堿性磷酸酶km值測定-wenkub
2023-06-10 18:01:47 本頁面
【正文】 ) Km可近似表示酶對底物的親和力； c) 同一酶對于不同底物有不同的 Km值。 意義 — 可用來比較每單位酶的催化能力。 * 低溫的應(yīng)用 酶 活 性 0 10 20 30 40 50 60 溫度 186。反應(yīng)式如下： 然后，以吸光度直接表示不同底物濃度時的酶反應(yīng)速度，即以吸光度的倒數(shù)作縱坐標以底物濃度的倒數(shù)作橫坐標，按LineweaverBurk作圖法求出 Km值。 操作 試劑 （ ml） 1 2 3 4 5 6 蒸餾水 － － 堿性緩沖液 混勻后， 37℃ 水浴 5min 堿性磷酸酶 － 混勻后， 37℃ 水浴 15min(準確計時） 酚試劑 堿性磷酸酶 － － － － － 10%碳酸鈉 混勻后， 37℃ 水浴 15min,以第 6管調(diào) 0與 650nm比色，讀取各管 A值。 【 注意事項 】 。 ? Km值的定義和意義是什么？ ? 米氏方程度表達式是什么，如何求出 Vmax和 Km？ 【 實驗討論 】 ⑴ 加入堿性磷酸酶液的量要準確，否則誤差較大。 稱取無水 Na2CO3 NaHcO3 ，先以適量蒸餾水溶解，再定容至 1000ml。 0 酶 活
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