi)似物；堿基的自身改變）；DNA復(fù)制中的錯(cuò)誤；插入(insertion)和缺失(deletion) ；嘧啶堿基的二聚體化；鏈的斷裂；DNA鏈的交聯(lián)。 29. DNA repairing DNA修復(fù)是細(xì)胞對(duì)DNA受損傷后的一種反應(yīng)，這種反應(yīng)可能使DNA結(jié)構(gòu)恢復(fù)原樣，重新能執(zhí)行它原來(lái)的功能；但有時(shí)并非能完全消除DNA的損傷，只是使細(xì)胞能夠耐受這種DNA的損傷而能繼續(xù)生存。此酶在各類(lèi)生物各種細(xì)胞中都普遍存在，修復(fù)反應(yīng)容易進(jìn)行。首先由核酸酶識(shí)別DNA的損傷位點(diǎn)，在損傷部位的5′側(cè)切開(kāi)磷酸二酯鍵。由DNA連接酶將新合成的DNA片段與原來(lái)的DNA斷鏈連接起來(lái)。，MutH，MutL，MutS蛋白，DNA解螺旋酶II，SSB，DNA聚合酶，核酸外切酶和DNA連接酶。5）應(yīng)急修復(fù)（SOS修復(fù) ）是指DNA受到嚴(yán)重?fù)p傷、細(xì)胞處于危急狀態(tài)時(shí)所誘導(dǎo)的一種DNA修復(fù)方式，修復(fù)結(jié)果只是能維持基因組的完整性，提高細(xì)胞的生成率，這是一種無(wú)模板指導(dǎo)的復(fù)制，故留下的錯(cuò)誤較多，故又稱(chēng)為錯(cuò)誤傾向修復(fù)(errorprone repair)，使細(xì)胞有較高的突變率。但外源DNA并不整合到宿主染色體DNA上。轉(zhuǎn)座子的結(jié)構(gòu)特征：①兩端有2040bp的反向重復(fù)序列（inverted repetitive sequence, IR)；②具有編碼轉(zhuǎn)座酶（transposase)的基因,這種酶催化轉(zhuǎn)座子插入新的位置。②復(fù)合轉(zhuǎn)座子（posite transposon，Tn）一些轉(zhuǎn)座子除了除了有轉(zhuǎn)座酶基因外，還攜帶藥物抗性(或其他)標(biāo)記。轉(zhuǎn)座作用的機(jī)制仍可分為三種不同類(lèi)型：①?gòu)?fù)制型，通過(guò)一個(gè)共合體進(jìn)行。③保守型，描述了另一種非復(fù)制結(jié)果，因子在捐贈(zèng)位點(diǎn)被切除，然后通過(guò)一連串的反應(yīng)插入到一個(gè)靶位，這樣每一個(gè)核苷粘合都被保留。p）+單順?lè)醋?“尾巴”（Poly A）核糖體RNA ( ribosomal RNA, rRNA)單鏈，與蛋白質(zhì)組成核糖體后方能發(fā)揮其功能。α、β、β’、σ四種亞基。α2ββ‘σ這樣的整個(gè)酶分子稱(chēng)為“全酶”( Holoenzyme )。整個(gè)酶分子向10序列轉(zhuǎn)移并與之牢固結(jié)合,然后10序列及起始位點(diǎn)處發(fā)生局部解鏈,一般為12bp17bp。⑴鏈的延伸以NTP為原料和能量,DNA模板鏈為模板，靠核心酶的催化，核苷酸間通過(guò)3180。⑶RNA合成的終止轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)有兩種情況弱終止子：依賴(lài)ρ因子（終止因子，terminators）的終止。 polymerase I, II, III。決定轉(zhuǎn)錄起始的精確位置。它們都是由多個(gè)短的序列（元件）所構(gòu)成。主要有四個(gè)部位：①帽子部位，即轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)。對(duì)轉(zhuǎn)錄有增強(qiáng)效應(yīng)，主要在于增強(qiáng)子與起始位點(diǎn)的距離效應(yīng)。故又稱(chēng)內(nèi)部啟動(dòng)子。原核rRNA加工：rRNA含非轉(zhuǎn)錄的間隔區(qū)，其產(chǎn)物中含tRNA真核rRNA加工： 5S自成體系加工少無(wú)修飾和剪接； 45S加工中含剪切和甲基化修飾，需核酸酶。密碼的簡(jiǎn)并性和變偶性以及偏好性。3 162。43. 真核生物的mRNA與原核生物的mRNA的區(qū)別：原核細(xì)胞mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：①半衰期短②許多原核生物mRNA以多順?lè)醋有问酱嬖冖跘UG作為起始密碼；AUG上游7～12個(gè)核苷酸處有一被稱(chēng)為SD序列的保守區(qū)， 16S rRNA3’ 端反向互補(bǔ)而使mRNA與核糖體結(jié)合。46. 蛋白質(zhì)合成的輔助因子起始因子（ initiation factor)延長(zhǎng)因子(elongation factor)終止因子(termination factor)階段 　原核　 真核 功 能____________________________________________________________　　　 IF1　　 IF2　　 eIF2 參與起始復(fù)合物的形成　　　　 IF3　　 eIFeIF4C起始　　　 CBP I 與mRNA帽子結(jié)合 　　　　　 eIF4A B F 參與尋找第一個(gè)AUG　　　　　 eIF5 協(xié)助eIF2 、 eIFeIF4C的釋放　　　　　 eIF6 協(xié)助60S亞基從無(wú)活性的核糖體上解離____________________________________________________________　　　EFTu　 eEF1a 協(xié)助氨酰tRNA進(jìn)入核糖體延長(zhǎng)　 EFTs　 eEF1 gb 幫助EFTu 、 eEF1a周轉(zhuǎn) 　　　EFG　 eEF2 移位因子____________________________________________________________　　　RF1終止　 eRF 釋放完整的肽鏈　　　RF2：⑴氨基酸的活化tRNA在氨基酰tRNA 合成酶的幫助下，能夠識(shí)別相應(yīng)的氨基酸，并通過(guò)tRNA氨基酸臂的 3‘OH 與氨基酸的羧基形成活化酯－氨基酰tRNA。IF1 加強(qiáng)IF2，IF3的酶活I(lǐng)F2 95kd117kd 促使fMettR