農(nóng)桿菌介導轉化法的概述-wenkub
2023-07-12 08:27:17 本頁面
【正文】 桿菌細胞膜特定“孔道”進入宿主植物細胞核，進而使TDNA整合到植物基因組中。其侵染植物是將其Ri質粒上的TDNA插入到宿主植物基因組中，這一點與Ti質粒相類似。這些基因也稱為Ti質粒編碼毒性基因(vir)。bp(CAGGAATATAT)和4region)：不同來源的菌株，TDNA的長度在12~24關鍵詞：農(nóng)桿菌 轉化方法 轉化效率1 目前，應用于植物轉基因較多的方法有基因槍轟擊法和農(nóng)桿菌介導法。 學年第學期2014級碩士生生物化學期末論文 任課老師： 開課學院： 課程名稱： 學 院： 專 業(yè)： 學 號： 姓 名： 2015年6月20日農(nóng)桿菌介導轉化法的概述摘要：自從1983年轉基因植物誕生以來，植物基因工程成為發(fā)展最快、應用潛力最大的生物技術領域之一。由于基因槍轟擊的隨機性，容易出現(xiàn)突變、丟失和引起基因沉默等不利于外源基因在宿主植物的穩(wěn)定表達的缺點，而農(nóng)桿菌介導法是一種天然的植物遺傳轉化系統(tǒng),外源基因在轉基因植物中的拷貝數(shù)低、遺傳穩(wěn)定，是最常用的轉基因技術[2]。關于農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌[35]是普遍存在于土壤中的一種革蘭氏陰性細菌，它能在自然條件下趨化性的感染大多數(shù)雙子葉植物的受傷部位，并誘導產(chǎn)生冠癭瘤或發(fā)狀根。根癌農(nóng)桿菌依據(jù)Ti質粒誘導的植物細胞產(chǎn)生的冠癭堿的種類不同，根癌農(nóng)桿菌可分為4種類型：章魚堿型（Octopine）、胭脂堿型（Nopaline）、農(nóng)桿堿型（Agropine）和琥珀堿型（Succinamopine）。kb，它是在農(nóng)桿菌侵染細胞時，從Ti質粒上切割下來轉移到植物基因組中的一段DNA，其攜帶的基因與腫瘤的形成有關，但與TDNA本身的轉移與整合無關．TDNA上最重要的是TDNA區(qū)兩端的邊界各為25bp(GTAA)不連續(xù)的2組．左右2個邊界(LB和RB)是T—DNA轉移所必需的，只要其存在，TDNA可以將攜帶的任何基因轉移并整合到植物基因組中，轉移的方向是從右向左，TDNA的右邊界在TDNA的整合中對于靶DNA位點的識別具有重要作用目前，對章魚堿型農(nóng)桿菌Ti質粒pTi15955和胭脂堿型農(nóng)桿菌Ti質粒pTiC58的vir區(qū)進行了全序列分析，在章魚堿型Ti質粒的vir區(qū)發(fā)現(xiàn)了8個操縱子，分別為virAvjrH，共包括23個基因(virA，virB1virB11，virC1，virC2，virD1virD4，virE1，virE2，virF，virG，virH)．而胭脂堿型Ti質粒的vir區(qū)不含vjrF和virH操縱子，它含有另一個基因tzs(ori區(qū))：該區(qū)段調(diào)控Ti質粒的自我復制。發(fā)根農(nóng)桿菌轉移機制也類似，所不同的是vir區(qū)和TDNA區(qū)所含基因及其同源性不同。2當農(nóng)桿菌接受到此類信號時，其vir區(qū)基因可被誘導轉錄
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