綠色生物儲(chǔ)糧防護(hù)劑多殺菌素可行性研究報(bào)告-wenkub
2023-06-07 20:25:08 本頁面
【正文】 術(shù)論文、著作等。 該技術(shù)為湖南省糧油科學(xué)研究設(shè)計(jì)院具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的自創(chuàng)技術(shù)。 ，從分子水平上對多殺菌素基因簇進(jìn)行改造，構(gòu)建多殺菌素高產(chǎn)工程菌，處于國內(nèi)領(lǐng)先。 解決的關(guān)鍵技術(shù) 采用基因重組技術(shù) ，從分子水平對多殺菌素基因簇進(jìn)行改造，構(gòu)建多殺菌素高產(chǎn)工程菌，具有高產(chǎn)、遺傳穩(wěn)定等優(yōu)勢。 試驗(yàn)制劑的制備 多殺菌素高產(chǎn)工程菌，作為生產(chǎn)菌種進(jìn)行 100L自動(dòng)發(fā)酵罐生產(chǎn)考核，所得的發(fā)酵液，適當(dāng)處理，制成試驗(yàn)制劑。 三、項(xiàng)目實(shí)施主要內(nèi)容、技術(shù)關(guān)鍵與創(chuàng)新點(diǎn)、預(yù)期目標(biāo) 詳細(xì)說明本項(xiàng)目實(shí)施的主要技術(shù)內(nèi)容，解決的關(guān)鍵技術(shù)，描述項(xiàng)目的技術(shù)或工藝路線。我國目前幾乎沒有開展多殺菌素防治儲(chǔ)糧害蟲的應(yīng)用研究。對米象、赤擬谷盜、鋸谷盜、玉米象的防治效果有待于觀察。根據(jù)國外文獻(xiàn)，多殺菌素主要有溶劑萃取法和HPLC 跟蹤檢測法 2 種分離純化方法。大規(guī)模發(fā)酵時(shí)優(yōu)選的碳源為葡萄糖和麥芽糖。 另一方面 給菌種一個(gè)最適發(fā)酵培養(yǎng)條件，使其產(chǎn)生高效價(jià)的性狀得以充分表達(dá)。對哺乳動(dòng)物的慢性毒理試驗(yàn)表明多殺菌素?zé)o致畸、致突變、致癌作用或神經(jīng)毒性。多殺菌素對鱗翅目幼蟲的活性大大地大于各種有機(jī)磷、氨基甲酸酯殺蟲劑，與擬除蟲菊酯相當(dāng)。這種作用結(jié)果和煙堿型乙酰膽堿受體被激活的結(jié)果是相一致的，顯而易見這一作用機(jī)制在已知的害 3 蟲防治產(chǎn)品中是新穎和獨(dú)特的。因此，我國應(yīng)加快多殺菌素生產(chǎn)技術(shù)的開發(fā)研究步伐，并結(jié)合我國糧食倉儲(chǔ)行業(yè)的實(shí)際情況，進(jìn)行實(shí)倉應(yīng)用技術(shù)的開發(fā)，從而減少化學(xué)藥劑的使用量，延緩儲(chǔ)糧害蟲抗藥性的發(fā)生和發(fā)展，最終促進(jìn)我國綠色儲(chǔ)糧技術(shù)的發(fā)展。多殺菌素首先于 1997 年在美國被批準(zhǔn)登記，商品名為 Tracer，用在棉花上。低溫儲(chǔ)藏既能防 2 治儲(chǔ)糧害蟲，又能延緩糧食陳化，是一種比較理想的技術(shù)，但其能耗高，運(yùn)行成本高，不符合國家節(jié)能減排和低碳 經(jīng)濟(jì)的產(chǎn)業(yè)政策，難以在我國推廣應(yīng)用。隨著化學(xué)農(nóng)藥的長期使用， 3R問題（害蟲抗性、有害生物再猖獗和農(nóng)藥殘留）日益嚴(yán)重，上世紀(jì) 90年代的新研究成果還表明，我國儲(chǔ)糧害蟲防治的王牌藥劑磷化氫可導(dǎo)致人體細(xì)胞染色體畸變 (Garry等 1990)和致癌 (Alavanja等 1990)，化學(xué)防治的安全性越來越受到質(zhì)疑。在我國 每年因蟲害造成的儲(chǔ)糧損失超過 1200萬噸，直接經(jīng)濟(jì)損失超過 200億元。特別是近年來隨著我國城鎮(zhèn)化的加快，耕地面積不斷減少，人口不斷增加，而糧食單產(chǎn)增幅有限，糧食總產(chǎn)難有大的突破，糧食產(chǎn)后減損已成為保障國家糧食安全的重要手段。 1 綠色生物儲(chǔ)糧防護(hù)劑多殺菌素的開發(fā) 可行性研究報(bào)告 一、立項(xiàng)的背景與意義 “民以食為天”。糧食儲(chǔ)藏安全是糧食產(chǎn)后減損的關(guān)鍵節(jié)點(diǎn)之一。 我國目前對儲(chǔ)糧害蟲的防治主要依賴于化學(xué)藥劑。隨著 1962年 Carson的《寂靜的春天》一書出版，人類對使用化學(xué)農(nóng)藥開始全面反思，特別是近年來經(jīng)濟(jì)與科技的高速發(fā)展，人們的環(huán)境意識(shí)不斷增強(qiáng)，減少和停用化學(xué)農(nóng)藥的呼聲越來越高。氣調(diào)儲(chǔ)藏也因運(yùn)行成本高、對倉房密閉性要求高，不適合我國當(dāng)前倉儲(chǔ)的實(shí)際情況，難以廣泛應(yīng)用。 20xx 年，多殺菌素已經(jīng)被批準(zhǔn)用于 73個(gè) 國家的 250 多種作物上。 二、國內(nèi)外研究現(xiàn)狀與發(fā)展趨勢 多殺菌素作為一種生物殺蟲劑，兼具生物農(nóng)藥的安全性和化學(xué)合成農(nóng)藥的速效性特點(diǎn)，目前 有 73個(gè)國家已注冊在 250多種的作物上應(yīng)用。多殺菌素同時(shí)也作用于γ 氨基丁酸受體，有可能這進(jìn)一步促成了其殺蟲活性的提高，如此的作用模式可謂獨(dú)一無二。多殺菌素具有高殺蟲活性的同時(shí) , 對捕食性昆蟲還表現(xiàn)出較低毒性 , 對鱗翅目昆蟲而言 ,多殺菌素是已發(fā)現(xiàn)的殺蟲劑中選擇性最高的化合物之一。 三是多殺菌素產(chǎn)生菌株的選育。搖瓶種子培養(yǎng)基為：葡萄糖，淀粉，精氨酸，黃豆粉，玉米漿，酵母浸出粉， CaCO3， pH 。優(yōu)選的氮源為棉子糖、胨化牛奶和消化大豆粉。 4 五是 多殺菌素在儲(chǔ)糧害蟲防治中的應(yīng)用。在堪薩斯州試驗(yàn)倉條件下， 1ppm 多殺菌素在糧食中可以保持一年。曹陽等人測定了 %菜喜懸浮劑對嗜蟲書虱、鋸谷盜和米象三種主要儲(chǔ)糧害蟲的毒力。 高產(chǎn)菌株的選育 對多殺菌素產(chǎn)生菌刺糖多孢 菌株進(jìn)行分離復(fù)壯，獲得遺傳性能較穩(wěn)定的菌株，以此為出發(fā)菌株，進(jìn)行原生質(zhì)體亞硝酸和微波誘變，然后采用模塊替換等技術(shù)方法，對多殺 菌素基因簇進(jìn)行改造，構(gòu)建多殺菌素高產(chǎn)工程菌。 對主要儲(chǔ)糧害蟲的毒力測定 用經(jīng)過多代飼養(yǎng)的糧庫主要的鱗翅目、鞘翅目害蟲（如麥娥、印度谷蛾、玉米象、谷蠹、銹赤扁谷盜） 作 為標(biāo)靶昆蟲，在人 工感染的飼料上，進(jìn)行 多殺菌素 試驗(yàn)制劑的生物測定，制定適于我國儲(chǔ)糧害蟲的多殺菌素制劑參照標(biāo)準(zhǔn)。 利用 R ed/ET同源重組、接合轉(zhuǎn)移等試驗(yàn)技術(shù)，轉(zhuǎn)化天藍(lán)色鏈
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