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綠色生物儲糧防護劑多殺菌素可行性研究報告-wenkub

2023-06-07 20:25:08 本頁面
 

【正文】 術論文、著作等。 該技術為湖南省糧油科學研究設計院具有自主知識產權的自創(chuàng)技術。 ,從分子水平上對多殺菌素基因簇進行改造,構建多殺菌素高產工程菌,處于國內領先。 解決的關鍵技術 采用基因重組技術 ,從分子水平對多殺菌素基因簇進行改造,構建多殺菌素高產工程菌,具有高產、遺傳穩(wěn)定等優(yōu)勢。 試驗制劑的制備 多殺菌素高產工程菌,作為生產菌種進行 100L自動發(fā)酵罐生產考核,所得的發(fā)酵液,適當處理,制成試驗制劑。 三、項目實施主要內容、技術關鍵與創(chuàng)新點、預期目標 詳細說明本項目實施的主要技術內容,解決的關鍵技術,描述項目的技術或工藝路線。我國目前幾乎沒有開展多殺菌素防治儲糧害蟲的應用研究。對米象、赤擬谷盜、鋸谷盜、玉米象的防治效果有待于觀察。根據國外文獻,多殺菌素主要有溶劑萃取法和HPLC 跟蹤檢測法 2 種分離純化方法。大規(guī)模發(fā)酵時優(yōu)選的碳源為葡萄糖和麥芽糖。 另一方面 給菌種一個最適發(fā)酵培養(yǎng)條件,使其產生高效價的性狀得以充分表達。對哺乳動物的慢性毒理試驗表明多殺菌素無致畸、致突變、致癌作用或神經毒性。多殺菌素對鱗翅目幼蟲的活性大大地大于各種有機磷、氨基甲酸酯殺蟲劑,與擬除蟲菊酯相當。這種作用結果和煙堿型乙酰膽堿受體被激活的結果是相一致的,顯而易見這一作用機制在已知的害 3 蟲防治產品中是新穎和獨特的。因此,我國應加快多殺菌素生產技術的開發(fā)研究步伐,并結合我國糧食倉儲行業(yè)的實際情況,進行實倉應用技術的開發(fā),從而減少化學藥劑的使用量,延緩儲糧害蟲抗藥性的發(fā)生和發(fā)展,最終促進我國綠色儲糧技術的發(fā)展。多殺菌素首先于 1997 年在美國被批準登記,商品名為 Tracer,用在棉花上。低溫儲藏既能防 2 治儲糧害蟲,又能延緩糧食陳化,是一種比較理想的技術,但其能耗高,運行成本高,不符合國家節(jié)能減排和低碳 經濟的產業(yè)政策,難以在我國推廣應用。隨著化學農藥的長期使用, 3R問題(害蟲抗性、有害生物再猖獗和農藥殘留)日益嚴重,上世紀 90年代的新研究成果還表明,我國儲糧害蟲防治的王牌藥劑磷化氫可導致人體細胞染色體畸變 (Garry等 1990)和致癌 (Alavanja等 1990),化學防治的安全性越來越受到質疑。在我國 每年因蟲害造成的儲糧損失超過 1200萬噸,直接經濟損失超過 200億元。特別是近年來隨著我國城鎮(zhèn)化的加快,耕地面積不斷減少,人口不斷增加,而糧食單產增幅有限,糧食總產難有大的突破,糧食產后減損已成為保障國家糧食安全的重要手段。 1 綠色生物儲糧防護劑多殺菌素的開發(fā) 可行性研究報告 一、立項的背景與意義 “民以食為天”。糧食儲藏安全是糧食產后減損的關鍵節(jié)點之一。 我國目前對儲糧害蟲的防治主要依賴于化學藥劑。隨著 1962年 Carson的《寂靜的春天》一書出版,人類對使用化學農藥開始全面反思,特別是近年來經濟與科技的高速發(fā)展,人們的環(huán)境意識不斷增強,減少和停用化學農藥的呼聲越來越高。氣調儲藏也因運行成本高、對倉房密閉性要求高,不適合我國當前倉儲的實際情況,難以廣泛應用。 20xx 年,多殺菌素已經被批準用于 73個 國家的 250 多種作物上。 二、國內外研究現狀與發(fā)展趨勢 多殺菌素作為一種生物殺蟲劑,兼具生物農藥的安全性和化學合成農藥的速效性特點,目前 有 73個國家已注冊在 250多種的作物上應用。多殺菌素同時也作用于γ 氨基丁酸受體,有可能這進一步促成了其殺蟲活性的提高,如此的作用模式可謂獨一無二。多殺菌素具有高殺蟲活性的同時 , 對捕食性昆蟲還表現出較低毒性 , 對鱗翅目昆蟲而言 ,多殺菌素是已發(fā)現的殺蟲劑中選擇性最高的化合物之一。 三是多殺菌素產生菌株的選育。搖瓶種子培養(yǎng)基為:葡萄糖,淀粉,精氨酸,黃豆粉,玉米漿,酵母浸出粉, CaCO3, pH 。優(yōu)選的氮源為棉子糖、胨化牛奶和消化大豆粉。 4 五是 多殺菌素在儲糧害蟲防治中的應用。在堪薩斯州試驗倉條件下, 1ppm 多殺菌素在糧食中可以保持一年。曹陽等人測定了 %菜喜懸浮劑對嗜蟲書虱、鋸谷盜和米象三種主要儲糧害蟲的毒力。 高產菌株的選育 對多殺菌素產生菌刺糖多孢 菌株進行分離復壯,獲得遺傳性能較穩(wěn)定的菌株,以此為出發(fā)菌株,進行原生質體亞硝酸和微波誘變,然后采用模塊替換等技術方法,對多殺 菌素基因簇進行改造,構建多殺菌素高產工程菌。 對主要儲糧害蟲的毒力測定 用經過多代飼養(yǎng)的糧庫主要的鱗翅目、鞘翅目害蟲(如麥娥、印度谷蛾、玉米象、谷蠹、銹赤扁谷盜) 作 為標靶昆蟲,在人 工感染的飼料上,進行 多殺菌素 試驗制劑的生物測定,制定適于我國儲糧害蟲的多殺菌素制劑參照標準。 利用 R ed/ET同源重組、接合轉移等試驗技術,轉化天藍色鏈
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