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質(zhì)粒的酶切ppt課件-wenkub

2023-06-10 00:15:01 本頁面
 

【正文】 DNA片段的膠條 ( 小于 ) 搗碎 , 置于 。 2. 命名 : 限制酶由三部分構(gòu)成,即菌種名、菌系編號、分離順序。 例如: HindⅢ 前三個字母來自于菌種名稱H. influenzae, “ d ” 表示菌系為d型血清型;“ Ⅲ ”表示分離到的第三個限制酶。 2. 加入等體積的 TrisCl飽和酚 ( pH ) , 振蕩混勻; 20℃ 放置 510min待結(jié)凍; 3. 10000rpm 5min, 上層液轉(zhuǎn)移置另一離心管中; 4. 原管加入 1/4體積 H2O于含膠的離心管中 , 振蕩混勻; 20℃ 放置 510min待結(jié)凍; 5. 10000rpm 5min, 合并上清液; 6. 用等體積酚 /氯仿抽提 2次 、 氯仿抽提 1次 , 取上清于新微量離心管; 7. 加入 1/10體積 3M NaAc( pH ) , 無水乙醇 , 20℃ , 放置 30min( 或過夜 ) ; 8. 13000rpm 10min, 棄上清
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