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瘧原蟲的鏡檢技術(shù)山東省寄生蟲病防治研究所-wenkub

2023-06-10 13:32:06 本頁面
 

【正文】 鏡視野內(nèi)可見到 5~ 10個自細胞為宜 ), ③厚血膜的位置,位于玻片右 1/3處。 方法是將載片分為 6等分 , 第 2格備貼標(biāo)簽及編號用;厚血膜涂在第 3格中央 , 薄血膜涂在第 4格前緣至第 6格中部 。 薄血膜: 血量 ~ ul, 位置 玻片 1/ 2~ 1/ 3處 , 外觀 舌狀厚薄均勻 ;染色質(zhì)量 外觀蘭紫色; 清潔度 外觀光潔無油灰 。包括:厚、薄血片的制作和染色;瘧原蟲的顯微鏡鏡檢,確定陰陽性和蟲種,定量計數(shù)以及顯微鏡的使用與維護。 制作血膜的注意事項 , 且勿碰撞 、 磨損 。 切忌在毒太陽下曬或火烤,干透后才能用甲醇固定薄血膜。 染液的種類 染液種類:瘧原蟲的染色,目前臨床上應(yīng)用最廣泛的是 瑞氏( Wright stain)和吉氏染液( Giemsa stain)。 染液的染色原理 染色原理是染料于被染物的陰陽離子互相吸附而結(jié)合的一種化學(xué)反應(yīng) 。 堿性染料美藍 的有色基團帶陽離子 , 可與細胞中帶負電荷的 COO部分結(jié)合 , 使之成為 藍色 。 染液偏酸 時,所帶的正電荷增加,易于伊紅結(jié)合,使紅細胞和瘧原蟲的核染成鮮紅色 ,而 淋巴細胞和原蟲的胞漿著色較差 ;反之,當(dāng) 染液偏堿 時, 紅細胞和嗜伊紅白細胞的顆粒等被染成紫藍色 ,不易觀察。 材料: 姬氏粉 甘油 25ml 甲醇 25ml 注意: 。 注意: 吸取母液時,不要晃動瓶子 ,以免沉淀物泛起影響染色效果 . 成批血片染色 : 將已用甲醇固定薄血膜的血片插入染色缸,倒入 3%吉氏染液稀釋液( 3毫升吉氏原液加緩沖液或凈水 97毫升,混勻)浸沒血片,同時對厚薄血膜染色 30min(根據(jù)當(dāng)?shù)貙嶋H情況,酌情增減染色時間和濃度),然后用清水輕輕將染液漂洗干凈,將血片標(biāo)本(血膜面朝下)插于晾干板上晾干,包裝,鏡檢。 操作 2 (慢染 )配制 3%染液: 在染色量筒內(nèi)量 2ml蒸餾水或 新鮮涼開 水, 再滴加 吉氏原液 4滴,混勻,滴入待染標(biāo)本上, 染色 30~40min。 如果血片偏藍,說明染液偏鹼性。 通常在染液配制 12周后才使用 , 盛裝染液的瓶子應(yīng)加塞蓋密 。 影響染色效果的因素 ( 4)染液的稀釋濃度 染液的濃度高其著色就快而深,從而瘧原蟲寄生紅細胞的薛氏點粗大顯著,但顏色常偏堿;染液濃度過低則染色時間久,顏色偏酸,薛氏點不明顯或消失。 ( 6)染色用水 染液的稀釋用水和染色后沖洗用水應(yīng)選擇,通常使用的新鮮的蒸餾水或過濾的冷開水。 ● 配置母液時過濾可除去雜質(zhì)顆粒,有助于提高鏡檢質(zhì)量。 ● 鏡檢時間最少不低于 20分鐘。在蚊體內(nèi)進行有性生殖。我省主要是間日瘧,現(xiàn)常有輸入性惡性瘧。 三日瘧 ● 三日瘧在我國已基本消滅。 謝謝諸位領(lǐng)導(dǎo)和同志們!不當(dāng)之處請多加批評指正! 下面由年輕有為的王用彬大夫為大家詳細講解厚薄血膜上間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點,請大家多加鼓勵!謝謝! 咱們學(xué)習(xí)瘧原蟲的鏡檢技術(shù),關(guān)鍵是認清鏡下的原蟲;下面結(jié)合模擬圖片及鏡下照片,簡要復(fù)習(xí)一下間日瘧原蟲、惡性瘧原蟲在厚、薄血膜上各期原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu),說明一下瘧原蟲的計數(shù)方法,然后重點對鏡下瘧原蟲的許多照片進行辨認,最后實地鏡下觀察瘧原蟲。 將(未)成熟大配子體 與 成熟大滋養(yǎng)體 (核分裂前,剛要進入裂殖體前期 )的形態(tài)鑒別 蟲體大小 :幾乎充滿被寄生的紅細胞 核 :一個,較大且致密,周圍有一圈空白的不染色帶 胞漿 :邊緣清楚,不含空泡 瘧色素 :顆粒較多較粗,均勻散在 蟲體大小 :不超過被寄生紅細胞的3/4 核 :一個,延長呈帶狀,周圍無明顯的不染色帶 漿 :邊緣不整齊,多有空泡 瘧色素 :顆粒較少較細,分布不均勻 厚血膜中瘧原蟲的形態(tài) 厚血膜由于用血量較多,涂制的血膜小,紅細胞重疊且干燥慢,致使蟲體皺縮,空泡消失,胞漿變形,其形態(tài)改變的程度與瘧原蟲運動的強弱、空泡有無和大小有關(guān)。 厚血膜瘧原蟲 形態(tài) 惡性瘧裂殖體 厚薄血膜的優(yōu)缺點及其適用范圍 薄血膜: 用血量少 , 瘧原蟲的形態(tài)完整 ,便于瘧原蟲蟲種的鑒定 。 當(dāng)血膜中發(fā)現(xiàn)間日瘧原蟲時,此時應(yīng)注意觀察全血膜有無惡性瘧的配子體,如無可判為間日瘧,如有可判為混合感染。 不易鑒別的混合感染 1)間日瘧各期原蟲和粗環(huán)的惡性瘧環(huán)狀體。 計數(shù)的白細胞數(shù) = 瘧原蟲數(shù) /μl血。 鏡檢示教 以下血片采自現(xiàn)癥病例 薄血膜中惡性瘧原蟲環(huán)狀體( PFR) 蟲體:約占 RBC的 1/51/環(huán)狀、常見幾個蟲同時寄生在同一細胞里 核: 小致密規(guī)則、常見 2個核 胞漿:纖細完整 惡性瘧原蟲環(huán)狀體 薄血膜中 惡性瘧原蟲配子體( PFG) 雄配子體 雌配子體 形態(tài): 臘腸形,兩端鈍圓 新月形,兩端較尖 核: 疏松,淡紅色,位于中央 致密,深紅色,常位于邊緣 色素:黑褐色,小桿狀,常壓在核上和周圍 黑褐色,分布于核周圍 雄配子體 雌配子體 間日瘧原蟲厚血膜中環(huán)狀體的形態(tài) 環(huán)狀體 間日瘧原蟲厚血膜中環(huán)狀體的形態(tài) 環(huán)狀體 間日瘧原蟲厚血膜中大滋養(yǎng)體形態(tài) 間日瘧大滋養(yǎng) 間日瘧原蟲厚血膜中大滋養(yǎng)體形態(tài) 大滋養(yǎng)體 間日瘧原蟲厚血膜中未成熟裂 殖 體 間日瘧未成熟裂殖體 間日瘧原蟲厚血膜中未成熟裂 殖 體 未成熟裂 殖 體 大滋養(yǎng)體 間日瘧原蟲厚血膜中大 配子 體形態(tài) 間日瘧大配子體 間日瘧大滋養(yǎng)體 間日瘧原蟲厚血膜中的色素特點 間日瘧原蟲色素 間日瘧原蟲厚血膜中的色素特點 間日瘧原蟲色素 厚血膜中惡性瘧原蟲環(huán)狀體( PFR) 惡性瘧原蟲環(huán)狀體(兩核) 厚血膜中惡性瘧原蟲環(huán)狀體( PFR 滿天星 ) 厚血膜中惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體( PFT) 惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體 惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體 厚血膜中惡性瘧原
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