綠色生物儲糧防護劑多殺菌素可行性研究報告-文庫吧
2025-05-06 20:25 本頁面
【正文】 瓶種子培養(yǎng)基為：葡萄糖，淀粉，精氨酸，黃豆粉，玉米漿，酵母浸出粉， CaCO3， pH 。 28℃于旋轉(zhuǎn)式搖床 (偏心距 4cm)160r／ min 培養(yǎng) 72h。搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基為：葡萄糖，淀粉，精氨酸，黃豆粉，玉米漿，酵母浸出粉， CaCO3， ， 28℃于同條件搖床上培養(yǎng)6～ 8d。大規(guī)模發(fā)酵時優(yōu)選的碳源為葡萄糖和麥芽糖。優(yōu)選的氮源為棉子糖、胨化牛奶和消化大豆粉。 四是多殺菌素的分離提純和測定。目前國內(nèi)對多殺菌素的分離提純尚未有實質(zhì)性研究。根據(jù)國外文獻，多殺菌素主要有溶劑萃取法和HPLC 跟蹤檢測法 2 種分離純化方法。 4 五是 多殺菌素在儲糧害蟲防治中的應用。 近幾年，美國堪薩斯大學谷物科學和工業(yè)系的 Bh. Subramanyam, M. D. Toews 和 L. Fang對利用多殺菌素防治儲糧害蟲進行了較為詳細的研究。 1ppm 多殺菌素就能完全防 治印度谷蛾、麥蛾、谷蠹、雜擬谷盜、銹赤扁谷盜、米扁蟲。對米象、赤擬谷盜、鋸谷盜、玉米象的防治效果有待于觀察。在堪薩斯州試驗倉條件下， 1ppm 多殺菌素在糧食中可以保持一年。在同樣條件下溫度從 10到 32℃變化時，沒有明顯的損失。多殺菌素在水分為 ％到 ％的小麥中的殺蟲效果沒有什么變化。我國目前幾乎沒有開展多殺菌素防治儲糧害蟲的應用研究。曹陽等人測定了 %菜喜懸浮劑對嗜蟲書虱、鋸谷盜和米象三種主要儲糧害蟲的毒力。結(jié)果表明，多殺菌素對這三種主要儲糧害蟲都有較好的觸殺效果，其 LC50分別為 、 、 ，在 mg/m2的濃度下， 48 小時的防治效果均達 90％以上 。 高產(chǎn)菌株的選育、多殺菌素的產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)及其在糧食儲藏的應用技術(shù)研究將是多殺菌素未來研究的重點。 三、項目實施主要內(nèi)容、技術(shù)關(guān)鍵與創(chuàng)新點、預期目標 詳細說明本項目實施的主要技術(shù)內(nèi)容，解決的關(guān)鍵技術(shù)，描述項目的技術(shù)或工藝路線。 高產(chǎn)菌株的選育 對多殺菌素產(chǎn)生菌刺糖多孢 菌株進行分離復壯，獲得遺傳性能較穩(wěn)定的菌株，以此為出發(fā)菌株，進行原生質(zhì)體亞硝酸和微波誘變，然后采用模塊替換等技術(shù)方法，對多殺 菌素基因簇進行改造，構(gòu)建多殺菌素高產(chǎn)工程菌。 高產(chǎn)工程菌 發(fā)酵單位達到 600μ g/ml 。 發(fā)酵培養(yǎng)條件的選擇 在目前國內(nèi)外的研究基礎上，通過正交試驗，選擇高產(chǎn)工程菌的 5 搖瓶種子培養(yǎng)基、搖瓶發(fā)酵培養(yǎng)基 、大規(guī)模發(fā)酵培養(yǎng)基最佳配方和最適條件。 試驗制劑的制備 多殺菌素高產(chǎn)工程菌，作為生產(chǎn)菌種進行 100L自動發(fā)酵罐生產(chǎn)考核，所得的發(fā)酵液，適當處理，制成試驗制劑。 對主要儲糧害蟲的毒力測定 用經(jīng)過多代飼養(yǎng)的糧庫主要的鱗翅目、鞘翅目害蟲（如麥娥、印度谷蛾、玉米象、谷蠹、銹赤扁谷盜） 作 為標靶昆蟲，在人 工感染的飼料上，進行 多殺菌素 試驗制劑的生物測定，制定適于我國儲糧害蟲的多殺菌素制劑參照標準。 糧食倉儲適用型多殺菌素制劑開發(fā) 通過與植物源殺蟲劑蛇床子、印楝素等 生物農(nóng)藥的 復配篩選，確定復配劑的實驗室殺蟲效果及實倉防治效果。 糧食倉儲適用型多殺菌素制劑應用技術(shù)研究 開展多殺菌素制劑應用于不同地域、不同倉型（高大平房倉、淺圓倉、立筒倉）、不同糧種（稻谷、小麥、玉米）的糧食儲藏技術(shù)研究，制定操作規(guī)程；開展多殺菌素制劑應用于農(nóng)戶儲糧的實用技術(shù)研究， 制定操作規(guī)程。 解決的關(guān)鍵技術(shù) 采用基因重組技術(shù) ，從分子水平對多殺菌素基因簇進行改造，構(gòu)建多殺菌素高產(chǎn)工程菌，具有高產(chǎn)、遺傳穩(wěn)定等優(yōu)勢。 利用 R ed/ET同源重組、接合轉(zhuǎn)移等試驗技術(shù)，轉(zhuǎn)化天藍色鏈 6 霉菌和農(nóng)桿菌等異源宿主菌，達到縮短多殺菌素發(fā)酵周期。 采用多種生物制劑復配，解決了微生物制劑擊倒性不強，產(chǎn)生效果慢、殺蟲譜存在缺陷的問題。 重點說明本項目的創(chuàng)新點，包括技術(shù)創(chuàng)新、產(chǎn)品結(jié)構(gòu)創(chuàng)新、生產(chǎn)工藝創(chuàng)新、產(chǎn)品性能及使用效果的創(chuàng)新等。 ，從分子水平上對多殺菌素基因簇進行改造，構(gòu)建多殺菌素高產(chǎn)工程菌，處于國內(nèi)領先。 2． 2利用 Red/ET同源重組、接合轉(zhuǎn)移等試驗技術(shù)，達到縮短多殺菌素發(fā)酵周期處于國內(nèi)領先。 2． 3 開發(fā)多殺菌素儲糧生物保護劑，填補國內(nèi)空白。 說明項目的技術(shù)來源，合作單位情況，知識產(chǎn)權(quán)歸屬情況。 該技術(shù)為湖南省糧油科學研究設計院具有自主知識產(chǎn)權(quán)的自創(chuàng)技術(shù)。 課題承擔三方通過協(xié)議約定，課題產(chǎn)生的成果、專利和產(chǎn)品均歸湖南省糧油科學研究設計院所有。 說明項目實施各階段及項目完成后預期取得的主要技術(shù)成果（包括新技術(shù)、新工藝、新產(chǎn)品等）技術(shù)水平及相應技術(shù)指標等。產(chǎn)業(yè)化項目可以是成果工程化或中試成果，以及產(chǎn)業(yè)化過程 中的技術(shù)創(chuàng)新、產(chǎn)品創(chuàng)新、機制創(chuàng)新等?；A研究項目主要是學術(shù)論文、著作等。 基地； 1種效價 10000IU/mg20xx0IU/mg粉劑的多殺菌素綠
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